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indoor biotechnologies/Recombinant Asp f 1.0101 (RP-AF1-1)/1/RP-AF1-1
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4000-520-616
| Allergen: | rAsp f 1 (Aspergillus fumigatus allergen 1.0101), Common mold |
| Unit: | 250µg |
| Source: | Pichia pastoris |
| Mol. Wt: | 18kD |
| Purification: | Purified by multi-step HPLC. Purity on silver-stained SDS-PAGE >95%. |
| Concentration: | See product insert. |
| Formulation: | Preservative-free and carrier-free in phosphatebuffered saline, pH 7.4. Filtered through 0.22µm filter. |
| Storage: | Store at -20ºC.Avoid repeated Freeze/Thaw cycles. |
| Notes: | 1) rAsp f 1 has a C-terminal 6x His-tag. 2)Upper band is Asp f 1 dimer. |
| Product Resources: | Recombinant Asp f 1Certificate of Analysis |
| Allergens are provided for research and commercial use in vitro: not for human in vivo or therapeutic use. | |
| References: | |
| |
蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2018-12-26
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2018-12-26
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔MMP-7单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的MMP-7与单抗结合，加入生物素化的抗兔MMP-7，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多
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2018-12-26
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2021-08-17
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2021-09-21
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠InhibinA单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的InhibinA与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠InhibinA，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Stre 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠VEGF单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的VEGF与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠VEGF，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠Endostatin单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的Endostatin与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠Endostatin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记 查看更多
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2019-04-15
蚂蚁淘生物2019年代理品牌目录 查看更多
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2021-08-09
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪α干扰素(IFN-α)水平。用纯化的猪α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α)，再与HRP标记的IFN-α抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。 查看更多
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2021-08-14
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IntroductionQuality is important in all aspects of tissue culture since the quality of materials used i.e. media and other reagents) will affect the quality of 查看更多
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商品咨询
【求助】竞争法ELISA试验为何同一样品在不同时间测得的OD值...123
txc6702021-07-25
【求助】ELISA实验OD值偏低,标准品的OD值比说明书要低一半,几乎...123
fighting332021-08-06
ELISA试剂盒评价的质量标准 123
韙炣蚧欛徵穱2021-07-21
ELISA试剂盒名称一般由“（物种）＋（测定指标）＋酶联免疫试剂盒（ELISA kit）”。目前，市场上供应的试剂盒有用于科研的，也有用于临床诊断的。应用于临床诊断的试剂盒必须有卫生部的许可文号，国家对应用于临床诊断的试剂盒有严格的规定和要求，制定相关的手则来管理试剂盒的质量。而应用于科研的试剂盒，国家则没有出台相关的质量管理规定，对应科研试剂盒质量评估科研参考以下几点：1.准确性2.精密度3.灵敏度4.稳定性5.回收率6.曲线的相关系数本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。
上海卓康生物科技有限公司
如何正确选择ELISA试剂盒123
闲逛7792021-08-08
第一步、明确检测何种蛋白
第二步、明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性最好
第三步、寻找检测这些物种蛋白的试剂盒
第四步、咨询商家ELISA是试剂盒使用的抗体类型:多抗还是单抗? 单抗是针对什么抗原决定簇的?
第五步、 做出自己的判断该买哪个试剂盒，或者实在没有可以找公司进行订制实验
第二步、明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性最好
第三步、寻找检测这些物种蛋白的试剂盒
第四步、咨询商家ELISA是试剂盒使用的抗体类型:多抗还是单抗? 单抗是针对什么抗原决定簇的?
第五步、 做出自己的判断该买哪个试剂盒，或者实在没有可以找公司进行订制实验
求助!良心推荐性价比高的ELISA试剂盒! 细胞技术讨论版论坛123
小许医2021-08-02
【求助】求助最佳的抗体浓度 免疫学讨论版123
wangping9806232013-07-18
各位大侠，我做了两次棋盘滴定：
第一次：包被抗体浓度为：8ug/ml,4,2,1,0.5,0.25,0为A,B,C,D,E,F,G
血清稀释度为1:100
酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4
结果为：1234
A3.3440.7120.4900.238
B2.7570.5230.3450.176
C2.4280.4550.3100.172
D>4.51.7771.2150.439
E>4.51.3570.7890.424
F1.1090.2540.1720.110
G1.3660.3310.1970.069(空白)从结果可以判断包被抗体浓度1ug/ml最合适
第二次：包被抗体1ug/ml
血清稀释度为1:25,1:50,1:100,1:150,1:200,1:250,1:300,空白为A,B,C,D,E,F,G,H
酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4
结果为：1234
A2.9930.6390.3380.236
B3.0210.7220.3070.191
C2.3360.4960.3080.176
D2.2560.4640.3040.176
E2.0310.4160.2470.139
F1.8300.3360.2310.153
G1.5980.3320.2270.132
空白H0.1580.0780.0720.074
这样的话应该是血清稀释度1:50最合适，酶标抗体稀释度1:1000最合适，但是这样的话OD值为3.021，是不是太大了？OD值是不是在1左右比较好呢？应该选择哪个浓度，哪个稀释度来做正式试验呢？
第一次：包被抗体浓度为：8ug/ml,4,2,1,0.5,0.25,0为A,B,C,D,E,F,G
血清稀释度为1:100
酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4
结果为：1234
A3.3440.7120.4900.238
B2.7570.5230.3450.176
C2.4280.4550.3100.172
D>4.51.7771.2150.439
E>4.51.3570.7890.424
F1.1090.2540.1720.110
G1.3660.3310.1970.069(空白)从结果可以判断包被抗体浓度1ug/ml最合适
第二次：包被抗体1ug/ml
血清稀释度为1:25,1:50,1:100,1:150,1:200,1:250,1:300,空白为A,B,C,D,E,F,G,H
酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4
结果为：1234
A2.9930.6390.3380.236
B3.0210.7220.3070.191
C2.3360.4960.3080.176
D2.2560.4640.3040.176
E2.0310.4160.2470.139
F1.8300.3360.2310.153
G1.5980.3320.2270.132
空白H0.1580.0780.0720.074
这样的话应该是血清稀释度1:50最合适，酶标抗体稀释度1:1000最合适，但是这样的话OD值为3.021，是不是太大了？OD值是不是在1左右比较好呢？应该选择哪个浓度，哪个稀释度来做正式试验呢？
ELISA 实验注意事项知多少(含ELISA实验知识大汇总) 生物科学...123
御妹′34462021-07-24
?优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点（珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，须严格遵照规程操作）。 标本的采取和保存 通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第一步，下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。 血清 血清是最常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。 用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。（最好将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃1000×g离心20min，仔细收集上清。建议将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。 采血过程中应避免溶血，因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色，而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染，因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。 血浆 用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，标本采集后30min内4℃1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。 常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等，检测时还应仔细阅读试剂盒说明书，检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。 细胞培养上清 取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。 细胞裂解液 1) 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。 2) 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。 3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。 4) 将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温解冻样品，反复冻融几次，使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎，以达到裂解的目的。 5) 4℃10000×g 离心10min，除去细胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。 组织匀浆液 1) 将组织样本用PBS (0.01M, PH 7.4) 冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。 2) 将组织块称重，记录后剪碎，碎块应尽量小，便于匀浆得更充分。 3) 将组织按一定的比例加入预冷的PBS（临用前加入蛋白酶抑制剂）匀浆，匀浆时置于冰上或冰浴中。（通常按组织重量：PBS体积=1:9的比例匀浆，例如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数）。 4) 吸取匀浆液到离心管，4℃5000×g 离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。 尿液、唾液等其他液体生物样本 1000×g离心20min，取上清即可检测。 总的来说，因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量，所以应保证所有样本均为澄清的液体，沉淀或悬浮物都应离心去除。 为了保证检测的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本最好在1~6个月内检测；4℃保存的样本应在1周内进行检测。 另外，还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会抑制HRP的活性，从而导致假阴性的结果。 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液、洗涤液应用pH计测量。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用，一般室温平衡不低于30min。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 加样 在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。 加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样（一般不建议使用）。有些指标检测（如间接法ELISA）需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1min。加酶结合物工作液和底物工作液时可用多道移液器，使加液过程在最短时间内完成。 保温 在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)，有人称之为孵育。 ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。 温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成最多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。 保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。为避免酶标板底部受水汽或磨损导致的读数误差，一般采用鼓风恒温箱保温，这个过程必须在酶标板上方贴封纸，以免蒸发。无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证时间精确，一个人一次不宜多于两块板同时操作、测定。 洗涤 洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中，洗涤是最主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。 洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下： （1）浸泡式：a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2min，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3-4次（按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。 微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。 （2）流水冲洗式：流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2min后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2min，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳（此方法试剂盒较少采用）。 显色和比色 显色 显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时间一般不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间，及时判断。 OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30min后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用硫酸终止后，显色由橙黄色转向棕黄色。 TMB受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后，约40min显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2小时后即可完全消退至无色。TMB的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。 比色 比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，但应尽量避免刮花表面，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。最好在加底物液显色前，先将软板边缘剪净，这样，此板就可完全平妥坐入座架中。 比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔（未经任何反应仅加底物液的孔）和空白孔（以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔），以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。 比色结果的表达以往通用光密度（oplical density，OD），现按规定用吸光度（absorbence，A），两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于A字母的右下角，如OPD的吸收波长为492nm，表示方法为"A492nm"或"OD492nm"。 酶标比色仪 酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.0 01，准确性为±1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的A值为1.083，则该孔相对于空气的真实A值应为1.083± 0.01(1.073~1.093），重复测定数次，其A值均应1.083±0.05（1.078~1.088）在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000~2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900，而其线性范围仅0.000~2.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。 酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15~30℃，使用前先预热仪器15-30min，测读结果更稳定（也有一些酶标仪说明书上明确标明不需要预热）。 测读A值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，第一次在最适波长（W1），第二次在不敏感波长（W2），两次测定间不移动ELISA板的位置。例如OPD用492nm为W1，630nm为W 2，最终测得的A值为两者之差（W1-W2）。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 各种酶标仪性能有所不同，使用中应详细新闻记者说明书。 结果判断 定性测定 定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答，分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的最高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。 在间接法和夹心法ELSIA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。两类反应的结果判断方法不同，分述于下。 （1）间接法和夹心法 这类反应的定性结果可以用肉眼判断。目视标本也无色或近于无色者判为阴性，显色清晰者为阳性。但在ELSIA中，正常人血清反应后常可出现呈色的本底，此本底的深浅因试剂的组成和实验的条件不同而异，因此实验中必须加测阴性对照。阴性对照的组成应为不含受检物的正常血清或类似物。在用肉眼判断结果时，更宜用显色深于阴性对照作为标本阳性的指标。 目视法简捷明了，但颇具主观性。在条件许可下，应该用比色计测定吸光值，这样可以得到客观的数据。先读出标本（sample，S）、阳性对照（P）、和阴性对照（N）的吸光值，然后进行计算。计算方法有多种，大致可分为阳性判定值法和标本与阴性对照比值法两类。 a．阳性判定值 阳性判定值（cut-off value）一般为阴性对照A值加上一个特定的常数，以此作为判断结果阳性或阴性的标准。 用此法判断结果要求实验条件十分恒定，试剂的制备必须标准化，阳性和阴性的对照品应符合一定的规格，须配用精密的仪器，并严格按规定操作。阳性判定值公式中的常数是在这特定的系统中通过对大量标本的实验检测而得到的。现举某种检测HBsAg的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照品为不含HBsAg的复钙人血浆，阳性对照品HBsAg的含量标明为P=9±2ng /ml。每次试验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后，先计算阴性对照A值的平均数（NC X ）和阳性对照A值的平均数（PCX），两个平均数的差（P-N）必须大于一个特定的数值（例0.400），试验才有效。3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而以另两个阴性对照重新计算NCX；如有两个阴性对照A值超出以上范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算： 阳性判定值=NCX+0.05 标本A值＞阳性判定值的为阳性，小于阳性判定值的为阴性。应注意的是，式中0.05为该试剂盒的常数，只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。 根据以上叙述可以看出，在这种方法中阴性对照和阳性对照也起到试验的质控作用，试剂变质和操作不当均会产生"试验无效"的后果。 b.标本/阴性对照比值 在实验条件（包括试剂）较难保证恒定的情况下，这种判断法较为合适。在得出标本（S）和阴性对照（N）的A值后，计算S/N值。也有写作P/N的，这里的P不代表阳性(positive)，而是病人（patient）的缩写，不应误解。为避免混淆，更宜用S/N表示。在早期的间接法ELISA中，有些作者定出S/N为阳性标准，现多为各种测定所沿用。实际上每一测定系统应该用实验求出各自的S/N的阈值。更应注意的是，N所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋白质或蛋白质含量较底的缓冲液，以致反应后产生的本底可能较正常人血清的本底低得多。因此，这类试剂盒规，如N<0.05<>（或其他数值），则按0.05计算，否则将出现假阳性结果。 （2）竞争法 在竞争法ELISA中，阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量，一般调节阴性对照的吸光度在1.0-1.5之间，此时反应最为敏感。 竞争法ELISA不易用自视判断结果，因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异，一般均用比色计测定，读出S、P和N的吸光值。计算方法主要也有两种，即阳性判定值法和抑制率法。 a. 阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同，但在计算公式中引入阳性对照A值，现举某种检测抗HBc的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗HBc的复钙人血浆，阳性对照中抗HBc含量为125±1 00u/ml。每次试验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后，先计算阴性对照A值的平均值（NC X ）和阳性对照A值的平均数（PCX），两个平均数的差（N-P）必须大于一个特定的数值（例如0.300）,试验才有效。3个阴性对照A值均应小于2.000，而且应≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而以另2个阴性对照重新计算×NCX；如有2个阴性对照A超出以上范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算： 阴性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX 标本A值≤阳性判定值的反应为阳性，A＞阳性判定值的反应为阴性。 b. 抑制率法 抑制率表示标本在竞争结合中标本对阴性反应显色的抑制程度，按下式计算： 抑制率（%）= （阴性对照A值-标本A值）×100%/阴性对照A值 一般规定抑制率≥50%为阳性，＜50%为阴性。 定量测定 ELSIA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线最高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数纸，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中间较呈直线的部分是最理想的检测区域。 测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。
由于胶体金的发展,elisa试剂盒会被淘汰吗_www问答网123
第534位访客2018-01-22
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文（2.2）已述，ELISA中有三个必要
的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物。
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：
（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；
（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；
（3）酶的底物；
（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定
中）；
（5）结合物及标本的稀释液；
（6）洗涤液；
（7）酶反应终止液。
的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物。
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：
（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；
（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；
（3）酶的底物；
（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定
中）；
（5）结合物及标本的稀释液；
（6）洗涤液；
（7）酶反应终止液。
乙肝表面抗原(ELISA法):.._有问必答_123
guoxux2021-08-15
国内外优质的Elisa试剂盒十大品牌 免疫学讨论版论坛123
随音而行2021-08-07
酶联免疫吸附（ELISA）实验是一种观察生物活性配体间反应活性的有效的观察手段，被广泛应用于疾病诊断和科学研究领域。Elisa试剂盒应用的范围很广，而且正在不断地扩大，原则上ELISA试剂盒可用于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。Elisa试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、稳定性等因素都会影响Elisa检测的结果，因此，在科学研究领域里，如何选择高质量的Elisa试剂盒产品成为了科研实验中的关键。
目前国内外Elisa试剂盒生产厂家很多，产品质量参差不齐。依据品牌网大数据平台数据支持，筛选出2016-2017年Elisa试剂盒十大品牌榜如下：
R&DSystems
R&DSystems经过近40年的发展，目前在英国、德国、法国和中国等地设有分公司。作为细胞因子、抗体和ELISA试剂盒等细胞生物学产品的顶尖供应商，R&DSystems在全球范围内为癌症、干细胞、免疫学、神经学和信号转导等领域的科研人员提供了品种齐全，质量可靠的科研产品，并因产品质量的可靠性和稳定性赢得了用户的广泛推崇和同行的赞誉是目前国内最受欢迎的Elisa进口试剂盒品牌。
Abcam
Abcam总公司位于英国剑桥，2014年1月成立艾博抗（上海）贸易有限公司负责中国区的销售。Abcam在中国设立的公司产品线包括一抗、二抗、免疫测定及细胞检测试剂盒、蛋白/多肽、激动剂/拮抗剂/活化剂/抑制剂及裂解物等。Abcam新推出的Elisa试剂盒使用重组单克隆抗体对，提供了其检测灵敏度。
BioVision公司是世界顶尖的细胞凋亡和信号传导产品生产商，产品包括Elisa试剂盒、荧光检测试剂盒、抗体及重组蛋白，几乎涵盖了细胞凋亡、细胞信号传导和细胞因子研究的各个方面。BioVision产品的价格虽然不菲，但其质量稳定可靠，在开发和研究细胞凋亡检测分析、代谢检测方面具有卓越的影响力，一直是研究人员在细胞检测领域的首选。
Raybiotech
Raybiotech公司主要涉及蛋白质芯片、抗体芯片、抗体、免疫试剂、Elisa试剂盒等近万种产品。RayBiotech生产超过2,600个经过ISO认证和严格测试的ELISA试剂盒，并得到了世界各国众多科学家的亲赖，许多客户对公司芯片技术和产品的质量都给予了肯定，客户发表的论文不乏Nature,NatureMedicine,Cell,PNAS，Lancet等世界顶级期刊物。
AssayPro
Assaypro是致力于为在学术界和制药/生物技术产业的研究人员提供高品质的免疫检测试剂盒。产品线包括AssayMaxELISA试剂盒，AssaySense活性测定试剂盒，抗体和其他相关试剂。AssayPro所有酶联免疫试剂盒和抗体产品都在美国密苏里州圣查尔斯ISO9001:2008和ISO13485:2003质量管理体系生产，凭借其在免疫科学领域独特的竞争优势，在国内有着比较广泛的市场群体。
PeproTechInc.创立于1988年，始终致力于为生命科学研究开发重组蛋白及相关产品，如今已成为能提供多种高质量细胞因子和重组蛋白，相应的单克隆、多克隆和生物素标记抗体，以及ELISA试剂盒的世界领导者。PeproTechInc.的产品涵盖免疫调节蛋白、白介素、集落刺激因子、生长因子、化学趋化因子、干扰素、脂联素、成纤维生长因子、转化生长因子、肿瘤坏死因子、神经营养素和防御素等诸多生命科学研究领域中重要的生物活性分子。
BioRike
BioRike博瑞克是目前国内非常优质的Elisa试剂盒厂家，近年来发展起来的名族品牌。BioRike产品线包含ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、抗体、快速基因克隆试剂等，其生产的Elisa试剂盒，灵敏度、精密度、准确度等综合性能指标处于行业领先水平，已广泛用于生命科学各领域科研机构，并获得广大科研人员好评，ELISA试剂盒自推出以来，已被大量权威杂志引用，在细胞因子、激素调控研究方面有着极强的竞争力。博瑞克试剂盒凭借其稳定的质量和亲民的价格成为国产明星品牌，在国内拥有一大批的忠实客户。
ExCellBio
依科赛生物目前主要有三大产品线：制药和生命科学研究用细胞培养系列产品、围绕基因检测的核酸产品线和免疫检测产品线。免疫检测产品线包括高品质的细胞因子ELISA检测试剂盒和抗体等，Elisa试剂盒在国内高校应用得比较广泛。
MultiSciences
联科生物与多家国际知名厂商达成了长期合作协议，包括Affymetrix（eBioscience）、Qiagen、Bio-Techne（RnD、Novus）、Roche等。在将国际上优质产品引入国内市场的同时，联科生物也在不断开发拥有自主知识产权的项目与产品，联科生物推出了两万多种抗体、辅助试剂以及成套Elisa试剂盒，这些产品主要应用于蛋白免疫印迹、流式细胞术等实验方法。联科生物的Elisa试剂盒自推出后，获得了市场的一致好评。
CUSABIO
华美生物主要经营抗体、蛋白、基因、科研试剂盒、诊断试剂原料产品。旗下的CUSABIO试剂盒，涵盖20个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。华美生物的Elisa试剂盒价格相对偏高，对于国内科研经费不是特别充足的研究人员来说不是首选。
以上品牌都有各自的核心Elisa试剂盒产品，科研工作者可根据自身的研究领域的需求选择高质量的试剂盒品牌，以提升检测效率及结果有效性。
购买ELISA试剂盒,能否推荐几家好的公司 生物科学 ...123
白白先生〃3152021-08-12
BIM试剂盒好。。。。。。。。
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