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Canvax™/HotBegan™ Hot Start Taq DNA Polymerase MasterMix/2 x 1.25 mL (250 rxn)/P0030
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你好,我用过的试剂盒里,TAKARA的效果比较好,而且不算贵。如果你有钱,就买罗氏的、或者ABI(life)的。谢谢。
各位大侠好:本人刚刚开始做pcr,购买了罗氏的逆转录试剂盒,试剂商说是做定量PCR用的但是我又想做普通的逆转录PCR(RT-PCR).因此我买的这个试剂盒可以同时做定量PCR和RT-PCR吗?谢谢大家了。。。
逆转录PCR的实验步骤3_丫丫123
夏兮颜01282017-10-06
一、实验器具与材料:1、移液器:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头:1ml、200μl、20μl3、匀浆管:5ml4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶:2个60ml的棕色试剂瓶(广口,带盖);1个125ml的白色试剂瓶(放无水乙醇)7、量筒:50ml、250ml、500ml8、容量瓶:250ml、500ml、1000ml9、试管架:5ml、1.5ml、20μl10、盐水瓶:250ml、500ml各2个备用,一个装无水乙醇,另一个装DEPC水11、铝制饭盒:4个12、塑料小饭盒:1个13、大瓷缸:2个14、锡泊纸:一卷15、卷纸:2卷16、三角烧瓶:带盖,稍大二、实验器具的处理与准备1、塑料制品:(包括枪头、EP管、匀浆管等)先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中,将塑料制品逐个浸泡其中,其中小枪头需要吸管打入DEPC水,过夜,然后高压,再烤干备用,实验前将枪头等放入吸头台,再高压一次(EP管)2、玻璃制品:泡酸过夜,冲洗干净,蒙锡纸烤干备用(DEPC水泡)(洗净后先泡1‰DEPC过夜,再烤干)3、匀浆器:(包括剪刀、镊子)先洗净后,再高压(不需要泡DEPC)三、试剂配制:1、DEPC水:吸出1ml放在1000ml双蒸水中配成1‰DEPC水,放在1000ml容量瓶中静置4小时备用。2、75%乙醇:用无水乙醇DEPC水配,然后放-20℃保存(其中DEPC水需先高压)3、异丙醇:放入棕色瓶中4、氯仿:放入棕色瓶中5、琼脂糖仅供参考
逆转录试剂盒123
苗苗8862021-07-22
我是RT-PCR新手,请问逆转录试剂盒里面有什么试剂组成的?在逆转录过程中要注意什么事项?谢谢!
一般都是用针对miRNA的试剂盒,普通的逆转录方法我这里也做过,但是结果不是很稳定,你懂得!
反转录试剂盒选择 分子生物 123
沫汐控の迖2021-08-18
vazyme的反转录试剂盒好用些哈。
逆转录试剂盒中设定反转录反应程序中的反转录长度怎么确定?反转录长度指的是什么
你可以看看OneShine的,感觉也是很好的
13楼
加尾法是采用加A酶先对mirna进行加尾,然后再用带oligodt的引物反转录,他的反转录引物是通用的,一次反转录可以获得所有miRNA的cdna,效率高。茎环法是采用特异性反转录引物序列+颈环结构作为反转录引物进行反转录的,一次反转录只能获得一种mirna的cdna,可能有几种一起反转录的,这个我不太清楚一起反转录的效果。然后茎环法的经典即ABI的探针法定量试剂盒。我用过茎环法反转录+染料法定量的,下游引物为通用引物,结果不太好,就现在用的这家的他采用的是双向引物都是特异性的,效果还可以。不知道我说的清楚不,希望能对你有帮助。
有一款RevertAid™FirstStrandCDNASynthesisKit
和RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit,FirstStrandcDNASynthesisKit
大家又没有用过,这个公司的酶据说很好啊。

TAKARA的RR047A逆转录试剂盒,做逆转录程序设置错误本来应该37℃15min85℃5s,变成37℃15s,85℃
5s,请问再重新设置程序可以吗,85℃酶会全部失活吗?

我用的是Fermentas公司的RevertAid First strand cdna synthesis kit,效果很好,逆转录效率也比较一致。100次打折也就1000多