Biotinylatedliposomescanbeconjugatednon-covalentlywith(strept)avidinthrougheitherdirectinteractionwiththeprotein/antibodyconjugatedto(strept)avidinorbycouplingwithotherbiotinylatedproteinsusing(strept)avidinasabridgingmolecule.Bothavidinand(strept)avidinformstrongnon-covalentbondwithbiotin.Thehighresistancetobreakdownmakesthemveryusefulinbioconjugatechemistry.However,(strept)avidinhasreplacedavidininmostbioconjugationapplicationsduetoitsenhancedproperties.NeutrAvidin(Thermofisher)isamodifiedavidinwithoutnegativeproperties.Itperformsmuchbetterthanoriginalavidinandsometimes(strept)avidin.
Inordertoexploitthehigh-affinityinteractionofbiotinwith(strept)avidin,atwo-step“sandwich”protocol(MethodA)hasbeendevelopedforthepreparationoftargetedimmunoliposomes.Inthismethodology,(strept)avidinisfirstattachedtobiotinylatedliposomes,thenabiotin-modifiedprotein/antibodyisintroducedintothebiotinylated(strept)avidin-labeledliposomes.Thisnon-covalentapproachisrapid,extremelyversatileandapplicabletonumeroustargetingligandsofinterestwithrespecttoinvitroandinvivoapplications.Alternatively,insteadofforminga(strept)avidinbridge,(strept)avidinmoleculecanalsobecovalentlyconjugatedtoantibodyorligand(MethodB)andnon-covalentlyboundtoliposomescontainingbiotinonsurfaceinordertoformimmunoliposomes.
ImmunoFluor™-BiotinisaNon-PEGylatedproduct.Forotherreactive(PEGylatedandnon-PEGyalatedproducts)biotinylatedliposomesandalsoImmunoFluor™productssuitableforothertypesconjugationmethodsseehere.
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LOQ-定量限LOD-检测限
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
1.步骤简单，45分钟内完成测定，比经典Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl 。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证.pdf(17431.6k)
加入荧光标记探针，巧妙地把核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起，借助于荧光信号来检测PCR产物。一方面提高了灵敏度，另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定CT值，从而根据CT值确定起始DNA的拷贝数，做到真正意义上的DNA定量。另外由于CT值是一个完全客观的参数，CT值越小，模版DNA的起始拷贝数越小。因此，利用CT值确定DNA拷贝数实时PCR方法比普通终点定量方法更加准确
