
Abcore是一家生物技术公司,在全球范围内提供定制的多克隆抗体服务,并代表北美的欧洲小型生物技术公司。抗体服务在南加州的美国农业部许可的设施进行。Abcore公司总部设在加利福尼亚州圣迭戈,是生命科学发现和创新的中心。Abcoreisabiotechcompanythatprovidescustompolyclonalantibodyservicesworldwide;andrepresentssmallEuropeanbiotechcompaniesinNorthAmerica.AntibodyservicesareperformedinSouthernCaliforniaatUSDAlicensedfacilities.HeadquarteredinSanDiego,CA,Abcoreisatthecenteroflifesciencediscoveryandinnovation.
多克隆抗体定制服务|实验技术服务——pCzn1质粒+ArcticExpress宿主菌低温表达体系。我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。产品品牌: Abcore测序实验流程:A:(Cat.No.LA001)多肽→多克隆抗体多肽合成:纯度>75%,10mg,长度>15个氨基酸多肽与KLH偶联(2-3mg)抗体生产周期为12-15周,包括2只兔子,4次免疫亲和层析纯化抗血清终产品:2-3mg多肽;1-2ml免疫前血清;2-5mg纯化后的抗体;ELISA检测结果(>1:32,000)B:(Cat.No.LA002)基因→多克隆抗体基因扩增、载体构建、大肠杆菌系统蛋白表达免疫,亲和层析纯化抗血清抗体生产周期为14-17周终产品:质粒(带有目的基因);1mg蛋白;1-2ml免疫前血清;2-5mg纯化后的抗体;ELISA检测结果(>1:32,000)C:(Cat.No.LA003)酸化多肽→多克隆抗体多肽合成酸化多肽:纯度>95%,10mg,长度>15个氨基酸非酸化多肽:纯度>75%,10mg,长度>15个氨基酸酸化多肽与KLH或BSA偶联(2-3mg)非酸化多肽与BSA偶联抗体制备周期13-16周,包括2只兔子,4次免疫亲和层析纯化抗血清,去除非酸化抗体、纯化酸化特异性抗体终产品:免疫前血清收集;2-3mg多肽(未修饰肽和酸化修饰多肽);2-5mg***酸化特异性抗体;ELISA检测结果(效价>1:32,000)D:(Cat.No.LA004)Western检测保证多克隆抗体制备终产品:2-3mg多肽;1-2ml免疫前血清;2-5mg纯化后的抗体;ELISA检测结果>1:32,000;Western检测(1:200)以保证抗体来自其中一条多肽.目录号 价格/元 不同的路线 免疫前IP001 4500 客户提供抗原 1周IP002 5000 客户提供E.coli高表达质粒1-高表达蛋白位于包涵体。 2周IP003 5000 客户提供E.coli高表达质粒2-带有His-tag高表达蛋白位于上清。 2周IP004 6000 客户提供表达克隆模扳:例如全长基因克隆,CDNA或者genomicDNA。 3周IP005 6000 全合成219bp表达序列,引进E.coli优化表达公式,专门针对不易获得高表达的蛋白。 3周IP006 7000 多肽设计,合成,交联到载体蛋白作为抗原
当机体受到抗原刺激后,可产生抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物。一分子蛋白质激素的表面存在多个不同的抗原决定簇,可同B淋巴细胞表面的相应受体结合。一个B淋巴细胞表面只能和一个抗原决定簇结合。一个静止的B细胞与抗原决定簇结合后即被活化并增殖和分化为一群合成和分泌抗相应抗原决定簇抗体的浆细胞,这一群细胞称为一个克隆。用经典动物免疫法得到的抗血清中含有多种由不同克隆产生的、抗不同抗原决定簇的抗体,称为PCAb。自身免疫性内分泌疾病患者血清中存在的抗某一自身抗原例如甲状腺过氧化物酶等的抗体,也可具有多克隆性质,也可称为多克隆抗体。UMO1(UBL1;MIM601912)是一种类似于泛素的蛋白质,可以与其他蛋白质共价结合。SENP2是一组酶,它将新合成的SUMO1加工成可结合的形式,并催化对含苏素的物种的分解。SENP6是SUMO/sentrin特异性蛋白酶,其功能是从缀合蛋白中去除SUMO。SENP6已经被证明是去SUMO化配体激活的转录因子成员,称为类视黄醇X受体a。RXRa的转录活性受SUMO化的调节。研究人员已经证明SENP6优于SUMO2/3缀合物而不是SUMO1缀合物。Senp6core多克隆抗体(SUMO1sentrin特异性蛋白酶6)浓度为1mg/ml,缓冲=0.01MTBS(pH7.4),1%的BSA,0.03%的丙二醇和50%的甘油。Senp6core多克隆抗体(SUMO1sentrin特异性蛋白酶6)免疫原为KLH共轭合成肽,由人类的SENP2衍生而来。预测的分子量68kDa。短期储存在4℃,长期储存在-20℃(避免重复冷冻/解冻循环)。Senp6core多克隆抗体(SUMO1sentrin特异性蛋白酶6)用于WB时稀释浓度为1:500-2000=1:500-1000,免疫组化实验时稀释浓度为1:100-500。
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yyj5028
生物素和亲和素的结合部位是咪唑酮环
已修改~
下面开始更新2016的
细胞培养瓶(板)生长面积容量与细胞数(大约)
96孔板 4~5X10 4 35mm培养皿 1X10 6
48 孔板 1.3X10 5 60mm培养皿 2.6X10 6
24孔板 2.5X10 5 100mm培养皿 7X10 6
12孔板 5X10 5 150mm培养皿 1.8X10 7
6孔板 1.2X10 6
细胞瓶面积 容量 工作体积 细胞数目
612.5cm2 25ml 2ml 5X10 5
25cm2 50ml 5ml 1X10 68
35cm2 75ml 10ml 2X10 6
75 cm2 250ml 15ml X10 6
150cm2 700ml 40ml 1.1X10 7
补充:不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量(参考下表)。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。
抽血检测,一般用三代酶联合免疫法 酶联免疫法,简称ELISA。 它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。 步骤:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送确认实验室确认。有的医院很不负责,将初筛阳性的报告发出后就不管了,这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。祝大家。PS,第一次检测为阳性的话,一定要去确认实验室再做一次,勇敢的去面对,也许结果就不一样了。 基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
BAS用于检测的基本方法可分为三大类。
第一类是标记亲和素连接生物化大分子反应体系,称BA法,或标记亲和素生物素法(LAB)。
第二类以亲和素两端分别连接生物素化大分子反应体系和标记生物素,称为桥联亲和素-生物素法(BRAB)。
第三类是将亲和素与酶标生物素共温形成亲和素-生物素-过氧化物酶复合物,再与生物素化的抗抗体接触时,将抗原-抗体反应体系与ABC标记体系连成一体,称为ABC法。这一方法可以将微量抗原的信号放大成千上万倍,以便于检测。 亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。
生物素-亲和素系统可以与亲和层析的方法结合,大大提高纯化蛋白质的纯度,或者为已知配体寻找受体。步骤是首先将生物素共价结合到配体蛋白上,再将生物素化后的配体蛋白加入含有受体蛋白的混合物,然后将此混合物通过预先固定了亲和素的层析柱,这时配体受体复合物就通过生物素-亲和素系统停留在层析柱上,最后通过选择性洗脱获得此受体配体蛋白复合物或者仅有受体。这一方法被广泛运用于药物研发行业,当人们发现某种药物分子具有疗效但是又不清楚它具体作用于哪种蛋白质时,可以将其生物素化然后把靶蛋白从成千上万种蛋白质中“抓”出来。
生物素-亲和素系统还可以用相似的方法分离DNA.方法是在DNA探针的一端挂上生物素,然后用其获得目的DNA片段,再利用固定化的亲和素回收这些DNA。
传统的基因探针是由带放射性的磷酸碱基合成的,我们可以用被生物素标记的磷酸碱基合成基因探针,避免了实验过程中放射性物质可能造成的伤害。
生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。
特异性
亲和素与生物素间的结合具有极高的亲和力,其反应呈高度专一性。因此,BAS的多层次放大作用在提高灵敏度的同时,并不增加非特异性干扰。而且,BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响,使其在实际应用中可最大限度地降低反应试剂的非特异作用。
稳定性
亲和素结合生物素的亲和常数可为抗原-抗体反应的百万倍,二者结合形成复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性;而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。因此,BAS在实际应用中,产物的稳定性高,从而可降低操作误差,提高测定的精确度。
普适性
生物素-结合素系统的多功能性还能提供一套统一的研究方法。例如对于某待测分子,已经得到了对于该分子的生物素标记抗原,那么配合结合亲和素的胶体金可以在电镜下观测,配合结合荧光标记的亲和素可以使用流式细胞仪筛选,配合连接到酶的亲和素可以进行ELISA等免疫组化实验。