NEB T4 DNA 连接酶 T4 DNA ligase 10000U-蚂蚁淘商城

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NEB T4 DNA 连接酶 T4 DNA ligase 10000U

2024-04-28

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甲基转移酶产品列表产品概述

NEB 提供一系列 DNA 和蛋白质甲基转移酶。

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产品描述

特性

高反应效率

粘性末端和平齐末端均可连接

限制性酶切片段的克隆

将 linker 或 adapter 连接到 DNA 片段的平齐末端

室温或 16℃ 均有活性

概述该酶催化契合的双链DNA或RNA的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑末端或粘性末端 DNA 之间的连接，还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻（1）。

来源纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8（2）。

反应条件1 X T4 DNA 连接酶缓冲液 [ 50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25 ℃），10 mM MgCl2，10 mM DTT，1 mM ATP]。推荐 DNA 5 末端浓度为 0.1－1.0 μM。16℃ 温育。

质保声明T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

单位定义（粘性末端活性单位）1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中，16 ℃ 反应条件下，30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的 λDNA 片段 [5 端浓度为 0.12 μM （300 μg/ml）] 连接所需的酶量。

浓度400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。

热失活65°C 10分钟。

室温连接反应为方便起见，连接反应可以在室温（20-25 ℃）条件下进行。粘性末端连接：在 20 μl 反应体系中加入 1 μl T4 DNA 连接酶，反应 10 分钟。平齐末端连接：在 20 μl 反应体系中加入 1 μl T4 DNA 连接酶反应 2 小时，或者加入 1 μl 高浓度 T4 DNA 连接酶反应 10 分钟。