生化实验实验三蛋白质颜色反应及沉淀反应
实验三
蛋白质颜色反应及沉淀反应
一、目的
1
、掌握鉴定蛋白质的原理及方法。
2
、熟悉蛋白质的沉淀反应。
3
、进一步掌握蛋白质的有关性质。
二、原理
蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用，
可产生特定的颜色反应，
不同蛋白质所
含氨基酸种类不同，
颜色反应亦不同。
颜色反应不是蛋白质的专一反应，
一些非蛋白物质亦
可产生相同的颜色反应，
因此不能仅根据颜色反应的结果决定被测物质是否是蛋白质。
颜色
反应是一些常用的蛋白质定量测定的依据。
多数蛋白质是亲水胶体，
当其稳定性被破坏或与某些试剂结合成不溶解的盐后，
即产生
沉淀。
三、实验器材
1
、鸡蛋白
2
、试管
3
、吸管
4
、滴管
5
、水浴锅等
四、实验试剂
1
、卵清蛋白液：将鸡蛋白用蒸馏水稀释
20-40
倍，
2-3
层纱布过滤，滤液冷藏备用。
2
、
0.1%
茚三酮溶液：
0.1g
茚三酮溶于
95%
乙醇并稀释至
100ml
。
3
、
10%
氢氧化钠溶液：
10g
氢氧化钠溶于蒸馏水并稀释至
100ml
。
4
、浓硝酸：比重
1.42
。
5
、
1%
硫酸铜溶液：硫酸铜
1g
溶于蒸馏水，稀释至
100ml
。
6
、饱和硫酸铵溶液：蒸馏水
100ml
加硫酸铵至饱和。
7
、
95%
乙醇。
8
、结晶氯化钠。
9
、
1%
醋酸铅：
1g
醋酸铅溶于蒸馏水并稀释至
100ml
。
10
、饱和苦味酸溶液。
11
、
1%
醋酸溶液：冰醋酸
1ml
用蒸馏水稀释至
100ml
。
五、操作
1
、颜色反应：
A
、双缩脲反应：
蛋白质分子中含有肽键，与两分子尿素经过加热形成的双缩脲的结构
相似，能与硫酸铜结合成红紫色的络合物。
取一支试管，
加蛋白质溶液
10
滴，
再加
10%NaOH
溶液
10
滴及
1%CuSO
4
溶液
2
滴，
混匀，
观察是否出现紫玫瑰色。
B
、黄色反应：
蛋白质分子中含有苯环结构的氨基酸。遇硝酸可硝化成黄色物质，此物
质在碱性环境中变为橘黄色的硝苯衍生物。
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发布于 ： 2018-08-06
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