今天文章就简单整理了一下最近遇到的问题，有些问题对你来说可能很简单，但是还是会给一些科研菜鸟带去小麻烦，特整理了这么个专场来涨涨姿势。

这里就简单整理了5个问题，具体内容如下：

1、一个ELISA试剂盒检测几个样品？

小编自己在各大论坛看到最多的三个答案：

1）48T可做42个样本加6个标准曲线；96T可做90个样本加6个标准曲线

2）以96T试剂盒来算，定量的试剂盒一般可以做90个左右的样品，定性的试剂盒可以做94个左右的样品

3）96T的ELISA试剂盒，去除标准品复孔检测，最多还能检测80个标本；48T的最多30个样本。

2、elisa试剂盒96T的能做检测多少血清样品？板能重复利用吗？

96T，一般做复孔的话，做标准曲线需要16个孔，剩下80个孔就可以做40个样本。这个板不能重复利用。而且配套的试剂也只是够一块板子用的。

3、想请教一下，我想用elisa法测血清里的一种抗原，查了资料，发现没有现成的试剂盒用，现在就有2种备选方案，一种是买抗体对自己包被（查了R&D等大公司都没有可用于elisa的单抗）。哪种比较好呢？自己包被的会不会比国产的试剂盒可靠呢？

如果你觉得技术不错有队其他公司不放心，可以自己购买抗体对自己包被，这个就是麻烦点，自己包被用着放心，舒心；

另外国内还是有一些资质不错的公司，如北京达科为，上海巧伊，依科赛，深圳欣博盛等等

4、western和ELISA处理样本有何差别？

WesternBlot样品制备要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制剂），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm离心15min，取上清分装，即得到蛋白样品。建议直接电泳，多余的-80保存。建议分装的蛋白每支略多于一次上样量，一次性用完一支，避免反复冻融。

ELISA样品，直接脑组织冰上匀浆，收集于EP管，同上一样离心，大约220-250ul每支分装（因为ELISA上样量基本都是每孔100ul，做复孔，每个样品2孔，就需要200ul，为了避免不够2孔，分装时要大于200ul每支），直接实验。多余的-80保存，一样避免反复冻融。

不过ELISA最好少量样品进行预实验，或者查阅文献，看看大概组织里有多高浓度，选择合适的试剂盒，测量范围要与组织浓度相符。避免浓度过高测量不准，或者浓度过低，小于试剂盒最低可测浓度。

5、Elisa试剂盒该买哪家公司的呢？

提出这个问题的朋友其实该打，目前国际上各个品牌的试剂盒生厂商，都会有其偏重点，像R&D在细胞因子方面的试剂盒就非常牛逼，而其他牌子也一样的。

Bender：粘附分子方面的试剂盒；

Cayman：花生四烯酸类产品的试剂盒；

Merck(Linco)：内分泌研究方面的试剂盒；

Tips：

1、买Elisa试剂盒时，尽量先查文献，通过文献找品牌，再找供应商，找供应商就找正规代理商，千万不要去干“赔夫人又折兵”的蠢事。

2、ELISA中，复孔就是同一个样品加到至少两个孔中（一般3个或4个），最后取其平均值作为样品的读数，这样测得的结果才有说服力！

做复孔是为了较好的较少组内差异，如果血清不足不做复孔也可以。

酶联免疫吸附（ELISA）实验是一种观察生物活性配体间反应活性的有效的观察手段，被广泛应用于疾病诊断和科学研究领域。Elisa试剂盒应用的范围很广，而且正在不断地扩大，原则上ELISA试剂盒可用于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。Elisa试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、稳定性等因素都会影响Elisa检测的结果，因此，在科学研究领域里，如何选择高质量的Elisa试剂盒产品成为了科研实验中的关键。

目前国内外Elisa试剂盒生产厂家很多，产品质量参差不齐。依据品牌网大数据平台数据支持，筛选出2016-2017年Elisa试剂盒十大品牌榜如下：

R&DSystems

R&DSystems经过近40年的发展，目前在英国、德国、法国和中国等地设有分公司。作为细胞因子、抗体和ELISA试剂盒等细胞生物学产品的顶尖供应商，R&DSystems在全球范围内为癌症、干细胞、免疫学、神经学和信号转导等领域的科研人员提供了品种齐全，质量可靠的科研产品，并因产品质量的可靠性和稳定性赢得了用户的广泛推崇和同行的赞誉是目前国内最受欢迎的Elisa进口试剂盒品牌。

Abcam

Abcam总公司位于英国剑桥，2014年1月成立艾博抗（上海）贸易有限公司负责中国区的销售。Abcam在中国设立的公司产品线包括一抗、二抗、免疫测定及细胞检测试剂盒、蛋白/多肽、激动剂/拮抗剂/活化剂/抑制剂及裂解物等。Abcam新推出的Elisa试剂盒使用重组单克隆抗体对，提供了其检测灵敏度。

BioVision

BioVision公司是世界顶尖的细胞凋亡和信号传导产品生产商，产品包括Elisa试剂盒、荧光检测试剂盒、抗体及重组蛋白，几乎涵盖了细胞凋亡、细胞信号传导和细胞因子研究的各个方面。BioVision产品的价格虽然不菲，但其质量稳定可靠，在开发和研究细胞凋亡检测分析、代谢检测方面具有卓越的影响力，一直是研究人员在细胞检测领域的首选。

Raybiotech

Raybiotech公司主要涉及蛋白质芯片、抗体芯片、抗体、免疫试剂、Elisa试剂盒等近万种产品。RayBiotech生产超过2,600个经过ISO认证和严格测试的ELISA试剂盒，并得到了世界各国众多科学家的亲赖，许多客户对公司芯片技术和产品的质量都给予了肯定，客户发表的论文不乏Nature,NatureMedicine,Cell,PNAS，Lancet等世界顶级期刊物。

AssayPro

Assaypro是致力于为在学术界和制药/生物技术产业的研究人员提供高品质的免疫检测试剂盒。产品线包括AssayMaxELISA试剂盒，AssaySense活性测定试剂盒，抗体和其他相关试剂。AssayPro所有酶联免疫试剂盒和抗体产品都在美国密苏里州圣查尔斯ISO9001:2008和ISO13485:2003质量管理体系生产，凭借其在免疫科学领域独特的竞争优势，在国内有着比较广泛的市场群体。

PeproTech

PeproTechInc.创立于1988年，始终致力于为生命科学研究开发重组蛋白及相关产品，如今已成为能提供多种高质量细胞因子和重组蛋白，相应的单克隆、多克隆和生物素标记抗体，以及ELISA试剂盒的世界领导者。PeproTechInc.的产品涵盖免疫调节蛋白、白介素、集落刺激因子、生长因子、化学趋化因子、干扰素、脂联素、成纤维生长因子、转化生长因子、肿瘤坏死因子、神经营养素和防御素等诸多生命科学研究领域中重要的生物活性分子。

BioRike

BioRike博瑞克是目前国内非常优质的Elisa试剂盒厂家，近年来发展起来的名族品牌。BioRike产品线包含ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、抗体、快速基因克隆试剂等，其生产的Elisa试剂盒，灵敏度、精密度、准确度等综合性能指标处于行业领先水平，已广泛用于生命科学各领域科研机构，并获得广大科研人员好评，ELISA试剂盒自推出以来，已被大量权威杂志引用，在细胞因子、激素调控研究方面有着极强的竞争力。博瑞克试剂盒凭借其稳定的质量和亲民的价格成为国产明星品牌，在国内拥有一大批的忠实客户。

ExCellBio

依科赛生物目前主要有三大产品线：制药和生命科学研究用细胞培养系列产品、围绕基因检测的核酸产品线和免疫检测产品线。免疫检测产品线包括高品质的细胞因子ELISA检测试剂盒和抗体等，Elisa试剂盒在国内高校应用得比较广泛。

MultiSciences

联科生物与多家国际知名厂商达成了长期合作协议，包括Affymetrix（eBioscience）、Qiagen、Bio-Techne（RnD、Novus）、Roche等。在将国际上优质产品引入国内市场的同时，联科生物也在不断开发拥有自主知识产权的项目与产品，联科生物推出了两万多种抗体、辅助试剂以及成套Elisa试剂盒，这些产品主要应用于蛋白免疫印迹、流式细胞术等实验方法。联科生物的Elisa试剂盒自推出后，获得了市场的一致好评。

CUSABIO

华美生物主要经营抗体、蛋白、基因、科研试剂盒、诊断试剂原料产品。旗下的CUSABIO试剂盒，涵盖20个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。华美生物的Elisa试剂盒价格相对偏高，对于国内科研经费不是特别充足的研究人员来说不是首选。

以上品牌都有各自的核心Elisa试剂盒产品，科研工作者可根据自身的研究领域的需求选择高质量的试剂盒品牌，以提升检测效率及结果有效性。