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Mabtech/Human EBI3 ELISpot PLUS kit (ALP) (3459-4APW-2)/3459-4APW-2
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Mabtech/Human EBI3 ELISpot PLUS kit (ALP) (3459-4APW-2)/3459-4APW-2
品牌 / 
Mabtech
货号 / 
3459-4APW-2
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ELISpotPLUS for enumeration of cells secreting EBI3

This kit is ideal for users who want a convenient and sensitive assay. The assay is designed for the enumeration of cells secreting human EBI3. The kit includes ELISpot plates pre-coated with monoclonal antibody, biotinylated detection antibody, Streptavidin-ALP and ready-to-use BCIP/NBT-plus substrate.

The monoclonal antibodies in this kit are specific to the EBI3 subunit of IL-27 and IL-35. ELISpot assays based on antibodies to EBI3 will detect both IL-27 and IL-35.

Pre-coated plates reduce assay time and minimize variability.

Human EBI3 ELISpotPLUS kits are also available with Streptavidin-HRP and TMB substrate. See Related products.


Analyte Information

EBI3EBI3 is a subunit molecule that forms heterodimers with other proteins in the IL-12 family. IL-27 is a heterodimer composed of the subunits EBI3 and p28. IL-35 is a heterodimer composed of the subunits EBI3 and p35. IL-39 is a heterodimer composted of the subunits EBI3 and p19. Native IL-39 has not been detected in human.

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Customers from USA or Canada: Please send your order to mabtech.usa@mabtech.com.
Application:
  • ELISpot
Reactivity:
  • Human
Documentation:Datasheet/ProtocolSDS
Contents:
  • Biotinylated detection mAb (MT140)
  • Streptavidin-ALP
  • Substrate (BCIP/NBT-plus)
  • 2 Pre-coated MSIP white plates (mAb MT23A14)
Size:2 plates

I have compared Mabtech ELISpot assay to ELISpot assays we run at our company on regular basis "head-to-head" using identical samples. Mabtech"s kits proved to be superior to our protocol, had significantly lower background and provided better and higher detection of spots.

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2021-08-14
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2021-09-04
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自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。与人类自身免疫疾病相似,犬也可以自发地发生复杂的系统性自身免疫疾病,针对自身抗原的自身抗体是这些自身免疫性疾病的一个关键特征。本研究使用人蛋白芯片鉴定出白细胞介素增强子结合因子2和3(ILF2和ILF3)可作为犬免疫介导的风湿性疾病的自身抗原。 1. 初筛 选择来自21只新斯科舍省鸭收费猎犬(NSDTR)的血清用于蛋白芯片筛选,其中9只为有ANAS的犬,3... 查看更多>
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货号名称描述打包价钱*数据表
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IK00201SAM ELISAS-腺苷甲硫氨酸ELISA试剂盒96次测试$ 549下载
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IK00203sSAM ELISA 3s适用于血浆,血清或组织/细胞匀浆样品的S-腺苷甲硫氨酸ELISA试剂盒48项测试$ 449下载
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生长因子和细胞外基质在创伤修复过程中的作用

雾鸿

[摘要] 本文概括介绍了与创伤愈合有关的几种生长因子,包括血小板源性生长因子、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、转化生长因子、血管内皮生长因子、白细胞介素-1、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子;以及参与创伤愈合的4种细胞外基质:胶原蛋白、粘连糖蛋白、蛋白多糖和角质细胞胶原酶-1。初步阐明了这些创面愈合指标对鼻内镜手术术后的评估意义。

[关键词]生长因子(GrowthFactor)细胞外基质(ExtracellularMatrix)内窥镜检查(Endoscopy)

【生长因子】创伤愈合是一个复杂而又高度协调的过程,基本上可以分为局部炎症反应、细胞增殖分化和组织修复重建三个有区别又相互交错的阶段,这一过程涉及多种生长因子和细胞因子的相互作用、相互影响,共同调控细胞迁移、增生、分化、血管生成、基质沉积和组织塑形等。
1.血小板源性生长因子(plateletderivedgrowthfactor,PDGF)。PDGF因最初从血小板中分离出而得名,组织损伤后,平滑肌细胞、毛细血管内皮细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞和成肌细胞增生、激活都可释放PDGF,刺激多种细胞的分裂增殖,并能引起成纤维细胞、平滑肌细胞和单核细胞的增生和游走,促进纤维蛋白的生成。有人[1]认为,PDGF通过磷脂酸激酶3产生过氧化氢,从而激发炎性物质的产生。张忠明[2]对PDGF调控细胞增殖的作用机制进行了总结,PDGF与受体结合后,可通过四条途径促使细胞分裂、增殖:①酪氨酸激酶途径;②启动细胞核内C-myc、C-fos和C-jun基因的转录;③引起受体自动磷酸化和在酪氨酸残基上的胞浆底物的磷酸化;④增加胞内Ca2+和Na+/H+的交换。Piazuelo等[3]将含PDGF基因的真核表达载体转染小鼠成纤维细胞,发现转染阳性细胞中有PDGF蛋白表达,并可促进小鼠成纤维细胞增殖和胶原合成,这进一步证实PDGF参与了创伤愈合过程。
2.成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF)。1974年,Grospodarowicz首先从牛垂体中分离出一种能引起Balb/c373成纤维细胞增殖的多肽物质,并命名为成纤维细胞生长因子。FGF按其等电点的不同分为酸性FGF(a-FGF)和碱性FGF(b-FGF)。FGF是肽类生长因子,能吸引、趋化炎性细胞浸润,刺激与创伤有关的细胞快速增殖、迁移,合成新的细胞间质,毛细血管增生,新的肉芽组织形成,加速胶原沉积。同时能诱导创伤周围组织中的成纤维细胞向创面迁移,吸引并刺激一些能分泌基质降解酶的细胞到创面,刺激成纤维细胞增殖,促进创面愈合。有报道[4],角膜损伤后伤口处b-FGF表达增强。Kawaguchi等[5]研究证明,局部应用FGF-2可加速骨折的愈合。
3.表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)。EGF是从颔下腺分离出的一种6KD多肽。EGF为细胞有丝分裂原,在组织损伤修复的早期,可促进细胞增殖、迁移,强力趋化各种炎性细胞及各种炎症修复细胞向损伤部位聚集,同时对肉芽组织中的纤维和基质沉积起主导作用。Kimura等[6]证明了EGF对鼻粘膜腺体细胞的增殖作用。
4.转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)。最初从肉瘤病毒转化的细胞培养基中分离出来,故名。可分为五大类,目前研究的较为清楚的是TGF-α和TGF-β。TGF-α与EGF在氨基酸序列方面有33%~44%同源,可与EGF受体结合而发挥作用,其与EGF受体结合,激活酪氨酸激酶,最终引起细胞分裂。Cribbs等[7]通过原位杂交检测创面TGF-αmRNA的水平,来反映创面愈合的能力。TGF-β是与创伤愈合关系最密切的生长因子,几乎影响到愈合的各个时相[8]。TGF-β能够诱导细胞外基质的产生、沉积,增加细胞间的基质粘附,促进细胞的增殖、迁移、分化,加速肉芽组织的形成。Kishi等[9]在培养的鼠皮肤成纤维细胞中,加入外源性TGF-β1,证明其可促进胶原、粘多糖的合成和细胞增殖。
5.血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)。VEGF作为上调血管生成的重要因子,能特异性地直接作用于血管内皮细胞,诱导血管内皮细胞增殖、迁徙及血管腔形成,进而导致新生血管的生成。VEGF还可明显增加血管的通透性,进而促进血浆蛋白在细胞外基质中沉积,为成纤维细胞和血管内皮细胞长入提供临时基质。有文献报告[10]认为,VEGF是通过上调内皮细胞中eNOS的合成,致NO含量增加而发挥其生物活性的。Street等[11]研究证明,VEGF可通过促进血管生成和骨的代谢而加速骨折愈合。
6.细胞因子(cytokines)。细胞因子也是生长因子,主要包括白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumournecrosisfactor,TNF)。细胞因子以网络的形式分布并发挥着各自的作用。IL-1是由巨噬细胞分泌的多肽类生长因子,能促进炎症蛋白和炎症介质的释放,还可诱导内皮细胞表达内皮粘附分子;IL-6主要作为前炎症物质,在激活宿主局部防御机制的同时,也直接影响纤维细胞与内皮细胞的生长。Cole等[12]采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbertassay,ELISA)测定了鼠角膜损伤后IL-6的含量,原位杂交检测了IL-6mRNA的表达;TNF能刺激纤维母细胞的增殖及胶原合成,并能刺激血管再生。Herzog等[13]经研究表明,硫酸锌造成鼠嗅球损伤后,外源性TGF-α、EGF和bFGF均能够促进嗅神经元的再生和神经支配的修复。
【细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)】创面愈合过程中,迁移增生的平滑肌细胞和成纤维细胞,分泌的细胞外基质起到重要作用,它可以为细胞提供移动的网络和向导,把细胞粘附在一起,对组织的愈合起到骨架作用,并且影响各种生长因子生物活性及其调节作用。
1.胶原蛋白(collagen)。胶原蛋白有10余种,比较重要的是Ⅰ型和Ⅲ型胶原。胶原蛋白赋予ECM抗牵拉张力,能使血管保持稳定的结构和张力,为多种生长因子和细胞参与创伤反应提供重要场所,对细胞的生长、分化、粘附及迁移有明显影响。胶原中含有羟脯氨酸,可通过测定羟脯氨酸含量间接了解胶原蛋白含量。Meltem等[14]采用改进的氯胺T氧化法测定组织中羟脯氨酸含量,研究胶原蛋白在创伤愈合中的作用。
2.粘连糖蛋白(adhesiveglycoproteins)。包括纤维连接蛋白(firbronectin,FN)及层粘连蛋白(laminin,LN)等。FN是创伤愈合中的“多功能分子”。作为趋化因子,它对单核细胞、中性粒细胞和成纤维细胞都有化学趋化作用,刺激细胞向创面移动;作为粘附分子,它能粘附成纤维细胞、单核巨噬细胞于各种间质中;作为调理因子,它能与细菌和组织碎片等特异性结合而招引吞噬细胞的净化;作为细胞运动的基质,它参与基质的产生和组装,构成表皮细胞增生和爬行的骨架[15]。FN与细胞间的相互作用可能由整合素、其他受体或FN的疏水区嵌入细胞磷脂双分子层的疏水链中所致[16]。LN主要存在于基底膜的透明层,它可将细胞牢固地连接在基底膜上,又可使基底膜中的成份互相连接,维持组织结构的稳定性,并且可促进细胞粘附和分化,抑制迁移。
3.蛋白多糖(proteoglycans)。蛋白多糖是构成ECM的主要成份,它能调节细胞增生、粘附、移行等,控制ECM沉积,将多种细胞连接在一起,对维持组织弹性有重要作用。
4.角质细胞胶原酶-1。ECM的产生与降解对组织塑形是必需的,包括胶原酶-1在内的金属基质蛋白酶能有效降解细胞外基质成份,为愈合创造良好的条件。皮肤受到损伤后,创面角质细胞快速表达胶原酶-1,并在愈合期间持续存在,直至完全上皮化后才停止。因此,Pilcher等[17]通过ELISA测定创面胶原酶-1的含量,来评价创面愈合能力。
【创伤愈合与鼻内镜手术】自从奥地利格拉茨大学Messerklinger教授(70年代初)提出“鼻内镜鼻窦外科”以来,鼻内镜在临床上的应用迅速普及。鼻内镜手术作为治疗慢性鼻窦炎、鼻息肉的有效手段,以恢复鼻腔鼻窦粘膜形态和功能为最终目的,因此,了解术后鼻腔鼻窦粘膜的愈合情况,是判断手术疗效的关键。手术后上皮再生就是创伤愈合的过程。Hansson等[18]研究说明人鼻粘膜受到损伤后,再生的细胞胞质中生长因子的含量明显增加,几乎所有的鼻粘膜细胞都分泌多肽生长因子,参与这一修复过程。Watelet等[19]指出鼻粘膜的创伤修复过程涉及PDGF、FGF、EGF、TNF等多种生长因子和胶原蛋白、FN、金属基质蛋白酶等多种细胞外基质,共同调节粘膜上皮的创伤修复过程。因此,可以通过测定创面各种生长因子和细胞外基质含量的高低,来评估创面愈合的能力,对鼻粘膜恢复情况作出客观判断。Watelet等[8]应用ELISA对8例鼻内镜术后病人和13例对照者,鼻分泌液中TGF-β1、TGF-β2、EGF和PDGF的含量进行了测定,研究鼻粘膜创伤愈合的动态变化。此法准确、可靠,操作方便,病人无痛苦,可动态观察鼻粘膜愈合情况,对完善治疗,提高手术治愈率有重大意义。但如何将细胞外基质含量的测定与生长因子的测定联合起来,如何选择最佳组合指标,对鼻内镜术后粘膜的愈合好坏进行评估,还有待于进一步研究。

参考文献
[1]BaeYS,SungJY,KimOS,etal.Platelet-derivedgrowthfactor-inducedH2O2productionrequirestheactivationofphosphatidylinositol3-kinase.JBiolChem,2000,275:10527-10531.
[2]张忠明.血小板衍生生长因子对骨组织的作用.国际医药卫生导报,2002,75(7):46-48.
[3]PiazueloE,JimenezP,LanasA,etal.Platelet-derivedgrowthfactorandepidermalgrowthfactorplayamajorroleinhumancolonicfibroblastrepairactivities[J].EurSurgRes,2000,32(3):191-196.
[4]FaktorovichEG,BadawiDY,MaloneyRK,etal.GrowthfactorexpressionincornealwoundhealingafterexcimerlaserKeratectomy.Cornea,1999,18:580-588.
[5]KawaguchiH,NakamuraK,TabataY,etal.Accelerationoffracturehealinginnonhumanprimatesbyfibroblastgrowthfactor-2[J].JClinEndocrinolMetab,2001,86(2):875-880.
[6]KimuraT,MajimaY,GuoY,etal.Theeffectofgrowthfactorsontheproliferationanddifferentiationofhumannasalglandcells.ArchOtolaryngolHeadNeckSurg,2002,128:578-582.
[7]CribbsRK,LuquettsMH,BesnerGE.Accelerationofpartialthicknessburnwoundhealingwithtopicalapplicationofheparin-bindingEGF-likegrowthfactor(HB-EGF).JBurnCareRehABIl,1998,19:95.
[8]WateletJ-B,GevaertP,BachertC,etal.SecretionofTGF-β1,TGF-β2,EGFandPDGFintonasalfluidaftersinussurgery.EurArchOtorhinolaryngol,2002,259:234-238.
[9]KishiK,NakajimaH,TajimaS.Differentialresponsesofcollagenandglycosaminoglycansynthesesandcellproliferationtoexogenoustransforminggrowthfactorβ1inthedevelopingmouseskinfibroblastsinculture[J].BrJPlastSurg,1999,52(7):579-582.
[10]CampbellB,ChuhranC,etal.Vascularendothelialgrowthfactorattenuatestrauma-inducedinjuryinrats[J].BrJPharmacol,2000,129(1):71-76.
[11]StreetJ,BaoM,deGuzmanL,etal.Vascularendothelialgrowthfactorstimulatesbonerepairbypromotingangiogenesisandboneturnover.ProcNatlAcadSciUSA,2002,99(15):9656-9661.
[12]ColeN,BaoS,WillcoxM,etal.Expressionofinterleukin-6inthecorneainresponsetoinfectionwithdifferentstrainsofpseudomonasaeruginosa.InfectImmun,1999,67(5):2497-2502.
[13]HerzogC,OttoT.Regenerationofolfactoryreceptorneuronsfollowingchemicallesion:timecourseandenhancementwithgrowthfactoradmiNISTration.BrainResearch,1999,849:155-161.
[14]MeltemBK,TanyelFC,SevdaM,etal.Thepreventiveeffectofheparinonstrictureformationaftercausticesophagealburns.JPediatrSurg,1999,34(2):291.
[15]刘莛.Fn在角膜创伤愈合中的研究进展.医学综述,2001,7(6):326-328.
[16]BaneyxG,BaughL,VogelV.Coexistingconformationsoffibronectinincellcultureimagedusingfluorescenceresonanceenergytransfer.ProcNatlAcadSciUSA,2001,98(25):14464-14468.
[17]PilcherBK,DuminJ,SchwartzMJ,etal.KeratinocyteCollagenase-1expressionrequiresanepidermalgrowthfactorreceptorautocrinemechanism.JBiolChem,1999,274(15):10372.
[18]HanssonHA,JorgensenF,PetrusonB,etal.Regeneratinghumannasalmucosacellsexpresspeptidegrowthfactors.ArchOtolaryngolHeadNeckSurg,1991,117:1368-1377
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CHAPS的应用:

在实验室中,CHAPS和其他两性离子洗涤剂可用于在分离蛋白之前诱导细胞裂解。它也可以用作二维凝胶电泳过程中的缓冲液,在某些情况下,它比SDS等阴离子洗涤剂更受欢迎。在蛋白质分析之前,可以通过透析从溶液中去除CHAPS。另一种技术利用专门的树脂和旋转柱也可以用来有效地去除皲裂

用于监测化学反应或蛋白质结合的紫外/可见光谱学

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ExoQuick and ExoQuick-TC Products

Product Size Catalog #
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ExoQuick Plasma prep and Exosome precipitation kit (5 ml ExoQuick plus 500 ul Thrombin at 500U/mL), replaces EXOQ5TD-1 product 75 reactions EXOQ5TM-1
Thrombin Plasma prep for Exosome precipitation (500 ul at 500U/mL), replaces TDEXO-1 product 100 reactions TMEXO-1
ExoQuick serum exosome precipitation solution (20 ml) 300 reactions EXOQ20A-1
ExoQuick-TC for Tissue Culture Media and Urine (10ml) 10 reactions EXOTC10A-1
ExoQuick-TC for Tissue Culture Media and Urine (50ml) 50 reactions EXOTC50A-1
Exosome-depleted FBS Media Supplement - USA Certified 50 ml EXO-FBS-50A-1
Exosome-depleted FBS Media Supplement - USA Certified 250 ml EXO-FBS-250A-1
ExoQuick-LP Lipoprotein Pre-Clear & Exosome Precipitation Kit 5 reactions EXOLP5A-1


XONACHIPS®系列产品

特点

       由环烯烃共聚物制成的分隔平台;

•     已组装完全,使用简便;

       光学透明且,是荧光实时成像的理想选择;

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