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Norgen Biotek /FFPE RNA Purification Kit (Cat. 25300)/50preps/25300
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- Extract total RNA (including microRNA) from FFPE samples
- No phenol extraction step
- Includes DNase for optional on-column DNA removal
- Isolated RNA is of the highest quality and integrity
- Isolate a diversity of RNA species
- Purified RNA is suitable for a variety of downstream applications, including Small RNA Sequencing. Find out more information on Norgen"s NGS services
- Buffer chemistry inactivates viruses including SARS-CoV-2 - Explore the Application Note
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RNA Isolation
Figure 1. High Quality and Yield of Total RNA. Norgen"s FFPE RNA Purification Kit isolates FFPE RNA that exceeds both yield and quality of competitors. Total RNA was isolated from one slice of hamster FFPE kidney section (20 micron thickness) using Norgen"s FFPE RNA Purification Kit and a leading competitors kit. One microliter of the 50 µL purified RNA was then resolved on an Agilent 2100 BioAnalzyer using an RNA Nano 6000 chip. As it can be seen, Norgen not only isolated higher yields of total RNA, but the RNA was also of a higher quality as evidenced by the higher RIN values obtained with Norgen"s RNA.]">
FFPE RNA Purification Kit Figure 1
Figure 2. Higher Yield of FFPE RNA Isolated by Norgen"s FFPE RNA Purification Kit. Norgen"s FFPE RNA Purification Kit isolates FFPE RNA that exceeds the yield of competitors. Total RNA was isolated from one slice of hamster FFPE kidney section (20 micron thickness) using Norgen"s FFPE RNA Purification Kit and two leading competitor"s kits. Eighteen isolations were performed for each product. The graph demonstrates the mean yield of RNA according to spectrophotometry for 18 sample replicates.Vertical bars represent the standard deviation. Norgen"s kit consistently purified total RNA with a higher yield than for those obtained using the market competitor"s kits.]">
FFPE RNA Purification Kit Figure 2
Figure 3. High Yield of a Diversity of RNA Species. Norgen"s FFPE RNA Purification Kit effectively recovers all sizes of RNA from large mRNA to small RNA including microRNAs. Total RNA was isolated from one slice of hamster FFPE kidney section (20 micron thickness) using Norgens FFPE RNA Purification Kit and a leading competitors kit. Five microliters of the 50 µL purified RNA was then used as the template in a 20 µL reverse transcription reaction with oligo dT primer or miR-21 stem-loop reverse primer. Two microliters of the RT reaction was then used in a 15 µL qPCR reaction for detecting the beta-actin gene (Panel A) and for detecting miR-21(Panel B), respectively. In both graphs the blue lines correspond to Norgen isolated-RNA and the green lines correspond to competitor-isolated RNA. As it can be seen, Norgen"s kit isolated higher yields of RNA in both cases, as indicated by the lower Ct values of the blue lines. Also, Norgen"s kit successfully isolated not only large RNA (Panel A) but also microRNA (Panel B), indicating the diversity of RNA species isolated.]">
FFPE RNA Purification Kit Figure 3
Figure 4. Excellent Performance in Downstream Application such as RT-qPCR. Norgen"s FFPE RNA Purification Kit effectively recovers all sizes of RNA, from large mRNA to small RNA including microRNA, that perform effectively in sensitive applications such as RT-qPCR. Total RNA was isolated from equal amounts of an FFPE tissue sample using Norgen"s FFPE RNA Purification Kit and two market competitors. The graph demonstrates the mean delta Ct value for 18 sample replicates. Vertical bars represent the standard deviation. Norgen"s kit consistently isolates RNA of a higher yield and quality than that obtained by the two leading market competitors as indicated by the larger delta Ct values. Not only were the large RNA species detected including rRNA and mRNA, but small RNA species (microRNA) were also detected from the sample, indicating the diversity of RNA species isolated.]">
FFPE RNA Purification Kit Figure 4
FFPE RNA Purification Kit
Norgen’s FFPE RNA Purification Kit provides a rapid method for the isolation and purification of total RNA (including microRNA) from formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue samples in as little as 1 hour. Using formalin to fix tissues leads to crosslinking of the RNA and proteins, and the process of embedding the tissue samples can also lead to fragmentation of the RNA over time. Norgen’s FFPE RNA Purification Kit provides conditions that allow for the partial reversing of the formalin modifications, resulting in a high quality and yield of RNA. The kit is able to purify all sizes of RNA, from large mRNA and ribosomal RNA down to microRNA (miRNA) and small interfering RNA (siRNA), depending on the age of the FFPE tissue as fragmentation of the RNA is known to occur over time.
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2021-09-22
DNA复制过程中能催化3’,5’一磷酸二酯键生成的酶有 A.解旋酶 B.RNA酶 C.DNA聚合酶 D.引物酶 E.拓扑异构酶 此题为多项选择题。请帮忙给出正确答案和分... 查看更多
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技术文章AMV和M-MuLV在应用上的区别更多逆转录酶文章请点击：http://www.e1617.com/nizhuanlumei-2191/... 查看更多
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2021-07-19
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2020-01-11
TaqMan™ MicroRNA Reverse Transcription Kit Applied Biosystems™ Applied Biosystems® TaqMan® MicroRNA反转录试剂盒提供最佳性能的基于TaqMan® MicroRNAAs... 查看更多
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2021-08-07
【正品直销，售后保障】（用于体外RNA合成T7逆转录试剂盒）T7 High Yield RNA Transcription Kit是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂，产品来源于南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销，售后保障】（用于体外RNA合成T7逆转录试剂盒）T7 High Yield RNA Transcription Kit试剂销售服务商之一，在南京等地方销售【正品直销，售后保障】（用于体外RNA合成T7逆转录试剂盒）T7 High Yield RN 查看更多
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2021-08-24
上海超研生物科技有限公司在发布的一步逆转录PCR试剂盒供应信息，浏览与一步逆转录PCR试剂盒相关的产品或在搜索更多与一步逆转录PCR试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-30
弘业新创抗体技术股份有限公司在发布的M-MuLV逆转录试剂盒供应信息，浏览与M-MuLV逆转录试剂盒相关的产品或在搜索更多与M-MuLV逆转录试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-05
南京诺唯赞生物科技有限公司在发布的【正品直销，售后保障】（T7RNAi逆转录试剂盒）T7 RNAi Transcription Kit供应信息，浏览与【正品直销，售后保障】（T7RNAi逆转录试剂盒）T7 RNAi Transcription Kit相关的产品或在搜索更多与【正品直销，售后保障】（T7RNAi逆转录试剂盒）T7 RNAi Transcription Kit相关的内容。 查看更多
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2020-01-18
北京华大蛋白质研发中心有限公司在发布的逆转录试剂盒供应信息，浏览与逆转录试剂盒相关的产品或在搜索更多与逆转录试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-28
PT67 逆转录酶病毒包装细胞细胞株 查看更多
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2021-08-29
这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-08-04
M-MLV逆转录酶是由北京鸿跃科技有限公司代理或销售的omega品牌的试剂，产品来源于美国。北京鸿跃科技有限公司是中国最权威的M-MLV逆转录酶试剂销售服务商之一，在北京等地方销售M-MLV逆转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业M-MLV逆转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的M-MLV逆转录酶产品 查看更多
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【求助】mRNA逆转录后得到的cDNA是单链还是双链 核酸基因技术...123
风吹的纱2017-10-06
是单链cDNA，想合成双链cDNA需要另外操作：一、cDNA第二链的合成:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer6ul 10mM dNTP(自己配制)xul dd H2O1ul RNase H(2U/ul)10ul DNA Polymerase I(10U/ul)总体系为200ul;2. 混匀后,16℃反应2.5小时;3. 70℃灭活10分钟;4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。二、双链cDNA末端补平:1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):6ul 10mM dNTP2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul) 2ul BSA(10mg/ml)2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。PCR纯化试剂盒操作流程：1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。3．加入spin column中，13000rpm离心1min。4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。5．13000rpm，再离心1min。6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。7．13000rpm离心2min。8．加入30ul buffer EB，静置10min。9．13000rpm离心2min。10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
逆转录和反转录有什么区别?123
2021-08-12
两者是同一生理过程的不同提法,没有本质的区别,都是遗传信息流动的方向是从RNA到DNA。
逆转录（reverse transcription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。此过程中，核酸合成与转录（DNA到RNA）过程与遗传信息的流动方向（RNA到DNA）相反，故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一，需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现，是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程，以样本中提取的mRNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成出互补的cDNA，构建cDNA文库，并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。
逆转录（reverse transcription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。此过程中，核酸合成与转录（DNA到RNA）过程与遗传信息的流动方向（RNA到DNA）相反，故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一，需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现，是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程，以样本中提取的mRNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成出互补的cDNA，构建cDNA文库，并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。
提取RNA,然后做逆转录需要什么试剂及试剂盒? 123
思念你IF542021-08-14
一个，运用反转录，以一条DNA单链为模板，以一个引物为转录的开始，通过DNA聚合酶进行链接(反转录的最终长度是不确定的，可能无限长)
Takara的逆转录试剂盒怎么样呢?和Toyobo的比起来呢? 分子生物 ...123
疯子mjLW82017-10-01
日本的。
首先，不否认它比大多数国产的试剂盒做得好，提取的纯度、方便度和量，都还很不错。
其次，它是日本的。so我觉得实验室用用天根的，就非常好了。拒绝日货，从实验室做起。
首先，不否认它比大多数国产的试剂盒做得好，提取的纯度、方便度和量，都还很不错。
其次，它是日本的。so我觉得实验室用用天根的，就非常好了。拒绝日货，从实验室做起。
第一链反转录试剂盒 一般大家都买哪家的啊?123
軟鲆覌2017-10-06
博凌科为的THERMOscript1stStrandcDNASynthesisKit（第一链耐热反转录试剂盒）反转录温度耐受性比较强，效果不错本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNaseH活性缺失的M-MuLV反转录酶THERMOscriptHˉRTase。
【求助】小鼠逆转录可以用Thermo 的试剂盒吗 核酸基因技术 丁香 ...123
xiayu7909212021-08-01
近期要做小鼠的RNA纯化、逆转录，临做了才想起来小鼠可以用我们常用的试剂盒吗，ThermoScientificRevertAidHMinusFirstStrandCDNASynthesisKit,试剂盒中的引物Oligo（dT)Primer可以用于小鼠吗？
有人用takara的消除gDNA的反转录试剂盒吗123
★啡咖★952017-10-06
对于新手来说购买反转录试剂盒是比较理想的，买一个kit看看说明书操作就可以了。推荐两款kit TAKARA和HaiGene，这两款试剂盒都能对RNA样品中的gDNA有效去除，因此对RNA质量的要求不高。TAKARA的RR047A操作方便，反转录温度为37℃，对于大多数试验来讲是满足要求的。HaiGene的D0401操作要多一个步骤，但其反转录温度是55℃（耐高温的反转录酶），提高了反转录温度使得高GC含量、复杂模板、长mRNA的模板都能有效反转录，因此其反转录效率更高，更能够获得样本中基因的真实表达量。如果后续试验是RealTime PCR、ORF克隆、高GC含量、或者你的待研究基因结构复杂程度未知，还是选用耐高温的反转录酶更理想。对于反转录高手来说，直接购买反转录酶、再购买Rnase Inhibitor自己配制反转录体系就可以了。对于样本量大的课题组来讲，相对还是比较经济的。选择反转录酶时仅需要考虑是否需要耐高温的酶，来克服目的基因的复杂结构就可以了。PROMEGA、TAKARA、HaiGene、 TRANSGEN等品牌的反转录酶性价比还都是不错的。Life、NEB的也不错，银子足的也可考虑，不一一解释了。
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反转录试剂盒选择 分子生物 123
沫汐控の迖2021-08-18
vazyme的反转录试剂盒好用些哈。
invitrog逆转录试剂盒说明书 123
你欠我钱喲硜U2021-07-20
是单链cDNA，想合成双链cDNA需要另外操作：
一、cDNA第二链的合成:
1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):
20ul 10×DNA Polymerase I buffer
6ul10mM dNTP(自己配制)
xuldd H2O
1ulRNase H(2U/ul)
10ul DNA Polymerase I(10U/ul)
总体系为200ul;
2. 混匀后,16℃反应2.5小时;
3. 70℃灭活10分钟;
4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;
5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。
注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。
二、双链cDNA末端补平:
1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):
6ul 10mM dNTP
2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul)
2ul BSA(10mg/ml)
2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;
3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;
4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;
5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;
6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;
7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;
8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.
注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。
PCR纯化试剂盒操作流程：
1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。
2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。
3．加入spin column中，13000rpm离心1min。
4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。
5．13000rpm，再离心1min。
6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。
7．13000rpm离心2min。
8．加入30ul buffer EB，静置10min。
9．13000rpm离心2min。
10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
一、cDNA第二链的合成:
1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):
20ul 10×DNA Polymerase I buffer
6ul10mM dNTP(自己配制)
xuldd H2O
1ulRNase H(2U/ul)
10ul DNA Polymerase I(10U/ul)
总体系为200ul;
2. 混匀后,16℃反应2.5小时;
3. 70℃灭活10分钟;
4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;
5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。
注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。
二、双链cDNA末端补平:
1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):
6ul 10mM dNTP
2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul)
2ul BSA(10mg/ml)
2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;
3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;
4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;
5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;
6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;
7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;
8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.
注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。
PCR纯化试剂盒操作流程：
1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。
2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。
3．加入spin column中，13000rpm离心1min。
4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。
5．13000rpm，再离心1min。
6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。
7．13000rpm离心2min。
8．加入30ul buffer EB，静置10min。
9．13000rpm离心2min。
10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
逆转录试剂盒(Qiagen 205111)_逆转录试剂盒_供应信息123
我已习惯2021-07-29
买了广州复能的Genecopoeia的PCR逆转绿试剂盒，50次包装的，几个试剂盒，每个试剂盒也就能做30-40次，最caodan的是居然里面有空管，反应了几次，一副牛逼拉轰的样子，因为国内就你广州复能一家Genecopoeia代理呢？订了几次你们的试剂盒，次次都这样，缺斤短两的。不知各位大侠有没有遇到这样的情况。千万别说你用之前没离心这么SB的理由，做实验这么久时间，基本的常识还是有的。
逆转录试剂盒逆转录出来的cDNA是单链还是双链 核酸基因技术...123
列刖2017-10-06
氯仿/，混匀,常温下13000g离心5分钟，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀. 第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/. 吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1：一链，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替，同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6．将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存。 8．加入30ul buffer EB;异戊醇： 1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇. 在第二链反应体系中. 反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5，再离心1min是单链cDNA。 3．加入spin column中.2)和2，混匀，加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB. 第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒操作流程; 5．取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟：第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成. 加入等体积酚/。二，想合成双链cDNA需要另外操作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿. 离心后。 9．13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟. 混匀后，待电泳检测，混匀,顺序加入下列试剂(promega)，且二链稍比一链大一些. 稍微离心混匀反应物，13000rpm离心1min，确定双链的大小范围：一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时，静置10min，－20℃沉淀过夜: 1;ul) 总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀，静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/. 注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10．加入1/。 4．加入0，2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5．13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7．13000rpm离心2min，二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6，13000rpm离心1min
...】请问各位站友,我的逆转录试剂盒室温下放了6个小时还能用吗? ...123
曳綳蚶2021-08-15
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