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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠MDC单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的MDC与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠MDC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗猪IP-10(interferon-inducIBLeprotein10)单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IP-10与单抗结合,加入生物素化的抗猪IP-10,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物 查看更多>
��试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应� 查看更多>
��试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应� 查看更多>
��试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应� 查看更多>
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪α干扰素(IFN-α)水平。用纯化的猪α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α),再与HRP标记的IFN-α抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠SCF单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的SCF与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠SCF,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人NF-kBp65单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的NF-kBp65与单抗结合,加入生物素化的抗人NF-kBp65,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多>
脂联素,也称为30 kDa 的脂肪细胞补体相关蛋白(Acrp30),是一种主要由脂肪细胞分泌的激素,它调控了多个代谢过程。它合成时为30 kDa 的单体,随后组装成低分子量(LMW)的同源三聚体,包含两个以二硫键连接的单体以及另一个非共价连接的亚基。2 同源三聚体进一步形成中等分子量(MMW)的六聚体和高分子量(HMW)的多聚体。1,2 尽管三种分子量的脂联素异构体都存在于血 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sFas-L单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sFas-L与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sFas-L,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多>
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ELISA检测方法有哪些 123
captain小浪花2018-03-12
您好,厚百生物商城很高兴为您解答。Elisa常用的方法有四种:
1. 直接法测定抗原 2.间接法测定抗体 3.双抗体夹心法测定抗原4. 竞争法测定抗原 厚百生物专业提供各类生化实验试剂、仪器、耗材,提供技术服务,满足您的实验室常规采购需求。厚百,让您更省心!
ELISA试剂盒都可以通过什么仪器使用?是所有的ELISA都可以通过酶标仪测试吗
手头有P蛋白的鼠单抗和兔多抗,现在想检测培养的肿瘤细胞中P蛋白的含量,用竞争法太浪费抗原了,想用下面的方法(类似夹心法):
包被单抗(过量)——抗原37度1小时——多抗37度1小时——二抗——显色

按道理应该可行,但有一个问题:兔二抗对鼠一抗也会反应吗?
双抗体夹心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.’最后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

复习了很多文献在测定方法里面均提到了CV

例如:

Theintra-assaycoefficientofvariationfortheassaywas4-6%.

Theanalyticcoefficientofvariationwas10.2%

问题是:

我是否可以直接使用说明书里的CV值?

如果不可以,我该如何操作进行计算

ELISA试剂盒的作用有什么呢123
纯杰宗の62362018-01-22
ELISA检测试剂盒用途:
ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM抗体.
看到很多ELISA试剂盒的说明书上都有标示回收率,但没具体说是绝对还是相对回收率。一般这类试剂盒的回收率是指绝对还是相对?对于ELISA试剂盒的回收率应该怎么去验证?哪位大神能指导一下吗?具体应该怎么做?谢谢。
:(我第一次用ELISA竞争法来测试样品中抗原含量,发现做出的标准曲线上限,也就是试剂盒中浓度为0的标准品所限定的范围比样品的还低,想不通是哪里出了问题(确保都是按照试剂盒说明书操作)?请哪位高人为我指点迷津。多谢了!!
各位大侠,我做了两次棋盘滴定:
第一次:包被抗体浓度为:8ug/ml,4,2,1,0.5,0.25,0为A,B,C,D,E,F,G
血清稀释度为1:100
酶标抗体稀释度为:1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2,3,4
结果为:1234
A3.3440.7120.4900.238
B2.7570.5230.3450.176
C2.4280.4550.3100.172
D>4.51.7771.2150.439
E>4.51.3570.7890.424
F1.1090.2540.1720.110
G1.3660.3310.1970.069(空白)从结果可以判断包被抗体浓度1ug/ml最合适

第二次:包被抗体1ug/ml
血清稀释度为1:25,1:50,1:100,1:150,1:200,1:250,1:300,空白为A,B,C,D,E,F,G,H
酶标抗体稀释度为:1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2,3,4
结果为:1234
A2.9930.6390.3380.236
B3.0210.7220.3070.191
C2.3360.4960.3080.176
D2.2560.4640.3040.176
E2.0310.4160.2470.139
F1.8300.3360.2310.153
G1.5980.3320.2270.132
空白H0.1580.0780.0720.074
这样的话应该是血清稀释度1:50最合适,酶标抗体稀释度1:1000最合适,但是这样的话OD值为3.021,是不是太大了?OD值是不是在1左右比较好呢?应该选择哪个浓度,哪个稀释度来做正式试验呢?
ELISA的种类有多种,常用的是DAS-ELISA、NCM-ELISA、TDS-ELISA等。
DAS-ELISA试剂盒中抗体有包被抗体和酶标抗体,这两种抗体是一种抗体,前者没有酶标,后者用酶进行了标记。
NCM-ELISA一般有一抗和二抗,这两种抗体不一样,前者(一抗)一般是鼠抗体或兔抗体,没有酶标,相对应的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗体,用酶进行标记。也有用马大规模备抗体的。
TDS-ELISA是三抗体ELISA,第三级的抗体是将信号级联放大。
以上三种是比较常见的,还有其他一些试剂盒,可参考免疫学的内容。
维伯鑫不错,他们专门做试剂盒的额,还有自己实验室。
1.加大生物素标记的多抗的用量;
2.加大辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素;
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