小鼠赖氨酰氧化酶(LOX)化学发光免疫分析试剂盒 价格生物在线 Labon...
货号: | E-CL-M0005c |
样本: | 血清,血浆,组织均浆,细胞培养上清等 |
适应物种: | Mouse |
应用: | 科研实验 |
检测方法: | 化学发光 |
检测限: | 62.5--4000pg/mL |
供应商: | 武汉伊莱瑞特生物科技有限公司 |
数量: | 现货 |
该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组LOX浓度。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心CLIA法。用抗小鼠LOX抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的LOX会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠LOX抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠LOX抗体与结合在包被抗体上的小鼠LOX结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入发光底物混合液,发光底物在辣根过氧化物酶的催化下发出荧光,用化学发光免疫分析仪测定化学发光值(RLU),LOX浓度与化学发光值之间呈正相关,通过绘制标准曲线求出标本中LOX的浓度。
反应类型 | 双抗体夹心CLIA |
规格 | 96T |
反应时间 | 4.5h |
反应性 | 小鼠 |
检测方法 | Chemiluminescence |
检测范围 | 62.5–4000pg/mL |
灵敏度 | 37.5pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
特异性:可检测天然或部分重组小鼠LOX,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性:板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | RLU | Average | CorrectedRLU |
4000 | 63211 | 64076 | 64041 |
64941 | |||
2000 | 26218 | 28021 | 27986 |
29824 | |||
1000 | 15738 | 14533 | 14498 |
13328 | |||
500 | 6289 | 6653 | 6618 |
7017 | |||
250 | 3591 | 3395 | 3360 |
3199 | |||
125 | 1708 | 1703 | 1668 |
1698 | |||
62.5 | 718 | 772 | 737 |
826 | |||
0 | 35 | 35 | -- |
35 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assayPrecision | Inter-assayPrecision | |||||
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
mean(pg/mL) | 198.56 | 563.17 | 1475.33 | 207.04 | 570.4 | 1387.73 |
Standarddeviation | 19.36 | 64.37 | 97.08 | 19.25 | 57.67 | 89.23 |
CV(%) | 9.75 | 11.43 | 6.58 | 9.3 | 10.11 | 6.43 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
SampleType | Range(%) | AverageRecovery(%) |
Serum(n=5) | 85-98 | 91 |
EDTAplasma(n=5) | 93-104 | 99 |
Cellculturemedia(n=5) | 86-99 | 91 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cellculturemedia(n=5) | ||
1:2 | Range(%) | 90-104 | 84-96 | 99-112 |
Average(%) | 95 | 90 | 106 | |
1:4 | Range(%) | 85-98 | 97-114 | 94-111 |
Average(%) | 92 | 105 | 102 | |
1:8 | Range(%) | 89-106 | 90-105 | 87-98 |
Average(%) | 97 | 98 | 93 | |
1:16 | Range(%) | 99-116 | 83-95 | 89-104 |
Average(%) | 106 | 90 | 95 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
名称 | 规格 | 保存条件 |
CLIA酶标板(可拆卸) MicroCLIAPlate(Dismountable) | 8孔×12条 | -20℃, 可存放6个月 |
冻干标准品 ReferenceStandard | 2支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) ConcentratedBiotinylatedDetectionAb(100×) | 1支120μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) ConcentratedHRPConjugate(100×) | 1支120μL | -20℃(避光), 可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 ReferenceStandard&SampleDiluent | 1瓶20mL | 4℃, 可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 BiotinylatedDetectionAbDiluent | 1瓶14mL | |
酶结合物稀释液 HRPConjugateDiluent | 1瓶14mL | |
浓缩洗涤液(25×) ConcentratedWashBuffer(25×) | 1瓶30mL | |
发光底物A液 SubstrateReagentA | 1瓶5mL | 4℃(避光) |
发光底物B液 SubstrateReagentB | 1瓶5mL | 4℃ |
封板覆膜 PlateSealer | 5张 | |
产品说明书 ProductDescription | 1份 | |
质检报告 CertificateofAnalysis | 1份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
操作步骤
1.Add100μLofstandardorsampletoeachwell.Incubatefor90minat37℃. | |
2.Removetheliquid. | |
3.Add100μLBiotinylatedDetectionAb.Incubate1hourat37℃.Aspirateandwash3times. | |
4.Add100μLHRPConjugate.Incubate30minat37℃.Aspirateandwash5times. | |
5.Add100μLSubstrateMixtureSolution.Incubatefor5minat37℃. | |
6.Fluorescenceappeared.MeasuretheRLUvaluewiththeChemiluminescenceimmunoassayanalyzer.Calculationoftheresults. |
温馨提示:不可用于临床治疗。
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发布于 : 2021-07-20
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