大肠杆菌DB3.1菌种
大肠杆菌DB3.1菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。
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菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。
1. 大肠杆菌DB3.1菌种培养试剂的保存：
血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。
培养基: 2oC – 8oC避光保存。
完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。
尽量缩短血清和培养基见光的时间
2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：
很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌DB3.1菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。
3.培养基中是否应加酚红：
大肠杆菌DB3.1菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类***的作用，特别是雌***。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC1345VSMEC大鼠胸主动脉平滑肌细胞大鼠DMEM贴壁
EC1211SNU398人肝癌细胞人DMEM贴壁+悬浮
EC524ECECEC-HHM-2人胚心肌组织来源细胞人DMEM贴壁
EC637HECFB人心肌成纤维细胞人DMEM贴壁
EC525ECECEC-HEH-2人胚心肌组织来源细胞人DMEM贴壁
EC526MT2人T淋巴细胞白血病细胞人1640悬浮
EC548HMSEC人骨髓间充质干细胞人MECECoy’s 5a贴壁
EC528HL-1小鼠心房肌细胞小鼠DMEM贴壁
EC1307TU212人喉癌细胞人1640贴壁
EC549SNU-EC1人结肠癌细胞人1640贴壁
EC618HSF***肤成纤维细胞人DMEM贴壁
EC814M-20人胚胎成纤维细胞人DMEM贴壁
EC556HNEpEC人鼻粘膜上皮细胞人1640贴壁
EC529HFTF人胚胎眼Tenon＇s囊成纤维细胞人MEM贴壁
EC530 MSEC猪骨髓间质干细胞猪1640贴壁
EC531SJSA-1人骨肉瘤细胞人DMEM贴壁
EC532MEC38小鼠结肠癌细胞小鼠1640贴壁
EC557MeT-5A 人膜间皮细胞人DMEM贴壁
EC1286TE354.T***肤基底细胞癌细胞 人DMEM贴壁
EC906Mouse podoECyte小鼠肾足细胞小鼠DMEM贴壁
EC907Rat podoECyte大鼠肾足细胞大鼠DMEM贴壁
EC533兔软骨细胞兔DMEM贴壁
EC558HECM人心肌细胞人 DMEM贴壁
EC1231SU-DHL-6人B细胞淋巴瘤细胞人1640悬浮
EC559REC-K8人B细胞淋巴瘤细胞人1640悬浮
EC534NECI-H929人骨髓瘤细胞人IMDM悬浮
EC1131 RT-112人膀胱癌细胞人1640贴壁
EC612HECECLM3人高转移肝癌细胞人1640贴壁
EC1142SAECEC-83涎腺腺样囊性癌细胞人1640贴壁
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