
T4DNALigaseisaligationenzymethatcanbeusedtojoinDNAfragmentsbycatalyzingtheformationofphosphodiesterbondsbetweenjuxtaposed5"phosphateand3"hydroxylterminiindouble-strandedDNAusingATPasacoenzyme.BothbluntandcohesiveendDNAligation,aswellassingle-strandednickrepairofDNA,RNAandDNA/RNA,arepossIBLeusingtheT4DNAligase.
美国AdvancedBioMatrix(简称ABM) www.advancedbiomatrix.comAdvancedBioMatrix(简称ABM)是美国一家著名的生物公司,获得了AllerganInc的授权(Allergan用25年时间不断完善胶原蛋白相关的产品的生产工艺),将Allergan的专业和技术用于蛋白生产与检测,致力于为组织工程、细胞分析及细胞增殖等研究领域提供优质稳定的产品。AdvancedBioMatrix不断丰富已有产品线,目前可为三维细胞培养提供各种胶原蛋白、纤连蛋白、玻连蛋白、水性凝胶、不同粘度与分子量的透明质酸以及低代成纤维细胞等。在美国全部产品授权Sigma销售。AdvancedBioMatrix是组织培养,细胞分析和细胞增殖三维(3D)应用的生命科学领域的领导者。我们的产品被公认为纯度,功能性和一致性的标准。我们在生产,分离,纯化,冷冻干燥,细胞培养和蛋白质测试,粘附肽,附着因子,底物刚性和其他3D矩阵产品方面拥有丰富的专业知识。我们的专业技术和知识正在被用来确保我们的产品质量最高,批次之间一致且易于为我们的研究客户使用。
美国AdvancedBioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者。AdvancedBioMatrix在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3Dmatrix 产品开发方面有着丰富的经验。AdvancedBioMatrix的研发经验和专业知识确保其产品可达到最佳质量,并保证产品之间一致性,方便研究客户使用。以下为AdvancedBioMatrix3DMatrices 产品竞争优势:1. 提供高纯度和成分确定的胞外基质;2. 超过1000余篇文献引用PureCol产品,品质非常均一;3. 在3D培养基领域可提供最全面的产品线;4. 唯一可提供特异性刚性有机硅基板的公司(CytoSoft);5. 唯一可提供可溶性丝纤蛋白的供应商(可运用于多种3D培养);6. 如果客户首次接触3D胶原凝胶,AdvancedBioMatrix还是唯一的预制胶原蛋白(PureColEZGel)供应商;
以下产品为AdvancedBioMatrix全球畅销品:1.PureCol 牛源I型胶原蛋白 3mg/ml#5005-100ML2.Nutragen牛源I型胶原蛋白 6mg/ml#5010-50ML3.FibriCol 牛源I型胶原蛋白 10mg/ml#5133-20ML4.VitroCol 人源I型胶原蛋白 #5007-20ML5. 弹性蛋白原 #5052-1MG6.ECMSelectArraykitUltra-36#5170-1EA7.CytoSoft(刚性可变的基底,AdvancedBioMatrix最新添加产品5190-7EA)8. 人III型胶原蛋白 #5021-10MG9. 人IV型胶原蛋白 #5022-5MG10.SilkFibroin溶液 #5154-20ML11.Fibronectin#5080-5MG12.Vitronectin#5051-0.1MG
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
向左转|向右转
如果是用转录出的cDNA做那跟平时就一样了。不需要特别的试剂盒、
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
和RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit,FirstStrandcDNASynthesisKit
大家又没有用过,这个公司的酶据说很好啊。
逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一,需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。
加尾法是采用加A酶先对mirna进行加尾,然后再用带oligodt的引物反转录,他的反转录引物是通用的,一次反转录可以获得所有miRNA的cdna,效率高。茎环法是采用特异性反转录引物序列+颈环结构作为反转录引物进行反转录的,一次反转录只能获得一种mirna的cdna,可能有几种一起反转录的,这个我不太清楚一起反转录的效果。然后茎环法的经典即ABI的探针法定量试剂盒。我用过茎环法反转录+染料法定量的,下游引物为通用引物,结果不太好,就现在用的这家的他采用的是双向引物都是特异性的,效果还可以。不知道我说的清楚不,希望能对你有帮助。

