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Eca-109细胞 人食管癌细胞

  
  2025-11-06
  
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MTT法测细胞相对数和相对活力活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使MTT 分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。
细胞悬液以1000rpm离心10分钟,弃上清液。沉淀加入0.5-1ml MTT,吹打成悬液。37℃下保温2小时。加入4—5 ml酸化异丙醇(定容)。打匀。1000 rpm离心,取上清液酶标仪分光光度计570nm比色,酸化异丙醇调零点。注意:MTT法只能测定细胞相对数和相对活力,不能测定细胞数。?
细胞计数:将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。
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Eca-109细胞 人食管癌细胞 细胞活力:将细胞悬液以0.5ml加入试管中。加入0.5ml 0.4%台盼兰染液,染色2 一3分钟。吸取少许悬液涂于载玻片上,加上盖片。
镜下取几个任意视野分别计死细胞和活细胞数,计细胞活力。死细胞能被台盼兰染上色,镜下可见深兰色的细胞,活细胞不被染色,镜下呈无色透明状。活力测定可以和细胞计数合起来进行,但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用。


静置3分钟。镜下观察,计算计数板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算:细胞数/ml=4大格细胞总数/ 4×10000注意:镜下偶见由两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团占10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。

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