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Cell Technology/NOS/0.125mg/NOS200
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Key Benefits
- Cell permeable.
- No wash homogenous assay.
- Adaptable to High throughput assay platforms .
- Real time detection of NO activity.
- Applications – Flow Cytometry, Fluorescence Plate Reader, Fluorescence Microscopy
Additional information
| Kit Size | 0.125mg, 0.25mg |
|---|
Diaminofluorescein –2 Diacetate (DAF-2DA) is a non-fluorescent cell permeable reagent that can measure free Nitric Oxide (NO) and nitric oxide synthase (NOS) activity in living cells under physiological conditions. Once inside the cell the diacetate groups on the DFA-2DA reagent arehydrolyzed by cytosolic esterases thus releasing FAD-2 and sequestering the reagent inside the cell. Production of nitric oxide converts the non-fluorescent dye, DAF-2, to its fluorescent triaole derivative, DAF-2T.
DAF-2T can be observed by: excitation 488nm and measuring emission at 515nm.
Fig. 1. DAF-2DA, the non-fluorescent probe, enters the cells where cytosolic esterases hydrolysis the diacetate groups, releasing the non-fluorescent DAF-2 dye. DAF-2 then reacts with NO and O2 to produce DAF-2T, its triazole fluorescent derivative.
Fig. 2. Phase Contrast and fluorescent microscopic images of rat aorta-derived vascular smooth muscular cells loaded with DAF-2DA.
| Document Title |
| NOSProtocol |
| NOS Datasheet |
| msds.NOS |
| Title | File | Link | Author(s) | Journal | Year; Edition:Pages |
| Red wine consumption improves in vitro migration of endothelial progenitor cells in young, healthy individuals | Am J Clin Nutr 2010 92: 1 | July 2010; 161-169 |
| Reference |
| Direct evidence of NO production in rat hippocampus and cortex using a new fluorescent indicator: DAF-2 DA: H. Kojima, et al.; Neuroreport 9, 3345 (1998) Abstract |
| Direct evidence of nitric oxide production from bovine aortic endothelial cells using new fluorescence indicators: diaminofluoresceins: N. Nakatsubo, etal.; FEBS Lett. 427, 263 (1998) Abstract |
| Nitric Oxide Ameliorates Hydrophobic Bile Acid-induced Apoptosis in Isolated Rat Hepatocytes by Non-mitochondrial Pathways: E. Gumpricht, et al.; J. Biol.Chem. 277, 25823 (2002) Full Text; http://www.jbc.org/cgi/content/full/277/28/25823#SEC1 |
| Development of a fluorescent indicator for nitric oxide based on the fluoroscein chromophore: H. Kojima, et al.; Chem. Pharm. Bull. 46, 373 (1998)Abstract |
| Detection and imaging of nitric oxide with novel fluorescent indicators: diaminofluoresceins: H. Kojima, et al.; Anal. Chem. 70, 2446 (1998) Abstract |
| Part# | Reagent | Temperature |
| Part# 4006 | DAF-2DA, 1 Vial (NOS200-1) | 2-8C |
| Part# 4006 | DAF-2DA, 2 Vials (NOS200-2) | 2-8C |
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2021-08-31
普洛麦格（北京）生物技术有限公司在发布的AMV 逆转录酶供应信息，浏览与AMV 逆转录酶相关的产品或在搜索更多与AMV 逆转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-08-17
美国GeneCopoeia在发布的miRNA 逆转录试剂盒供应信息，浏览与miRNA 逆转录试剂盒相关的产品或在搜索更多与miRNA 逆转录试剂盒相关的内容。 查看更多
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2020-04-27
【正品直销，售后保障】（性能优化的逆转录酶）HiScript Reverse Transcriptase是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂，产品来源于江苏南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销，售后保障】（性能优化的逆转录酶）HiScript Reverse Transcriptase试剂销售服务商之一，在南京等地方销售【正品直销，售后保障】（性能优化的逆转录酶）HiScript Reverse Transcriptase试剂已经多年。生物在线为您提供众多企 查看更多
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2021-09-15
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的Rilpivirine (利匹韦林; R278474, TMC 278) 是HIV的非核苷逆转录酶抑制剂。供应信息，浏览与Rilpivirine (利匹韦林; R278474, TMC 278) 是HIV的非核苷逆转录酶抑制剂。相关的产品或在搜索更多与Rilpivirine (利匹韦林; R278474, TMC 278) 是HIV的非核苷逆转录酶抑制剂。相关的内容。 查看更多
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2021-07-14
技术文章AMV和M-MuLV在应用上的区别更多逆转录酶文章请点击：http://www.e1617.com/nizhuanlumei-2191/... 查看更多
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2021-08-29
这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-09-18
货号：A0010GQ 查看更多
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2021-06-03
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2021-07-27
现在市场上销售的AMV逆转录酶有国产和进口两种，规格主要有200u、300u、1000u三种，产地和规格不同伴随的价格也不同!200u规格的AMV逆转录酶国产的基本在250元-300元，进口的最便宜的是在美国BiPec公司，400元/200u；300u规格的AMV逆转录酶没有国产的，进口性价比最高的应该数美国Promega，市场价基本在600元-700元之间，大量批发的话可以打折；1000u规格的AMV逆转录酶国产价格在800元-900... 查看更多
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2020-01-11
TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit Applied Biosystems™ Applied Biosystems® TaqMan® MicroRNA反转录试剂盒提供最佳性能的基于TaqMan® MicroRNAAs... 查看更多
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2021-08-09
河南佰柯生物科技有限公司在发布的HyperScript™ Reverse Transcriptase（HyperScript™逆转录酶）供应信息，浏览与HyperScript™ Reverse Transcriptase（HyperScript™逆转录酶）相关的产品或在搜索更多与HyperScript™ Reverse Transcriptase（HyperScript™逆转录酶）相关的内容。 查看更多
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2021-08-23
反转录PCR（Reverse Transcription，RT-PCR）又称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。... 查看更多
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逆转录试剂盒逆转录出来的cDNA是单链还是双链 核酸基因技术...123
列刖2017-10-06
氯仿/，混匀,常温下13000g离心5分钟，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀. 第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/. 吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1：一链，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替，同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6．将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存。 8．加入30ul buffer EB;异戊醇： 1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇. 在第二链反应体系中. 反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5，再离心1min是单链cDNA。 3．加入spin column中.2)和2，混匀，加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB. 第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒操作流程; 5．取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟：第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成. 加入等体积酚/。二，想合成双链cDNA需要另外操作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿. 离心后。 9．13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟. 混匀后，待电泳检测，混匀,顺序加入下列试剂(promega)，且二链稍比一链大一些. 稍微离心混匀反应物，13000rpm离心1min，确定双链的大小范围：一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时，静置10min，－20℃沉淀过夜: 1;ul) 总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀，静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/. 注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10．加入1/。 4．加入0，2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5．13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7．13000rpm离心2min，二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6，13000rpm离心1min
Fermentas (MBI)反转录试剂盒K1622说明书123
wings_0082021-07-21
有一款RevertAid™FirstStrandCDNASynthesisKit
和RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit，FirstStrandcDNASynthesisKit
大家又没有用过，这个公司的酶据说很好啊。
和RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit，FirstStrandcDNASynthesisKit
大家又没有用过，这个公司的酶据说很好啊。
invitrog逆转录试剂盒说明书 123
你欠我钱喲硜U2021-07-20
是单链cDNA，想合成双链cDNA需要另外操作：
一、cDNA第二链的合成:
1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):
20ul 10×DNA Polymerase I buffer
6ul10mM dNTP(自己配制)
xuldd H2O
1ulRNase H(2U/ul)
10ul DNA Polymerase I(10U/ul)
总体系为200ul;
2. 混匀后,16℃反应2.5小时;
3. 70℃灭活10分钟;
4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;
5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。
注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。
二、双链cDNA末端补平:
1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):
6ul 10mM dNTP
2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul)
2ul BSA(10mg/ml)
2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;
3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;
4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;
5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;
6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;
7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;
8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.
注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。
PCR纯化试剂盒操作流程：
1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。
2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。
3．加入spin column中，13000rpm离心1min。
4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。
5．13000rpm，再离心1min。
6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。
7．13000rpm离心2min。
8．加入30ul buffer EB，静置10min。
9．13000rpm离心2min。
10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
一、cDNA第二链的合成:
1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):
20ul 10×DNA Polymerase I buffer
6ul10mM dNTP(自己配制)
xuldd H2O
1ulRNase H(2U/ul)
10ul DNA Polymerase I(10U/ul)
总体系为200ul;
2. 混匀后,16℃反应2.5小时;
3. 70℃灭活10分钟;
4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;
5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。
注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。
二、双链cDNA末端补平:
1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):
6ul 10mM dNTP
2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul)
2ul BSA(10mg/ml)
2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;
3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;
4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;
5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;
6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;
7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;
8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.
注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。
PCR纯化试剂盒操作流程：
1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。
2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。
3．加入spin column中，13000rpm离心1min。
4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。
5．13000rpm，再离心1min。
6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。
7．13000rpm离心2min。
8．加入30ul buffer EB，静置10min。
9．13000rpm离心2min。
10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
逆转录和反转录有什么区别?123
悠然の翼2017-10-02
听老师说这两个不一样
【求助】miRNA逆转录试剂盒 核酸基因技术论坛123
我爱res2021-08-10
【求助】逆转录试剂盒中设定反转录反应程序中的反转录长度怎么...123
heiheidoudou2021-08-05
逆转录试剂盒中设定反转录反应程序中的反转录长度怎么确定？反转录长度指的是什么
有人用过Thermo逆转录试剂盒么? PCR技术讨论版论坛123
ent0202021-08-06
罗氏逆转录试剂盒_罗氏逆转录试剂盒【价格,厂家,图片,批发,采购】123
boundary1202021-07-26
你说的这三类都是非编码RNA，不编码蛋白质。
...】请问各位站友,我的逆转录试剂盒室温下放了6个小时还能用吗? ...123
曳綳蚶2021-08-15
trizol法提取大小RNA，trizol买invitrogen公司的。逆转录用promega公司的M-MLV
TAKARA RR047A 逆转录试剂盒 20 μl反应 × 100 次 _TAKARA123
tracy22021-08-08
TAKARA的RR047A逆转录试剂盒，做逆转录程序设置错误本来应该37℃15min85℃5s，变成37℃15s，85℃
5s，请问再重新设置程序可以吗，85℃酶会全部失活吗？
逆转录,荧光定量试剂盒,里面的试剂应该怎么123
touxing103962017-10-02
逆转录要-20°保存，荧光定量有的可以4°保存就可以不分装，如果要-20°保存的话就最好分装了，说明书上都写着呢，好好看看说明书！
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