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SMOBIO/[RP1100] ExcelRT™ 2X One-Step RT-PCR Kit, 50 RXN/50 RXN/RP1100
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SMOBIO/[RP1100] ExcelRT™ 2X One-Step RT-PCR Kit, 50 RXN/50 RXN/RP1100
品牌 / 
SMOBIO
货号 / 
RP1100
美元价:
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免费咨询热线
4000-520-616

 

Description 

The ExcelRT™ One-Step RT-PCR Kit is designed for the reverse transcription and PCR amplification of a specific target RNA from either total RNA or mRNA. The ExcelRT™ One-Step RT-PCR Kit provides the user an alternative to the lengthy two step processes (first strand generation and amplification) by using a single mixture, single tube, one step reaction. The ExcelRT™ One-Step RT-PCR Kit contains a 2X reaction premix consisting of an optimized buffer, dNTPs, Mg2+ and enzyme stabilizer, and a blend of recombinant reverse transcriptase and Taq DNA polymerase. The ExcelRT™ One-Step RT-PCR Kit allows the user to complete the RT-PCR process using a thermocycler in a single reaction setting. The ExcelRT™ One-Step RT-PCR Kit is capable of detecting even trace amounts of target RNA and ideal for target RNA amplification and analysis 

Features

  • Generates dsDNA directly from RNA samples 

  • High sensitivity and yields 

  • High reproducibility, reduced pipetting errors

  • High throughput 

  • Reduced RNase H ribonuclease activity

Storage

-20°C for 24 months 

 

Contents

Component

Volume

Taq /RT Enzyme Mix

50 μl

2X One-Step Buffer

2 x 750 μl

Storage

-20°C for 24 months 

Odoo - Sample 1 for three columns

High sensitivity and yields 

 

 

Manual

Manual_RP1100_ExcelRT™ 2X One-Step RT-PCR Kit

SDS

SDS_RP1100

Odoo - Sample 1 for three columns

[RP1000] ExcelRT™ Reverse Transcriptase

  • High yield

  • Thermostable, up to 50°C, during first strand synthesis

  • High processivity, generating cDNA up to 8 kb

  • Reduced RNase H ribonuclease activity

Odoo - Sample 3 for three columns

[RI1000] RNAok™ RNase Inhibitor

Application

  • RT-PCR

  • cDNA Synthesis 

  • in vitro transcription

Odoo - Sample 2 for three columns

[NS1000] FluoroVue™ Nucleic Acid Gel Stain

  • Excellent for in-gel staining

  • Sensitivity up to 0.14 ng DNA or 1 ng total RNA

  • A safer alternative to EtBr 

  • Suitable to blue or UV light 

Odoo - Sample 3 for three columns

[RQ2110] ExcelRT™ 2X One-Step RT-qPCR Kit (TaqMan, ROX)

  • High yield

  • Reverse transcription at wide temperature range (42-60°C)

  • High specificity 

  • Suitable for fast cycle program

  • With ROX reference dye

 

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公司介绍
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产品描述LightCycler采用通过交替注入加热的空气以及环境温度的空气进行温度循环,转变速度可高达20℃/秒;高表面积/容积比的玻璃毛细管反应管,确保管内温度于热反应室的迅速平衡。30分钟内即可完成40个循环。采用LED冷光源,移动后无需校正,免维护。宽广的动力学范围:同一运行中可以测量10E0-10E10个拷贝浓度范围。高灵敏度:可从3pg人基因组DNA(约一个人的基因组当量)中检出单拷贝基因。重复性优良:同一热反应室提供完全相 查看更多>
上海信裕生物科技有限公司在发布的伤寒杆菌PCR检测试剂盒供应信息,浏览与伤寒杆菌PCR检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与伤寒杆菌PCR检测试剂盒相关的内容。 查看更多>
北京北加美瑞生物技术有限公司在发布的ABI 7500Fast实时荧光定量PCR系统供应信息,浏览与ABI 7500Fast实时荧光定量PCR系统相关的产品或在搜索更多与ABI 7500Fast实时荧光定量PCR系统相关的内容。 查看更多>
上海宸功生物技术有限公司在发布的细胞色素P450亚酶CYP2E1活性荧光定量检测试剂盒供应信息,浏览与细胞色素P450亚酶CYP2E1活性荧光定量检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与细胞色素P450亚酶CYP2E1活性荧光定量检测试剂盒相关的内容。 查看更多>
2018-01-23
Thermo Qubit 4荧光定量【有钱任性,全新正品】长期2.7万促销赛默飞Qubit 4荧光定量【有钱任性,全新正品】长期2.7万促销手机:13585665563QQ:990907063Email:info@88-y.com商品名:Qubit 4品牌名:Thermofisher产地:马来西亚原厂型号:Qubit4.0荧光定量仪原厂货号:Q33226体积:13.6cm*25cm*5.5cm重量:743g储存条件:常温规格/包装标准包... 查看更多>
Mx3005P实时荧光定量PCR仪是由仪多多生物商城代理或销售的Agilent品牌的仪器,产品来源于美国。仪多多生物商城是中国最权威的Mx3005P实时荧光定量PCR仪销售服务商之一,在上海等地方销售Mx3005P实时荧光定量PCR仪已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业Mx3005P实时荧光定量PCR仪仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的Mx3005P实时荧光定量PCR仪产品 查看更多>
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚 查看更多>
小型仪器等。此外、上海抚生还代理了美国药典标准品,中检所标准品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等国外各类知名公司的产品... 查看更多>
武汉爱基百客生物科技有限公司在发布的实时荧光定量PCR(realtime PCR)供应信息,浏览与实时荧光定量PCR(realtime PCR)相关的产品或在搜索更多与实时荧光定量PCR(realtime PCR)相关的内容。 查看更多>
禽流感H5N2亚型核酸荧光PCR检测试剂盒是由上海研谨生物科技有限公司代理或销售的YOYOBIO品牌的试剂,产品来源于上海。上海研谨生物科技有限公司是中国最权威的禽流感H5N2亚型核酸荧光PCR检测试剂盒试剂销售服务商之一,在上海等地方销售禽流感H5N2亚型核酸荧光PCR检测试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业禽流感H5N2亚型核酸荧光PCR检测试剂盒仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的禽流感H5N2亚型核酸荧光PCR检测试剂盒产品 查看更多>
上海联硕生物科技有限公司在发布的爱思进Axygen 0.2ml荧光定量八排平盖薄壁管PCR-0208-C供应信息,浏览与爱思进Axygen 0.2ml荧光定量八排平盖薄壁管PCR-0208-C相关的产品或在搜索更多与爱思进Axygen 0.2ml荧光定量八排平盖薄壁管PCR-0208-C相关的内容。 查看更多>
 传染性脓疱病毒PCR检测试剂盒特点:①特异性引物是针对高度保守的支原体16S rRN 查看更多>
常见问题
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艾滋病检测试纸的原理是: 艾滋病检测试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂,可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体。所有操作时间约是15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质控对照、无需所有附加药剂。适合于临床检验、无偿献血现场筛查等。
抗体检测
抗体检测
血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围,可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。
确证试剂
  筛检实验阳性血清的确证最常用的是Western blot(WB),由于该法相对窗口期较长,灵敏度稍差,而且成本高昂,因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高,WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。
FDA批准的另一类筛检确证试剂是-免疫荧光-试验(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相对简单,整个过程在1-1.5小时内即可结束。此法的主要缺点是需要昂贵的荧光检测仪和有经验的专业人员来观察评判结果,而且实验结果无法长期保存。现在FDA推荐在向WB不能确定的供血员发布最终结果时以IFA的阴性或阳性为准,但不作为血液合格的标准。
筛检试验
筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。2012年,世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。
颗粒凝集实验是另一种操作简单方便,成本低廉的检测方法,该方法结果可通过肉眼判定,灵敏度很高,特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用,缺点是必须使用新鲜样品,特异性较差。
80年代后期发展起来的斑点印迹检测(Dot-blot assay)是一种快速ELISA(Rapid ELISA)方法,这种方法操作极为简便,过程短暂,整个过程多数在5-10分钟内甚至3分钟内即可结束,但该法比ELISA和颗粒凝集试剂昂贵得多。
人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液检测试剂盒(胶体金法)就属于侧向免疫层析法(金免疫)类别,基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20分钟即可定性得出检测结果的快速诊断试剂,用于检测口腔粘膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。可用于自愿咨询检测、不愿采血、晕针患者的初筛。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需进行进一步筛查确认。[3]
【HIV阴性】说明从人体内检测不到HIV抗体,阴性符号以(-)表示。不能说没有感染HIV, 要看是什么时候检测的,在窗口期内,感染者的体内还没有产生HIV抗体,或还没有产生足量的HIV抗体,这时HIV检测是阴性结果,如果在窗口期之后检测的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV阳性】说明从人体内检测到了HIV抗体,阳性符号以(+)表示。
【检测结果不定因素】
感染还处于窗口期:从HIV进入体内到检测这段时间还不够长,因此血清还没有形成典型的抗体反应
艾滋病进展到终末期,抗体水平下降
其他非病毒蛋白抗体的交叉反应:自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输血或器官移植等情况下,身体可以产生一些抗体,其反应与HIVP24核心蛋白抗体引起的反应很相似

抗原检测
病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性,但HIV-1抗体确认阴性者的辅助诊断。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂,试剂必须经过SDA批准注册、在有效期内,其阳性结果必须依据试剂说明书经中和试验确认。HIV-1P24抗原检测的敏感性为30-90%,该结果仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1 P24抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除HIV感染,临床中一般不作为常规诊断项目。

核酸检测
HIV核酸检测可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展等。常用的HIV病毒载量检测方法包括逆转录PCR实验(RT-PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)以及实时荧光定量PCR技术。值得注意的是,每一种HIVRNA定量系统都有其最低检测限,即可以测出的最低拷贝数或国际单位,RNA定量检测时未测出不等于样品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除HIV感染;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV感染的辅助指标,不能单独用于HIV感染的诊断。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的实验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平。
HIV核酸定性检测也可用于HIV感染的辅助诊断,在分析HIV基因亚型和变异等基础研究中应用。通常使用PCR或RT-PCR技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。报告定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外,利用核酸检测方法的高度敏感性,使用集合核酸扩增检测技术和方法,对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测,可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。aware天猫展开
多重荧光pcr 最多标准 123
挥剑7012021-07-31
这个看你自己的设置。qPCR仪一般是96孔板,最多有5个通道。理论上,你用一个通道作为内标,2个孔分别做阴阳性对照。那么可以做94*4=376个。当然这只是理论上的最大值,实际操作的时候受很多限制,如多重PCR之间的交叉反应导致无法合孔,样本量不足等。具体到肿瘤相关的突变检测试剂盒,目前拿到CFDA注册证的,最多的一个试剂盒可以同时检测54种突变。
做基因检测多少钱?就是想知道有什么问题要怎么做。
genesig q16便携式实时荧光定量PCR仪是Primerdesign公司设计的一款革命性实时荧光定量PCR仪器,专为Primerdesign的genesig系列的多达超过400种病原体检测试剂盒或食品安全检测试剂盒产品打造。这款仪器可以同时检测16个样品,设计它的目的就是要做到价位超低,让任何机构和个人都可以负担起,操作超简单,任何机构和个人都能使用。
通基扩增技术证明孩体内存EB病毒特异遗传物质片段数字表示相染量数字0代表绝染考虑设备基线波都设定参考卡切值即参考值(比1000我记)3.68乘104说明孩染EB病毒
更快地获得更丰富的结果
该仪器采用集成Twister?机械臂的TaqMan?微流体芯片,可以轻松进行数百次实时定量PCR反应。QuantStudio? 7 Flex系统可助您最大限度提高自动化输出能力。

兼容各类应用
优化的实验方案和试剂与直观的软件相结合,兼容最广泛的应用。

获得值得信赖的结果
OptiFlexTM系统拥有六组分离的激发与发射滤片和21片滤片组合,能够确保最高的多重分析能力和化学反应灵活性,提高孔与孔之间、仪器与仪器之间的数据精确性。

1. 主要技术要求
1.1 *内置96孔模块,可升级96孔快速模块及384孔模块;
1.2 *开放5通道检测,连续波长检测,另外可以升级至6色激发光通道和6色检测光通道及21色荧光;
1.3采用检测光滤光片分光,荧光通道开放,用户可自行添加荧光种类;
1.4 *冷CCD检测器96孔/384同步成像;
1.5 *最高升降温速率均可达到:6.5°C/秒;
1.6 *温控范围:4~99.9°C;
1.7动力学线性范围:检测10个起始拷贝,101~109九个数量级,致信度99.7%。区分度要有装机试剂盒验证:能分辨1250、2500、5000、10000、20000拷贝数的初始模板标准品各4个重复验证线性准确度,36个重复的5000拷贝和36个重复的10000拷贝能以99.7%的置信度加以区;
1.8 *有防系统误差方法可供用户选择:内参比荧光Rox,校正加样误差和管间差异;
1.9可分辨单位细胞起始拷贝数1~5拷贝之间的样本99.7%置信度;
1.10 *可分辨起始拷贝数200与300的样本(0.5倍差异);可实现单拷贝起始模板的区分;
1.11 *高能量合金卤素灯激发,单个光源寿命不低于2000小时;
1.12可升级HRM(高分辨率熔解曲线)分析系统,用于高通量筛选分析单核酸多态性位点(SNP), 高分辨熔解曲线分辨率: 低至 0.04°C;
1.13支持35分钟以内完成40循环的快速荧光定量PCR实验;
1.14软件组成:
1.14.1配备完备的定量PCR软件,等位基因分析软件。原厂的探针及引物设计软件,可用于PCR引物,巢式PCR,多重PCR引物,RT-PCR引物和Taqman探针的设计和自动测试;
1.14.2可配备相对定量基因表达软件,可同时对无限个数据进行自动的分析、比对、作出柱状图,用于基因表达,药物疗效考核等相对定量分析;
1.14.3配备完备的定量PCR软件,等位基因(SNP)分析软件和阴阳性结果自动判定软件;
1.15试剂耗材开放;
1.15.1可提供原厂人类、大鼠、小鼠、果蝇和拟南芥等多种模式生物全基因组范围表达试剂盒基因表达试剂盒(试剂盒包含:正/反向引物,TaqMan探针,)且同一PCR条件;
1.15.2可提供原厂人类、大鼠、小鼠、果蝇和拟南芥等模式生物microRNA检测试剂盒(试剂盒包含:正/反向引物,TaqMan探针,)且同一PCR条件;
1.15.3支持耗材:国际标准96孔 (0.2 mL) 反应板与光学盖膜,0.2 mL八连管,0.2mL单管;
1.16内置触摸屏电脑:触摸屏电脑可备份还原超过100次的实验数据,可快速地设置多种应用;
*1.17原装进口。
意思是检测结果表明受检者每毫升血液中有2640000个乙肝病毒DNA。所用的检测试剂盒的检测下限是每毫升500个乙肝病毒DNA,如果受检者血液中的有乙肝病毒DNA,但是每毫升少于500个,可能就检测不出来。
定量结果显示:1.血液中有乙肝病毒DNA分子,受检者被乙肝病毒感染了;2.血液中的乙肝病毒浓度较高,积极治疗吧
检测方法编辑
检测HIV感染者体液中病毒抗原和抗体的方法,操作方便,易于普及应用,其中抗体检测尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的测定,在HIV感染检测中的地位和重要性也日益受到重视。

抗体检测
抗体检测
血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围,可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。
确证试剂
  筛检实验阳性血清的确证最常用的是Western blot(WB),由于该法相对窗口期较长,灵敏度稍差,而且成本高昂,因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高,WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。
FDA批准的另一类筛检确证试剂是-免疫荧光-试验(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相对简单,整个过程在1-1.5小时内即可结束。此法的主要缺点是需要昂贵的荧光检测仪和有经验的专业人员来观察评判结果,而且实验结果无法长期保存。现在FDA推荐在向WB不能确定的供血员发布最终结果时以IFA的阴性或阳性为准,但不作为血液合格的标准。
筛检试验
筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。2012年,世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。
颗粒凝集实验是另一种操作简单方便,成本低廉的检测方法,该方法结果可通过肉眼判定,灵敏度很高,特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用,缺点是必须使用新鲜样品,特异性较差。
80年代后期发展起来的斑点印迹检测(Dot-blot assay)是一种快速ELISA(Rapid ELISA)方法,这种方法操作极为简便,过程短暂,整个过程多数在5-10分钟内甚至3分钟内即可结束,但该法比ELISA和颗粒凝集试剂昂贵得多。
人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液检测试剂盒(胶体金法)就属于侧向免疫层析法(金免疫)类别,基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20分钟即可定性得出检测结果的快速诊断试剂,用于检测口腔粘膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。可用于自愿咨询检测、不愿采血、晕针患者的初筛。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需进行进一步筛查确认。[3]
【HIV阴性】说明从人体内检测不到HIV抗体,阴性符号以(-)表示。不能说没有感染HIV, 要看是什么时候检测的,在窗口期内,感染者的体内还没有产生HIV抗体,或还没有产生足量的HIV抗体,这时HIV检测是阴性结果,如果在窗口期之后检测的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV阳性】说明从人体内检测到了HIV抗体,阳性符号以(+)表示。
【检测结果不定因素】
感染还处于窗口期:从HIV进入体内到检测这段时间还不够长,因此血清还没有形成典型的抗体反应
艾滋病进展到终末期,抗体水平下降
其他非病毒蛋白抗体的交叉反应:自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输血或器官移植等情况下,身体可以产生一些抗体,其反应与HIVP24核心蛋白抗体引起的反应很相似

抗原检测
病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性,但HIV-1抗体确认阴性者的辅助诊断。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂,试剂必须经过SDA批准注册、在有效期内,其阳性结果必须依据试剂说明书经中和试验确认。HIV-1P24抗原检测的敏感性为30-90%,该结果仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1 P24抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除HIV感染,临床中一般不作为常规诊断项目。

核酸检测
HIV核酸检测可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展等。常用的HIV病毒载量检测方法包括逆转录PCR实验(RT-PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)以及实时荧光定量PCR技术。值得注意的是,每一种HIVRNA定量系统都有其最低检测限,即可以测出的最低拷贝数或国际单位,RNA定量检测时未测出不等于样品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除HIV感染;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV感染的辅助指标,不能单独用于HIV感染的诊断。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的实验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平。
HIV核酸定性检测也可用于HIV感染的辅助诊断,在分析HIV基因亚型和变异等基础研究中应用。通常使用PCR或RT-PCR技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。报告定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外,利用核酸检测方法的高度敏感性,使用集合核酸扩增检测技术和方法,对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测,可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。aware天猫
有谁知道国内H-FABP试剂盒的生产厂家?
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人巨细胞病毒核酸检测试剂盒符合哪些国家标准
:探讨人巨细胞病毒(HCMV)核酸定量检测试剂(PCR‐荧光探针法)的临床使用及初步评价。
刚开始接触荧光定量-PCR,有很多问题不是很明白,脑子比较乱,我做了RT-PCR检测一目的基因表达,扩增产物清晰,明确,其长度与Marker对照相吻合,老板叫我对其测序,然后在进行荧光定量检测。
⑴测序是为了验证扩增产物是否为自己的目的产物,既然我的产物长度符合要求,那么有必要进行测序吗?②对于荧光定量检测,我先前的那对引物可以接着用吗?③如用ABI7700采用Taqman探针法检测,探针的设计是自行用软件(如primer5.0)或参考文献提交公司合成(像PCR引物合成)那样吗?④看到有的文章介绍,探针是国外的、国内的,这是什么意思?依我的理解:就像PCR引物合成,只要合成正确,荧光标记完好,国外国内不都一样吗?⑤看到有相应试剂盒提供,其提供的东西有哪几样?是不是探针,引物都包括了,对于那些常见的基因都有相应的试剂盒卖吧,关键是价钱贵吗?
看到一个同事做一课题就是设计荧光定量PCR检测某产物,结果半年也没搞出来,令我感到很生畏。现在还有很多临床病原微生物的荧光定量检测还未成功,有的还需优化,是不是设计较困难,哎呀,还未做,就感到力不从心了,大家帮帮我