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abfrontier/TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver.3.0/TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver.3.0, 200회/RR019A
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제품특징
□ 제품설명
AMV (Avian Myeloblastosis Virus) 유래의 역전사 효소 AMV RTase XL에 의한 RNA로부터 cDNA 합성, 그리고 TaKaRa Ex Taq HS에 의한 cDNA 합성을 한개의 튜브 내에서 실시할 수 있다. 본 제품은 RNA로부터의 cDNA 합성과 cDNA 증폭에 필요한 모든 시약으로 구성한 kit이다. AMV RTase XL는 반응 온도를 높게 설정할 수 있기 때문에 (42~ 60℃) 긴 strand의 cDNA 합성 뿐만아니라 복잡한 2차 구조를 가지기 쉬운 RNA의 역전사 반응에도 유효하다. PCR 증폭에 사용되는 TaKaRa Ex Taq HS는 Hot Start PCR용 효소이기 때문에 반응액 조제시의 misannealing이나 primer dimer에서 유래하는 비특이적 증폭을 막을 수 있어 특이성의 높은 PCR 증폭이 가능하다. Oligo dT-Adaptor Primer는 poly(A)＋RNA의 3＇말단부터 cDNA를 높은 효율로 합성할 수 있도록 설계되어 있어 3"-RACE법으로 미지의 3" 말단의 증폭을 효과적으로 실시할 수 있다.
□ Kit의 내용(100회분)*1
| AMV Reverse Transcriptase XL*2(5 U/ul) | 50 ul |
| RNase Inhibitor(40 U/ul) | 25 ul |
| Random 9 mers(50 pmol/ul) | 50 ul |
| Oligo dT-Adaptor Primer(2.5 pmol/ul) | 50 ul |
| RNase Free dH2O | 1 ml |
| TaKaRa Ex Taq HS(5 U/ul) | 25 ul |
| M13 Primer M4(20 uM) | 50 ul |
| 10 × RT Buffer*3 | 1 ml |
| 5 × PCR Buffer | 1 ml |
| dNTP Mixture (각 10 mM) | 150 ul |
| MgCl2(25 mM) | 1 ml |
| Control F-1 Primer(20 pmol/ul)*4 | 25 ul |
| Control R-1 Primer(20 pmol/ul)*5 | 25 ul |
| Positive Control RNA(2×105 copies/ul) | 25 ul |
*1 [10 ul 역전사반응 → 50 ul PCR 반응]의 100회분*2 Life Sciences사 제품입니다.*3 100 mM Tris-HCl(pH8.3), 500 mM KCl*4 Positive Control RNA용 upstream primer*5 Positive Control RNA 용 downstream primer*6 pSPTet3 Plasmid 전사 poly(A)+ RNA
□ 보존 -20℃
□ 특징
| RN Template | Full length |
| 증폭 사이즈 | 최소 5 kbp 정도 증폭가능 |
| 역전사효소 | AMV Reverse Transcriptase XL(42 ~ 60℃에서 역전사가능） |
| DNA Polymerase | TaKaRa Ex Taq HS |
| RNase Inhibitor | 필요(Kit내 포함) |
| 1st strand cDNA 합성 primer | Random 9 mers, Oligo dT-Adaptor Primer, 특이적 PCR primer 사용가능 |
| 3"-RACE법 | RT 반응때 Oligo dT-Adaptor Primer, PCR 반응시 M13 M4 Primer를 사용하여 3"-RACE법에 사용가능 |
| 조작 | 하나의 tube에서 반응가능. 열처리로 역전사 효소의 활성을 실활시킨 후 PCR 반응 |
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
蚂蚁淘承诺
正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
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轻松采购： 在线下单 简单省事
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售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2018-12-26
采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IgE单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IgE与单抗结合，加入酶标抗体，形成免疫复合物连接在板上，加入酶底物TMB，出现蓝色，加终止液硫酸，颜色变 查看更多
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2021-07-27
v:* {behavior:url(#default#VML);}o:* {behavior:url(#default#VML);}w:* {behavior:url(#default#VML);}.shape {behavior:url(#default#VML);}st1:*{behavior:url(#ieoo 查看更多
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2021-08-28
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠IL-21单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IL-21与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠IL-21，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠dsDNA单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的dsDNA与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠dsDNA，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多
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2018-12-26
st1:*{behavior:url(#ieooui) } /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable{mso-style-name:普通表格;mso-tstyle-rowband-size:0;mso-tstyle-colband-size:0;mso-style-no 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠HYP单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的HYP与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠HYP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多
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2021-07-28
v:* {behavior:url(#default#VML);}o:* {behavior:url(#default#VML);}w:* {behavior:url(#default#VML);}.shape {behavior:url(#default#VML);}st1:*{behavior:url(#ieoo 查看更多
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2021-09-01
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠IL-15单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IL-15与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠IL-15，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多
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2021-08-04
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠PRL单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的PRL与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠PRL，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多
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2021-08-16
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2018-12-26
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠HMGB-1单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的HMGB-1与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠HMGB-1，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多
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常见问题
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【求助】竞争法ELISA的灵敏度改良 免疫学讨论版论坛123
BLEED2021-07-22
Beckmann Kenko Gmbh | 获取完整的进口商历史记录 | 进口 ...123
txc6702009-04-01
直接竞争ELISA与间接竞争ELISA的原理区别 生物科学论坛...123
LJX372018-01-17
直接竞争ELISA和间接竞争ELISA区别
1、直接竞争，标记抗原，与检测样品中的抗原竞争抗体。
2、间接竞争，标记抗体，固相抗原与液相抗原（样品）竞争标记抗体。
3、定义
间接竞争法的模型：包被抗原，用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab，固相吸附的HRP-Ab与样本中的Ag浓度成反比。
直接竞争法的模型：包被抗体，用HRP-抗原与样本一起加入。样本中的Ag与HRP-Ag竞争Solid-Ab，固相吸附的HRP-Ag与样本中的Ag浓度成反比。
4、竞争法的理论基础：是限量抗体。只有在限量抗体基础上，两种抗原才会形成竞争关系。
5、、间接竞争法具备较高灵敏度原因。
直接竞争法里，标记抗原与待测抗原均是液相，与抗体的结合机会是一样的，例如有1份标记抗原与1份待测抗原竞争1份抗体，那么有50%的标记抗原能与抗体结合，所以标记抗原的相对结合率为50%。间接法里，固相抗原与抗体的接触面积较小，固相抗原与待测抗原的结合抗体机会是不平等的，接近顺序饱和法，即只有与待测抗原结合剩余的抗体才会与固相抗原结合，同样有1份固相抗原与1份待测抗原竞争1份抗体时，基本上抗体会被待测抗原中和掉，与固相抗原结合的抗体非常少。固相抗原的相对结合率为0%。因此，间接法的抑制曲线斜率会大于竞争法。
因为抑制率越大则斜率越大，从而灵敏度越大。（假设零管变异5%，以两倍SD为灵敏度限，则为90%相对结合率，则间接法可以在较低的待测抗原浓度达到这一相对结合率，因此灵敏度要高。）
在进行系统放大时，间接法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位，所以存在放大效应，从而能提高间接法的灵敏度。直接法一般难以进行放大，常用的有生物 素化抗原与酶标亲和素，但模式上似乎不存在放大效应。
6、间接法的高灵敏度难以实现的原因：
双抗体 夹心的免放（IRMA）模式刚出现时，也被模型证明灵敏度优于竞争法的放免（RIA），原因也是较大的斜率，但是IRMA的高灵敏度一直到单抗发展后才得以实现。
1、直接竞争，标记抗原，与检测样品中的抗原竞争抗体。
2、间接竞争，标记抗体，固相抗原与液相抗原（样品）竞争标记抗体。
3、定义
间接竞争法的模型：包被抗原，用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab，固相吸附的HRP-Ab与样本中的Ag浓度成反比。
直接竞争法的模型：包被抗体，用HRP-抗原与样本一起加入。样本中的Ag与HRP-Ag竞争Solid-Ab，固相吸附的HRP-Ag与样本中的Ag浓度成反比。
4、竞争法的理论基础：是限量抗体。只有在限量抗体基础上，两种抗原才会形成竞争关系。
5、、间接竞争法具备较高灵敏度原因。
直接竞争法里，标记抗原与待测抗原均是液相，与抗体的结合机会是一样的，例如有1份标记抗原与1份待测抗原竞争1份抗体，那么有50%的标记抗原能与抗体结合，所以标记抗原的相对结合率为50%。间接法里，固相抗原与抗体的接触面积较小，固相抗原与待测抗原的结合抗体机会是不平等的，接近顺序饱和法，即只有与待测抗原结合剩余的抗体才会与固相抗原结合，同样有1份固相抗原与1份待测抗原竞争1份抗体时，基本上抗体会被待测抗原中和掉，与固相抗原结合的抗体非常少。固相抗原的相对结合率为0%。因此，间接法的抑制曲线斜率会大于竞争法。
因为抑制率越大则斜率越大，从而灵敏度越大。（假设零管变异5%，以两倍SD为灵敏度限，则为90%相对结合率，则间接法可以在较低的待测抗原浓度达到这一相对结合率，因此灵敏度要高。）
在进行系统放大时，间接法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位，所以存在放大效应，从而能提高间接法的灵敏度。直接法一般难以进行放大，常用的有生物 素化抗原与酶标亲和素，但模式上似乎不存在放大效应。
6、间接法的高灵敏度难以实现的原因：
双抗体 夹心的免放（IRMA）模式刚出现时，也被模型证明灵敏度优于竞争法的放免（RIA），原因也是较大的斜率，但是IRMA的高灵敏度一直到单抗发展后才得以实现。
【求助】竞争法ELISA试验为何同一样品在不同时间测得的OD值...123
txc6702021-07-25
竞争抑制ELISA标准曲线的拟合方法_抗原123
上山石头2021-07-27
Elisa标准曲线绘制方法123
yuxh_19782021-07-23
ELISA实验结果常见问题及解决方案——标准曲线不佳123
vamtears2016-08-08
GM实验：试剂说明书上要求20分钟显色，10分钟的时候看一下，差不多就可以加终止液，但是我的标曲显色特别快，2分钟最低浓度蓝色就就深了，此时样本颜色还很浅很浅，我只能一块儿加终止液。所以，标曲显色过快，可能是什么原因？
（ps:第一列是标曲，后面是样本）
【求助】Elisa竞争法数据处理_问答详情_蚂蚁淘,【正品极速】生物...123
livia19842009-02-06
为什么HBeAb HBcAb的ELISA要用竞争法呢? 医疗器械讨论版...123
fengdaox2014-10-29
为什么HBeAbHBcAb的ELISA要用竞争法呢？加样快慢差异很大，不能用其他方法吗？谢谢
说明微生物糖发酵实验的原理及结果分析。_123
hyf013462018-01-17
针对于HBeAb的中和抑制法
采用抗-HBe抗体包被反应板，加入校准品及被测样本，同时加入定量HBeAg中和抗原，经过振荡孵育,洗板后再加入铕标记的抗-HBe，若标本中抗-HBe浓度高，HBeAg将被大量中和，使最后形成的抗-HBe-HBeAg-铕标记抗-HBe复合物减少。增强液（β－NTA）将标记在抗体上的Eu3+解离到溶液中，Eu3+和增强液中的有效成分形成高荧光强度的螯合物，荧光强度和样本中的抗-HBe浓度成反比。
采用抗-HBe抗体包被反应板，加入校准品及被测样本，同时加入定量HBeAg中和抗原，经过振荡孵育,洗板后再加入铕标记的抗-HBe，若标本中抗-HBe浓度高，HBeAg将被大量中和，使最后形成的抗-HBe-HBeAg-铕标记抗-HBe复合物减少。增强液（β－NTA）将标记在抗体上的Eu3+解离到溶液中，Eu3+和增强液中的有效成分形成高荧光强度的螯合物，荧光强度和样本中的抗-HBe浓度成反比。
【求助】竞争法ELISA的标准曲线 免疫学讨论版123
liuhua2018-01-17
大多数国产试剂盒生产厂家会提供对数坐标纸，可直接手工绘制曲线；如果酶标仪带有分析软件，可由软件直接拟合曲线，并自动计算出样本的浓度值；老式的酶标仪只能打印出OD值，需要实验员自己绘制曲线并计算，下面介绍2种绘制竞争法曲线的方法，希望对大家有帮助：一、在对数坐标纸上手工绘制曲线（Log-logit双对数标准曲线）1.实验做双孔，实验结果如下表所示。标准点浓度OD1OD2OD均结合率S002.2262.1922.209S10.11.7251.6791.70277.0%S20.41.3131.3381.325560.0%S31.60.9070.8340.870539.4%S46.40.5170.5170.51723.4%S525.60.2300.2440.23710.7%2）各标准点吸光值取均值。在表中OD均一列。3）将S1~S5的OD均值与S0的OD均相除，为标准点的百分结合率。4）在log-logit坐标纸上绘图。5）坐标纸上横轴从左至右第一个1-9表示为第一个10进位，第二个1-9表示为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。也就是说，如果第一个1代表1ng/ml，则第二个1代表10ng/ml，第三个1代表100ng/ml。因为本次实验标准曲线范围是从0.1ng/ml到25.6ng/ml，则可以用第一个1代表0.1ng/ml，第二个1代表1ng/ml，第三个1代表10ng/ml。6）坐标纸纵轴为百分比。即各标准吸光值的百分结合率。7）曲线第一个数值点是（0.1，77.0%）。则在横轴左起点的1处向上至70~80之间，由70向上7个小格处。8）曲线第二个数值点是（0.4，60.0%）。则在横轴左起第一个4，向上至60的位置。9）曲线第三个数值点是（1.6，39.4%）。则在横轴左起第二个1至2之间，由第二个1向右6个小格。再向上至30~40之间，由30向上9个半小格处。10）曲线第四个数值点是（6.4，23.4%）。则在横轴左起第二个6至7之间，这里6与7之间分为5小格，则每个小格是0.2。所以由第二个6向右2个小格。再向上至20~30之间，由20向上约3个半小格处。11）曲线第四个数值点是（25.6，10.7%）。则在横轴左起第三个2至3之间，这里2与3之间分为10小格，则每个小格是1。所以由第三个2向右5个半小格。再向上至10~20之间，由10向上约半小格处。12)画一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上，同时剩余的点均匀分布在直线的两边。13）样品也同样由吸光值计算百分结合率，再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点，此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度。无须换算。本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。
轻松三步ELISA标准曲线的制作与数据的计算ELISACALC软件 ...123
1782051672021-07-26
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