Storage: Store at 2-8°C under sterile conditions. Prepare working dilution on day of use. Expiration date: one year from date of receipt. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.
Preservative:None Images & ReferencesThis product is for in vitro research use only. It is not a medical device and it is not intended for diagnostic or therapeutic purposes.
Jackson总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。我们的目标是为世界各地的研究者能最大选择的提供最高质量的科学试剂以及最棒的技术支持和售后服务。蚂蚁淘向您提醒的是,Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国著名的各种二抗生产公司之一,Jackson在全世界各国设有几十家代理。由于其产品效价高、种类全、价格低廉,因而成为全球各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的首选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)、金标试剂等。
Jackson二抗产品选购简介
为便于客户选购Jackson公司的各种二抗,特将选购时的注意事项摘译如下:
JacksonImmunoResearch的抗体产品线完全,有全球最大的二抗产品库,能提供多种应用类型和需要的二抗产品,其二抗产品本身也具有极高的产品质量和稳定性。以上述产品为例,其HRP酶标山羊抗小鼠二抗,WB实验的应用稀释比率为1:10000-1:200000,也就是说,购买的2ml二抗,实际应用时相当于20L-400L的最终使用液。另外,一次购买大包装,避免了不同批次之前的差异,降低了实验条件本身的误差。作为多家著名品牌的代理商,蚂蚁淘根据国内科研的现实需求,为客户选择最具性价比的二抗及血清产品免疫学解决方案。如果您对Jackson的产品感兴趣,请致电027-84454412到蚂蚁淘科技有限公司问询您所感兴趣的产品类型。
JacksonImmunoResearchLaboratories,INC.专业致力于亲和纯化的二抗和免疫球蛋白的生产及偶联。产品主要销往世界各地的大学和科研院所。该公司位于宾夕法尼亚州费城以西约40英里,始建于1982年,经过40年左右的发展,Jackson的二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而受到更多科研学者和工业客户的青睐。
Jackson的产品主要有酶标二抗、荧光标记二抗、生物素标记二抗、胶体金标记二抗、封闭血清等等,其中JacksonHRP标记羊抗兔/羊抗鼠二抗,更是很多生产厂家的重要物料之一。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司作为Jackson在中国的代理商,备有大量二抗现货,并能提供专业的售前咨询和完善的售后服务。
JacksonImmunoResearchLaboratories,INC.专业致力于亲和纯化的二抗和免疫球蛋白的生产及偶联。产品主要销往世界各地的大学和科研院所。该公司位于宾夕法尼亚州费城以西约40英里,始建于1982年,经过40年左右的发展,Jackson二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛)、性价比高、供货迅捷而受到更多科研学者和工业客户的青睐。
Jackson的所有产品均具有极高的纯度和高超的品质,大部分二抗产品以冻干粉形式存在,易于保存和运输;作为二抗的实际生产商(非OEM商),产品的性价比也是非常高的,很多大厂家诸如T.F等也会从JacksonOEM产品。另外厂家完善的库存和供应体系以及高效稳定的纯化技术,保证了大部分二抗产品均能现货形式供应,不同批次的产品质量的稳定性也非常高。
Jackson的产品主要有酶标二抗、荧光标记二抗、生物素标记二抗、胶体金标记二抗、封闭血清等等,其中JacksonHRP标记羊抗兔/羊抗鼠二抗,更是很多生产厂家的重要物料之一。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司作为Jackson在中国代理商,备有大量二抗现货,并能提供专业的售前咨询和完善的售后服务。
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一抗和二抗的制备方法什么的,推荐阅读“抗体工程”相关的一些文章和书籍。
简单点的信息,可以看百度百科,查阅“一抗“、“二抗”、“抗体”…
1. 一抗选择
(1)确定抗体的名字,注意中英文名字、别名、亚型等信息。
(2)确定您的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,或者是FACS。biorbyt的每种抗体说明书都会列出抗体经验证过适用的实验类型,如果抗体说明书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证。
(3)确定实验样本的种属,Human,Mouse,Rat等。我们的抗体说明书都列出该抗体验证过的适用物种,可根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验需要的抗体。
(4)样本抗原蛋白的结构性质。了解样本抗原蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性,蛋白空间构象的改变,会影响抗体的免疫亲和反应。
(5)单多克隆抗体的选择。一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。
2. 二抗选择
(1)种属来源。主要根据一抗种属来源而决定二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。免疫组化,WB二抗主要选择HRP,Biotin标记的二抗,而免疫荧光染色可按实验需要选择不同荧光素标记的二抗,如FITC、Cy3、PE等。
详情可搜索博欧特生物
选择一抗就根据检测蛋白的状态来选,如果有蛋白带标签,就选针对标签的抗体。
如果没有标签,那么就要自己制备一抗。
二抗的选择则主要根据一抗的来源来选择,如果一抗是鼠源的,二抗一般就选用羊抗鼠的就可以了。
如果抗体使用次数太多会使背景变黑吗?
一抗就是你要检测的目的抗体。
GAPDH作为内参的话,也是要孵它的一抗
第一:tritonX-100破膜的原理到底是什么,我以前看过的资料是它是个脂溶性的东东,可以溶解细胞膜和核膜的脂质,从而形成孔洞,让抗体进入,所以有人说tritonx-100又叫打孔剂。一般用0.3%的浓度,PBS稀释。
但是总有人问我,如果是膜蛋白染色,破不破膜?
如果是膜蛋白,要看抗体和抗原的结合位点,如果是跨膜蛋白的话,其结合位点在胞内段的话肯定是需要破膜的。
根据上面的理解,破膜并不会对蛋白造成影响,只是溶解了脂质形成“孔”。
所以我觉得如果条件允许,常规每次都破一下,还是很好的选择。
你的理解是什么呢?
第二:二抗封闭原理的问题。
上一抗之前都要用二抗来源的血清封闭,那么封闭的原理到底是什么。
看资料说是封闭样品中能够与二抗发生非特异性结合位点,降低非特异性显色。用的封闭液是二抗来源的血清。
我的理解:二抗也是抗体,通常用的是说是和一抗的fc端特异性结合的IgG。
如果是减少非特异性结合的话,那么应该是二抗能够跟样品中的某些东西反应,而二抗来源的血清能先进行阻断。
我的问题是:样品中到底是什么物质,可以和二抗来源的血清中的什么物质,进行结合从而阻断。(即样品中,和二抗来源的血清中,分别是两种什么物质发挥作用);
但是一个新的问题产生了,大家一般多用的是BSA封闭,BSA叫做牛血清白蛋白,他是如何起到封闭作用的呢?
第三:最近做免疫荧光,一个不该在细胞核表达的抗体总是出现细胞核的非特异性染色。
本来我怀疑是抗原弥散了,但是细胞是固定过了的啊,而且同样的方法染色另外一个胞浆表达的抗体,就没有这个问题。
白死不得其解,快要愁死了。
谢谢,请大家指导!
@wh2008
@byd123
@skyskytotop
@甲醛
@多聚甲醛
1,5%脱脂奶。
2,3%BSA。
3,5%BSA。
以上都可用PBS配,也可用TBST配。个人经验为,抗体背景高时用脱脂奶好;抗体质量好背景低时用BSA配,效价高可节约抗体。
所以,用PBS稀释了没关系,再加入相应脱脂奶粉或BSA即可。
抗体溶液倒到膜上后,将容器放到一个水平摇床,或者是染色摇床上,缓慢的摇动。可以在4C过夜孵育,也可以在室温孵育1h即可。