五聚体使用 - ProImmune - 掌握免疫 _ MHC 五聚体、CD1d 四聚体、定制肽合成、免疫测定、T 细胞表位发现、HLA 组织分型、细胞分析、配体结合测定、免疫应答
Fox, CP. 等人。 （2010）。在 Epstein-Barr 病毒阳性 NK 和 T 细胞淋巴增殖性疾病中表达的新型潜膜 2 转录物编码细胞免疫治疗的靶点。血。 116（19）：3695-704。 [PubMed ID：20671118]
在《Blood》一期中，Christopher Fox 和他的合作者解释了 EBV 领域的一个谜团。
自然杀伤/T 细胞淋巴瘤经常与 EBV 相关并且对当前的治疗方案反应不佳。 EBV 基因组编码约 80 种蛋白质，但其中很少在肿瘤中表达。其中膜蛋白 LMP2 就是其中之一。 LMP2 是 CD8+ T 细胞 (CTL) 的靶向，并显示出作为抗肿瘤治疗的攻击途径的一些前景。
Fox 等人表征了四种 EBV 肿瘤细胞系，他们分析的关键是细胞范围ProImmune 提供的 LMP2 特异性 MHC I 类 Pro5® 五聚体，用于流式细胞仪y。他们发现 LMP2A 作为蛋白质几乎无法检测到（使用对\"A”变体的独特 N 端具有特异性的抗体），并且使用每个转录物 5\' 端的引物发现每个转录物的水平都微乎其微。鉴于先前已经表征了抗 LMP2 CTL 反应，这一结果令人困惑。
重要的是，细胞系的抗原呈递是完整的。该团队通过用 LMP2 转导的抗原呈递细胞刺激 EBV 患者 PBMC，制备了两种不同的多克隆抗 LMP2 CTL 制剂。通过 51-Cr 释放测定测定，多克隆 CTL 对肿瘤细胞系具有活性。他们的 CTL 混合物含有大量 LMP2 特异性细胞，通过 Pro5® 五聚体染色进行鉴定（图 1）。
由于该分析未排除针对其他 EBV 表位的活性，A*24:02 和A*02:01 表位特异性克隆 CTL 系也进行了测试，并给出了可比较的结果。 Fox 等人扩大了 HLA 研究范围，用重组 HLA-A*11:01 转导了他们的一种肿瘤细胞系，并观察到 HLA-A*11:01 限制性 LMP2 表位特异性 CTL 克隆产生 IFNg。
因此，在三种不同 HLA 类型的背景下，抗 LMP2 CTL 反应在 ap亲本缺乏 LMP2 表达——LMP2 基因座是否可能有更多转录本？ LMP2 基因座 3\' 外显子的 qRT-PCR 显示编码（至少）外显子 2-6 的转录本的强劲表达。通过5\'-RACE，发现新的转录本起始于LMP2基因的末端重复（TR）区域，并且所有四种EBV肿瘤细胞系测试的表达转录本均起始于TR。
这一结果使用从患者活检中提取的 mRNA 进行验证。在检查的七种 EBV 相关淋巴瘤中，全部表达新鉴定的转录物。这一发现的意义是深远的，因为所谓的 TR-LMP2 蛋白是 NK 和 T 细胞淋巴瘤发生过程中唯一表达的 LMP2 变体，可能成为未来治疗的靶点。使用 ProImmune 五聚体绘制 CTL 单个表位反应的能力对于这项工作的成功至关重要。
使用的 ProImmune Pro5® 五聚体：
F683-2AA*24:02/TYGPVFMSL EBV LMP2 (419–427)F666-2AA*02:01/FLYALALLLEBV LMP2 (356-364)F508-2AA*11:01/SSCSSCPLSK EBV LMP2 (340-349)F042-2AA*02:01/CLGGLLTMV EBV LMP2 (426-434)此这项工作是在伯明翰大学癌症科学学院的肿瘤免疫学和基因治疗实验室与德克萨斯州休斯顿贝勒医学院的 Bollard 实验室合作进行的（如下所示）。
< img解码=\"async”loading=\"lazy”src=\"https://www.proimmune.com/wp-content/uploads/2023/07/Bollard_500px.jpg”alt=\"贝勒学院Bollard实验室成员”医学，休斯顿，德克萨斯州” width=\"500\" height=\"115\" border=\"0\">
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