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采用抗-HBe抗体包被反应板,加入校准品及被测样本,同时加入定量HBeAg中和抗原,经过振荡孵育,洗板后再加入铕标记的抗-HBe,若标本中抗-HBe浓度高,HBeAg将被大量中和,使最后形成的抗-HBe-HBeAg-铕标记抗-HBe复合物减少。增强液(β-NTA)将标记在抗体上的Eu3+解离到溶液中,Eu3+和增强液中的有效成分形成高荧光强度的螯合物,荧光强度和样本中的抗-HBe浓度成反比。
2、规范包被操作,吸附是否均匀
3、重复性、可靠性
6、是否提供技术
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
8、可检测动物类型是否丰富
9、可检测指标是否齐全
如果用双抗体夹心法,第二个抗体可以用多抗,这样保证你的抗原会被结合,多抗可以直接带HRP标记或者可以用HRP标记二抗去和多抗结合。
1、直接竞争,标记抗原,与检测样品中的抗原竞争抗体。
2、间接竞争,标记抗体,固相抗原与液相抗原(样品)竞争标记抗体。
3、定义
间接竞争法的模型:包被抗原,用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab,固相吸附的HRP-Ab与样本中的Ag浓度成反比。
直接竞争法的模型:包被抗体,用HRP-抗原与样本一起加入。样本中的Ag与HRP-Ag竞争Solid-Ab,固相吸附的HRP-Ag与样本中的Ag浓度成反比。
4、竞争法的理论基础:是限量抗体。只有在限量抗体基础上,两种抗原才会形成竞争关系。
5、、间接竞争法具备较高灵敏度原因。
直接竞争法里,标记抗原与待测抗原均是液相,与抗体的结合机会是一样的,例如有1份标记抗原与1份待测抗原竞争1份抗体,那么有50%的标记抗原能与抗体结合,所以标记抗原的相对结合率为50%。间接法里,固相抗原与抗体的接触面积较小,固相抗原与待测抗原的结合抗体机会是不平等的,接近顺序饱和法,即只有与待测抗原结合剩余的抗体才会与固相抗原结合,同样有1份固相抗原与1份待测抗原竞争1份抗体时,基本上抗体会被待测抗原中和掉,与固相抗原结合的抗体非常少。固相抗原的相对结合率为0%。因此,间接法的抑制曲线斜率会大于竞争法。
因为抑制率越大则斜率越大,从而灵敏度越大。(假设零管变异5%,以两倍SD为灵敏度限,则为90%相对结合率,则间接法可以在较低的待测抗原浓度达到这一相对结合率,因此灵敏度要高。)
在进行系统放大时,间接法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位,所以存在放大效应,从而能提高间接法的灵敏度。直接法一般难以进行放大,常用的有生物 素化抗原与酶标亲和素,但模式上似乎不存在放大效应。
6、间接法的高灵敏度难以实现的原因:
双抗体 夹心的免放(IRMA)模式刚出现时,也被模型证明灵敏度优于竞争法的放免(RIA),原因也是较大的斜率,但是IRMA的高灵敏度一直到单抗发展后才得以实现。
首先要什么有什么的,你得好好考虑一下。
2、看生产地址
根本没有生产地址,我们知道做实验做产品需要很多的仪器、试剂、耗材,没有人相信一间简单的屋子可以生产各种样的试剂盒。
3、看产品包装
没有任何的生产地址、联系方式等信息,这种产品有问题了连个投诉的地方都没有。
4、看公司网站
有些打着国外原装旗号,整个公司网站为英文页面,实际注册IP地址在中国。如果写着国外的地址,让你国外的朋友实地去看一下!
5、做交叉验证
拿对方提供的几个种类的试剂盒,把里面的关键组份相互替换做做实验,如果交叉严重,只能说明是一种原料生产的试剂盒贴了不同的标签。
6、看价格
价格低得离谱,却打着进口大公司原料分装,核算成本,这种低得离谱的价格是连原料都买不起的。
1. 直接法测定抗原 2.间接法测定抗体 3.双抗体夹心法测定抗原4. 竞争法测定抗原 厚百生物专业提供各类生化实验试剂、仪器、耗材,提供技术服务,满足您的实验室常规采购需求。厚百,让您更省心!

