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【正品直销,售后保障】(性能优化的逆转录酶)HiScript Reverse Transcriptase是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂,产品来源于江苏南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销,售后保障】(性能优化的逆转录酶)HiScript Reverse Transcriptase试剂销售服务商之一,在南京等地方销售【正品直销,售后保障】(性能优化的逆转录酶)HiScript Reverse Transcriptase试剂已经多年。生物在线为您提供众多企 查看更多>
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的Rilpivirine (利匹韦林; R278474, TMC 278) 是HIV的非核苷逆转录酶抑制剂。供应信息,浏览与Rilpivirine (利匹韦林; R278474, TMC 278) 是HIV的非核苷逆转录酶抑制剂。相关的产品或在搜索更多与Rilpivirine (利匹韦林; R278474, TMC 278) 是HIV的非核苷逆转录酶抑制剂。相关的内容。 查看更多>
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这一部分介绍了一种原位 PCR,特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 查看更多>
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现在市场上销售的AMV逆转录酶有国产和进口两种,规格主要有200u、300u、1000u三种,产地和规格不同伴随的价格也不同!200u规格的AMV逆转录酶国产的基本在250元-300元,进口的最便宜的是在美国BiPec公司,400元/200u;300u规格的AMV逆转录酶没有国产的,进口性价比最高的应该数美国Promega,市场价基本在600元-700元之间,大量批发的话可以打折;1000u规格的AMV逆转录酶国产价格在800元-900... 查看更多>
TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit Applied Biosystems™ Applied Biosystems® TaqMan® MicroRNA反转录试剂盒提供最佳性能的基于TaqMan® MicroRNAAs... 查看更多>
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反转录PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)又称为逆转录PCR。其原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。... 查看更多>
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氯仿/,混匀,常温下13000g离心5分钟,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀. 第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/. 吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1:一链,第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替,同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6.将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存。 8.加入30ul buffer EB;异戊醇: 1.溶液PE使用前应加入适量体积95%-100%的乙醇. 在第二链反应体系中. 反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5,再离心1min是单链cDNA。 3.加入spin column中.2)和2,混匀,加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2.向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB. 第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒操作流程; 5.取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟:第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成. 加入等体积酚/。二,想合成双链cDNA需要另外操作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿. 离心后。 9.13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟. 混匀后,待电泳检测,混匀,顺序加入下列试剂(promega),且二链稍比一链大一些. 稍微离心混匀反应物,13000rpm离心1min,确定双链的大小范围:一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时,静置10min,-20℃沉淀过夜: 1;ul) 总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀,静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/. 注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10.加入1/。 4.加入0,2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5.13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7.13000rpm离心2min,二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6,13000rpm离心1min
有一款RevertAid™FirstStrandCDNASynthesisKit
和RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit,FirstStrandcDNASynthesisKit
大家又没有用过,这个公司的酶据说很好啊。
invitrog逆转录试剂盒说明书 123
你欠我钱喲硜U2021-07-20
是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作:
一、cDNA第二链的合成:
1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):
20ul 10×DNA Polymerase I buffer
6ul10mM dNTP(自己配制)
xuldd H2O
1ulRNase H(2U/ul)
10ul DNA Polymerase I(10U/ul)
总体系为200ul;
2. 混匀后,16℃反应2.5小时;
3. 70℃灭活10分钟;
4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;
5.取2ul二链产物,同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder,确定双链的大小范围。
注:一链,二链的电泳图是smear,且二链稍比一链大一些。
二、双链cDNA末端补平:
1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):
6ul 10mM dNTP
2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul)
2ul BSA(10mg/ml)
2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;
3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;
4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;
5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;
6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;
7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;
8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.
注:第3,第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。
PCR纯化试剂盒操作流程:
1.溶液PE使用前应加入适量体积95%-100%的乙醇,混匀。
2.向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB,混匀。
3.加入spin column中,13000rpm离心1min。
4.加入0.75ml buffer PE,13000rpm离心1min。
5.13000rpm,再离心1min。
6.将spin column放入一新的离心管中,加入50ul buffer EB,静置10min。
7.13000rpm离心2min。
8.加入30ul buffer EB,静置10min。
9.13000rpm离心2min。
10.加入1/10体积3M的NaAc,2.5倍体积无水乙醇,混匀,-20℃沉淀过夜。
听老师说这两个不一样
各位大侠好:本人刚刚开始做pcr,购买了罗氏的逆转录试剂盒,试剂商说是做定量PCR用的但是我又想做普通的逆转录PCR(RT-PCR).因此我买的这个试剂盒可以同时做定量PCR和RT-PCR吗?谢谢大家了。。。
逆转录试剂盒中设定反转录反应程序中的反转录长度怎么确定?反转录长度指的是什么
我最近要MirRNArealtimePCR不知道选择哪个公司的试剂盒好。
还有Invitrogen和Stratagene牌子的怎么样?不过前者比较贵。麻烦大家给我一些建议。谢谢
本人正在做提取RNA的实验,订购了罗氏的逆转录试剂盒,但是在官网没有搜到实验步骤,不知道是不是自己没有搜索正确。请问有实验大神,有知道罗氏逆转录试剂盒的实验步骤吗?感谢!
你说的这三类都是非编码RNA,不编码蛋白质。
trizol法提取大小RNA,trizol买invitrogen公司的。逆转录用promega公司的M-MLV

TAKARA的RR047A逆转录试剂盒,做逆转录程序设置错误本来应该37℃15min85℃5s,变成37℃15s,85℃
5s,请问再重新设置程序可以吗,85℃酶会全部失活吗?

逆转录要-20°保存,荧光定量有的可以4°保存就可以不分装,如果要-20°保存的话就最好分装了,说明书上都写着呢,好好看看说明书!
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