
PartNumber: D04-E010-05-N
MWCO | MembraneChemistry | FiberID(mm) | Inlet/Retentate | Permeate | Condition | TotalLength(cm) | EffectiveLength(cm) | FiberCount | SA(cm2) |
10kD | mPES | 0.50 | FLL | FLL | Dry | 45 | 41.5 | 36 | 235 |
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的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定
中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液。
今天文章就简单整理了一下最近遇到的问题,有些问题对你来说可能很简单,但是还是会给一些科研菜鸟带去小麻烦,特整理了这么个专场来涨涨姿势。
这里就简单整理了5个问题,具体内容如下:
小编自己在各大论坛看到最多的三个答案:
1)48T可做42个样本加6个标准曲线;96T可做90个样本加6个标准曲线
2)以96T试剂盒来算,定量的试剂盒一般可以做90个左右的样品,定性的试剂盒可以做94个左右的样品
3)96T的ELISA试剂盒,去除标准品复孔检测,最多还能检测80个标本;48T的最多30个样本。
2、elisa试剂盒96T的能做检测多少血清样品?板能重复利用吗?
96T,一般做复孔的话,做标准曲线需要16个孔,剩下80个孔就可以做40个样本。这个板不能重复利用。而且配套的试剂也只是够一块板子用的。
3、想请教一下,我想用elisa法测血清里的一种抗原,查了资料,发现没有现成的试剂盒用,现在就有2种备选方案,一种是买抗体对自己包被(查了R&D等大公司都没有可用于elisa的单抗)。哪种比较好呢?自己包被的会不会比国产的试剂盒可靠呢?
如果你觉得技术不错有队其他公司不放心,可以自己购买抗体对自己包被,这个就是麻烦点,自己包被用着放心,舒心;
另外国内还是有一些资质不错的公司,如北京达科为,上海巧伊,依科赛,深圳欣博盛等等
4、western和ELISA处理样本有何差别?
WesternBlot样品制备要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制剂),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm离心15min,取上清分装,即得到蛋白样品。建议直接电泳,多余的-80保存。建议分装的蛋白每支略多于一次上样量,一次性用完一支,避免反复冻融。
ELISA样品,直接脑组织冰上匀浆,收集于EP管,同上一样离心,大约220-250ul每支分装(因为ELISA上样量基本都是每孔100ul,做复孔,每个样品2孔,就需要200ul,为了避免不够2孔,分装时要大于200ul每支),直接实验。多余的-80保存,一样避免反复冻融。
不过ELISA最好少量样品进行预实验,或者查阅文献,看看大概组织里有多高浓度,选择合适的试剂盒,测量范围要与组织浓度相符。避免浓度过高测量不准,或者浓度过低,小于试剂盒最低可测浓度。
5、Elisa试剂盒该买哪家公司的呢?
提出这个问题的朋友其实该打,目前国际上各个品牌的试剂盒生厂商,都会有其偏重点,像R&D在细胞因子方面的试剂盒就非常牛逼,而其他牌子也一样的。
Bender:粘附分子方面的试剂盒;
Cayman:花生四烯酸类产品的试剂盒;
Merck(Linco):内分泌研究方面的试剂盒;
Tips:
1、买Elisa试剂盒时,尽量先查文献,通过文献找品牌,再找供应商,找供应商就找正规代理商,千万不要去干“赔夫人又折兵”的蠢事。
2、ELISA中,复孔就是同一个样品加到至少两个孔中(一般3个或4个),最后取其平均值作为样品的读数,这样测得的结果才有说服力!
做复孔是为了较好的较少组内差异,如果血清不足不做复孔也可以。