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Oxford Genetics/pSF-CMV-COOH-EKT-V5-3 (OG62) C-Terminal V5 Tag Plasmid/OG62/1 Ea

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Oxford Genetics/pSF-CMV-COOH-EKT-V5-3 (OG62) C-Terminal V5 Tag Plasmid/OG62/1 Ea

品牌 /

oxgene

货号 /

OG62

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PlasmidInformation

ProductName:pSF-CMV-COOH-EKT-V5-3

ProductCode:OG62

Size(bp):4285bp

BacterialAntibioticSelection:KanR

OriginandCompatibility:pUChighcopyderivedfrompBR322

BacterialCopyNumber:500-700percell

Promoter:Cytomegalovirus(CMV)immediateearlypromoter

PlasmidPurpose:

ThisvectoraddsaV5tagthatallowsproteindetectionorpurificationusingantibodiesagainsttheV5peptide.TheV5tagwillbepositionedatthe3primeend(Cterminus)ofagene(expressedprotein)thatiswithintheprimaryMCS(NotItoXbaI).TheV5tagcodingsequenceisGKPIPNPLLGLDST.Thereisanenterokinasecleavagesiteimmediatelyupstreamofthistag(DDDDK)thatcanbeusedtoremovethetagfromapurifiedproteinifrequired.Itcleavesafterthelysineresidue.

PromoterExpressionLevel:

ThisplasmidcontainsthemammalianCMVpromotertodrivegeneexpression.WehavetestedallofourmammalianpromotersinarangeofcelltypesandCMVisconsistentlythestrongestinthosewehavestudied.HowevertherearemanyreportsoftheCMVpromoterdemonstratingsilencingbymethylationinlong-termculture.ForthisreasonwestockarangeofotherpromotersthatarecompatIBLewiththisplasmidandareavailableonrequest.

SequenceandMap:

OtherInfo:

TranscriptionTermination:

Thisplasmidcontainsthreealternativetranscriptionterminatorsformammalianbacterialandbacteriophage(T7)expression.Thismeansthatonlythepromoterneedstobechangedtoaltertheexpressionsystemyouareusing.Wesellmultiplepromotersthatcanbeusedineachofthesesystems.Thepresenceofeachterminatordoesnotreduceexpressioninthealternativesystems.

Cloning:

CloninginaGene:

ThereisastartcodonintheNcoIsitecanberemovedbydigestionwithKpnIifrequired.TheMCSforgeneinsertionsextendsfromNotItoXbaI.TherearebuiltinShine-DalgarnoandKOZAKsequencesalignedwiththestartcodonwithintheNcoIrestrictionsite.Iftheseareremovedyouwillneedtoaddaribosomalentrysitetothe5primeendofyourgeneforoptimalexpression.

IPStatus:

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