李宸畅【摘要】：核受体(Nuclear Receptor,NR)是多种生理过程的重要调节者,孤儿核受体(Orphan Nuclear Receptors,ONRs)家族作为核受体家族中的重要成员之一,对糖尿病、肿瘤、免疫相关疾病、代谢性疾病等多种重大疾病有显著的调控和治疗作用。维甲酸相关孤儿受体(Retinoic Acid Related-Orphan Receptors,RORs)家族是孤儿核受体家族中的成员之一,该家族中包含RORα、RORβ和RORγ3种亚型。其中,RORα是该家族中最早被发现的成员。RORα蛋白在视网膜、骨骼肌、大脑、胸腺、肝、肺、肾和脂肪等多种组织中表达。它与前列腺癌、卵巢癌、肝癌、食管癌等癌症的发生发展密切相关,对小脑发育、淋巴细胞发育、昼夜节律等生理过程也有重要的调控作用。此外,在2型糖尿病、脂质代谢异常等疾病的治疗中也发挥关键作用。因此,RORα的研究具有重要意义。以RORα作为靶点筛选特异性小分子调节剂(包括:抑制剂和激动剂),将会为多种疾病的治疗提供潜在的候选药物。目前,针对RORα相关的特异性小分子抑制剂的筛选方法较少,现有的高效高特异性调节剂也寥寥无几。因此,针对RORα建立小分子调节剂的筛选与评价方法具有重要的意义。本研究主要目的是通过Luciferase和AlphaScreen等实验手段构建高效、快速可靠的药物筛选平台,并在此基础上发现RORα的靶向小分子抑制剂与激动剂。前期利用分子对接技术对SPECS、Chem Div、Lifechemicals和ChemBridge化合物库中数万个化合物进行虚拟筛选,从中挑选出对接评分(Glide Score)在-5~-6分的近400个化合物进行购买。利用所建立的生物活性筛选平台,采用Luciferase实验与AlphaScreen实验,从该400个化合物中最终获得了6个效果较好的RORα小分子抑制剂:E168、F79、F81、F85、F91和F91。依照此方法筛选到的活性小分子还需要进行蛋白与小分子共结晶实验,以便获得蛋白与活性小分子的真实结合模式,提供化合物与蛋白高结合活性的结构基础,也为进一步基于结构的改造优化提供指导。本论文还对化合物与RORγ和RORα开展了共结晶实验,通过大量实验条件的筛选,获得了RORγ与其活性小分子的复合物晶体。鉴于RORγ与RORα具有很高的序列和结构同源性,该RORγ与其活性抑制剂——XCD38的复合物晶体结构,为后续RORα小分子调节剂的发现和设计提供了理论基础和有力的指导。 【学位授予单位】：吉林大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2018【分类号】：R914 孙善明;田强;尉欣;曲红梅;钟延美;张云香;;窄带成像放大胃镜联合靛胭脂染色在早期胃癌及癌前病变诊断中的应用[J];中华消化内镜杂志;2017年02期 康运凯;吴学炜;史小芹;苗拥军;鲁清月;渠海;付光宇;王敏;;七项血清标志物在胃癌患者术前术后检测的临床意义[J];中华检验医学杂志;2017年01期 闫真;邵淑琳;张杰;刘莹;石进;郎海波;余英;魏月明;代静;曹艳;;血清胃蛋白酶原联合胃泌素17检测在胃癌筛查中的价值[J];中国医药;2016年12期 孙宗琼;延根;陈林;岳建国;金琳芳;蔡毅;;CT灌注成像对胃癌评估的临床应用[J];实用放射学杂志;2016年08期 冀美超;姜虹羽;董智雄;朱长军;;驱动蛋白KIF4A抑制胃癌细胞的侵袭作用[J];国际生物医学工程杂志;2016年03期 邓伟;黄天壬;利基林;叶司原;余家华;张春燕;张振权;何振芳;;广西居民恶性肿瘤死亡流行特征及趋势分析[J];中国肿瘤;2013年06期 张敬一;唐丽娟;栗华;张帆;董辉;李平;朱俊卿;;河北省2009年国家疾病监测点恶性肿瘤死亡率分析[J];中国慢性病预防与控制;2013年02期 朱丽萍;李艾;赵军;张伟;颜玮;吉路;陈轶英;余平;刘杰;;江西省第3次死因回顾恶性肿瘤调查结果分析[J];中国慢性病预防与控制;2012年05期 周金意;武鸣;杨婕;陶然;林萍;韩仁强;俞浩;;1973～2010年江苏省居民恶性肿瘤死亡率变化趋势[J];中国肿瘤;2012年08期 邹小农;孙喜斌;陈万青;郑荣寿;张思维;代珍;刘卫东;赵德利;;2003—2007年中国胃癌发病与死亡情况分析[J];肿瘤;2012年02期 许燕君;罗乐;夏生林;莫兆波;宋秀玲;何群;孟瑞琳;周少恩;;广东省居民恶性肿瘤死亡趋势分析[J];华南预防医学;2011年06期 翟文琴;邹晨;吉均祥;徐新鸣;陈建国;;转录因子RORγt在胃癌中的表达及临床意义[J];江苏大学学报(医学版);2010年06期 陈翀;张焕新;曾令宇;张滢;张建军;徐开林;;携带小鼠RORγt基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达[J];中国实验血液学杂志;2010年06期 钟彩梅;蔡译萱;王美容;郑秀芬;邱贤文;孙乐栋;张帆;张堂德;;分子对接分析地高辛衍生物选择性拮抗RORγt活性[J];南方医科大学学报;2014年04期 李庆华;肖波;杨欢;张海平;胡珏;张勇;梁静慧;吴志国;;IL-17、Rorγt在实验性自身免疫性神经炎中的表达[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年 赵艳红;王国华;玉荣;杜晨光;张文广;张燕军;李金泉;;内蒙古绒山羊不同月份皮肤组织RORα基因的表达[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年 卞芳芳;王军;路明;武怡;;RORγt在支气管哮喘小鼠肺组织表达及布地奈德对其抑制作用[A];2012年江浙沪儿科学术年会暨浙江省医学会儿科学分会学术年会、儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编[C];2012年 苏琦;;DADS处理人胃癌细胞前后RORα蛋白的差异表达[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年 蒋延伟;王忠永;邱会芬;孙程;韩兆东;马蕾;李卫;张玉杰;;寻常型银屑病患者外周血单一核细胞转录因子RORγt与Foxp3 mRNA表达及相关性研究[A];2013全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编[C];2013年 凌晖;文玲;张峰华;夏红;董琳;周建国;;RORα基因沉默对二烯丙基二硫诱导人胶质瘤细胞U251增殖的影响[A];中国病理生理学会受体、肿瘤和免疫专业委员会联合学术会议论文汇编[C];2010年 苏琦;;RORα蛋白在胃癌、癌旁及正常胃黏膜组织中的表达[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年 凌晖;苏琦;;microRNA干扰RORα表达对人胃癌细胞增殖与周期的影响[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年 刘绍坤;向旭东;杨沫毅;王谷宜;刘毅;陈平;;RORγt对急性哮喘小鼠脾源性CD4+T细胞亚群Th17细胞的影响[A];中华医学会第七届全国呼吸道感染学术大会暨第一届多学科抗感染治疗学术研讨会论文汇编[C];2011年