小鼠抗牛血清白蛋白(BSA)单抗
| 货号： | Ms1030-01 |
| 应用范围： | , |
| 适应物种： | , |
| 供应商： | 佰泰科 |
| 是否单克隆： | 否 |
| 抗体英文名： | Mouseanti-BSA |
| 宿主： | mouse |
| 保存条件： | -20 |
| 数量： | 大量 |
| 级别： | 亲和纯 |
| 保质期： | 3年 |
| 抗原来源： | mouse |
| 规格： | 1mg/ml |
提纯实验
1．材料
单克隆抗体制备流程(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
20mMol/LNaCl
(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
40mMol/LNaCl
(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
80mMol/LNaCl
(4)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
(5)饱和硫酸铵液
(6)DEAE—纤维素柱
2．操作方法
（1）小鼠腹水用冷PBS液稀释4倍后，于1.00×105转离心30min，去沉淀。
（2）在4℃于上清中缓缓滴加饱和硫酸铵液，边加边搅拌，使溶液最终为50%硫酸铵浓度。
（3）此溶液置冰中30min~60min，然后5000r/min离心10min，去上清。
（4）将沉淀溶于Tris－HCl缓冲液（40mMol/LNaCl）中（溶液可能混浊）。
（5）装入透析袋于Tris－HCl缓冲液（20mMol/LNaCl）中透析除盐。
（6）离心去沉淀。
单克隆抗体制备流程（7）溶液稀释（1:100或更高倍稀释）后，于280nm测蛋白含量，估计蛋白质含量1A280unit=0.8mg蛋白质一般每ml腹水中，含有总蛋白约25mg~36mg。
（8）过DEAE—纤维素柱：纤维素柱高40cm，以20mMol/LNaClTris缓冲液平衡。透析样品以Tris缓冲液等量稀释。
样品进入柱床速度为1ml~2ml/min，以NaCl线形梯度洗脱。大部分单克隆IgG于40mMol/L和80mMol/LNaCl洗脱，也有极少例外的单克隆抗体于120mMol/L~150mMol/LNaCl洗脱。测OD280nm收集蛋白峰，单克隆IgG保存备用。
杂交瘤产生各种免疫球蛋白，但主要是IgG和IgM，究竟是哪种为主，则决定于抗原的免疫程序。免疫一次，且3天后就取脾，多为产生IgM的B淋巴细胞。免疫多次的多为IgG。
温馨提示：不可用于临床治疗。
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发布于 ： 2019-08-06
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