Brilliant Blue Gused for protein staining in SDS-PAGE, Blue Native PAGE, and the Bradford Method; selective inhibitor of the P2X purinoceptor channel P2X7 |
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Chemical structure
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Cas No. | 6104-58-1 | SDF | Download SDF |
Synonyms | Acid Blue 90,CBBG,Coomassie Brilliant Blue G-250,NSC 328382 | ||
Chemical Name | N-[4-[[4-[(4-ethoxyphenyl)amino]phenyl][4-[ethyl[(3-sulfophenyl)methyl]amino]-2-methylphenyl]methylene]-3-methyl-2,5-cyclohexadien-1-ylidene]-N-ethyl-3-sulfo-benzenemethanaminium, sodium salt | ||
Canonical SMILES | CC1=CC(N(CC)CC2=CC=CC(S(=O)([O-])=O)=C2)=CC=C1/C(C3=CC=C(NC4=CC=C(OCC)C=C4)C=C3)=C5C=C/C(C=C5C)=[N+](CC6=CC=CC(S(=O)([O-])=O)=C6)/CC.[Na+] | ||
Formula | C47H48N3O7S2 • Na | M.Wt | 854 |
Solubility | ≥21.35mg/mL in DMSO | Storage | Store at RT |
Shipping Condition | Evaluation sample solution : ship with blue ice.All other available size:ship with RT , or blue ice upon request | ||
General tips | For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be stored below -20℃ for several months. |
Brilliant Blue G is also a selective inhibitor of the P2X purinoceptor channel P2X7 [1].
P2X receptors are membrane ion channels activated in response to the binding of extracellular ATP. Seven P2X subtypes have been identified. P2X receptors have been involved in in diverse patho- and physiological processes, such as the autonomic nervous system, afferent signalling, chronic pain, and in autocrine loops of endothelial and epithelial cells. The P2X7 receptor plays a prominent role in certain neurologic disorders, such as ischemia-reperfusion injury, Alzheimer"s disease, spinal cord injury and sensory neuropathies [2].
In HEK293 cells heterologously expressing human P2X7 receptors, Brilliant Blue G noncompetitively inhibited rat and human P2X7 receptors with IC50 values of 10 and 200 nM, respectively. The IC50 values for inhibition of the other P2X receptors ranged from 2 to >30 μM; Brilliant Blue G inhibited the rat and human P2X4 receptors with the IC50 values of >10 and 3.2 μM [1]. Subretinal injection of BBG caused retinal cell degeneration at lower concentrations. Subretinal injection of BBG (0.25 mg/mL) provided satisfactory biocompatibility [3].
References:[1] Jiang L H, Mackenzie A B, North R A, et al. Brilliant blue G selectively blocks ATP-gated rat P2X7 receptors[J]. Molecular pharmacology, 2000, 58(1): 82-88.[2] Sperlágh B, Vizi E S, Wirkner K, et al. P2X 7 receptors in the nervous system[J]. Progress in neurobiology, 2006, 78(6): 327-346.[3] Ueno A, Hisatomi T, Enaida H, et al. Biocompatibility of brilliant blue G in a rat model of subretinal injection[J]. Retina, 2007, 27(4): 499-504.
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链霉亲和素是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质,是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。
BAS用于检测的基本方法可分为三大类。
第一类是标记亲和素连接生物化大分子反应体系,称BA法,或标记亲和素生物素法(LAB)。
第二类以亲和素两端分别连接生物素化大分子反应体系和标记生物素,称为桥联亲和素-生物素法(BRAB)。
第三类是将亲和素与酶标生物素共温形成亲和素-生物素-过氧化物酶复合物,再与生物素化的抗抗体接触时,将抗原-抗体反应体系与ABC标记体系连成一体,称为ABC法。这一方法可以将微量抗原的信号放大成千上万倍,以便于检测。 亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。
生物素-亲和素系统可以与亲和层析的方法结合,大大提高纯化蛋白质的纯度,或者为已知配体寻找受体。步骤是首先将生物素共价结合到配体蛋白上,再将生物素化后的配体蛋白加入含有受体蛋白的混合物,然后将此混合物通过预先固定了亲和素的层析柱,这时配体受体复合物就通过生物素-亲和素系统停留在层析柱上,最后通过选择性洗脱获得此受体配体蛋白复合物或者仅有受体。这一方法被广泛运用于药物研发行业,当人们发现某种药物分子具有疗效但是又不清楚它具体作用于哪种蛋白质时,可以将其生物素化然后把靶蛋白从成千上万种蛋白质中“抓”出来。
生物素-亲和素系统还可以用相似的方法分离DNA.方法是在DNA探针的一端挂上生物素,然后用其获得目的DNA片段,再利用固定化的亲和素回收这些DNA。
传统的基因探针是由带放射性的磷酸碱基合成的,我们可以用被生物素标记的磷酸碱基合成基因探针,避免了实验过程中放射性物质可能造成的伤害。
亲和素(avidin,AV)亦称抗生物素蛋白、卵白素,是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白,分子量为68kD,等电点pI=10.5;耐热并耐受多种蛋白水解酶的作用.尤其是与生物素结合后,稳定性更好。生物素与亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用,亲和常数(K)为1015mol/L,比抗原与抗体间的亲和力(K=10.5~11L/mol)至少高1万倍。并且,二者的结合稳定性好专一性强,不受试剂浓度,PH环境,抑或蛋白变性剂等有机溶剂影响。由于每个亲和素能结合4个分子的生物素,这一特点可以用于构建一个多层次信号放大系统。因此,BAS即可用于微量抗原、抗体及受体的定量、定性检测及定位观察研究,亦可制成亲和介质用于上述各类反应体系中反应物的分离、纯化。
亲和素由于带有一个糖链侧链,导致容易和细胞表面的多糖发生非特异性亲和。因此,链霉亲和素被开发出来。
链霉亲和素(streptavidin,SA)是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质,分子量为65kD。链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其中每条肽链都能结合一个生物素,并且不带任何糖基,因此与亲和素一样,一个链霉亲和素分子也能结合4个生物素分子,二者亲和常数(K)亦为1015mol/L。链霉亲和素的适用范围比亲和素更为广泛。向左转|向右转