大肠杆菌Rosetta菌种
大肠杆菌Rosetta菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。
菌种保藏由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。
1. 大肠杆菌Rosetta菌种培养试剂的保存:
血清:-5oC - -20oC 保存,避免反复冻融。
培养基: 2oC – 8oC避光保存。
完全培养基: 2oC – 8oC避光保存,并在2周内用完。
尽量缩短血清和培养基见光的时间
2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法:
很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌Rosetta菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide(如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一) 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定,降解比较慢,提高细胞的存活和生长,极大降低对细胞有毒性的氨的积累。
3.培养基中是否应加酚红:
大肠杆菌Rosetta菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类***的作用,特别是雌***。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC224EL4小鼠淋巴瘤细胞小鼠DMEM悬浮
EC225L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤细胞小鼠DMEM悬浮
EC226P388D1小鼠淋巴样瘤细胞小鼠
EC227P815小鼠肥大细胞瘤细胞小鼠
EC228YAC-1小鼠淋巴瘤细胞小鼠1640悬浮
EC229L1210小鼠白血病细胞小鼠1640悬浮
EC230L6565小鼠白血病克隆细胞系小鼠
EC231RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞小鼠DMEM贴壁
EC232K7M2 wt [K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨细胞小鼠
EC2334T1小鼠乳腺癌细胞小鼠1640贴壁
EC234C127小鼠乳腺肿瘤细胞小鼠
EC235F9小鼠畸胎瘤细胞小鼠
EC236P19小鼠睾丸畸胎瘤细胞小鼠MEM贴壁
EC237B16小鼠黑色素瘤细胞小鼠1640贴壁
EC238B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞小鼠
EC239CT26.WT小鼠结肠癌细胞小鼠1640贴壁
EC240RAG小鼠肾腺癌细胞小鼠
EC241Hepa 1-6小鼠肝癌细胞小鼠DMEM贴壁
EC242LLC小鼠肺癌细胞小鼠DMEM贴壁+悬浮
EC243FO小鼠骨髓瘤细胞小鼠
EC244P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]小鼠骨髓瘤细胞小鼠
EC245P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞小鼠
EC246P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞小鼠
EC247SP2/0小鼠骨髓瘤细胞小鼠IMDM悬浮
EC248AtT-20小鼠垂体瘤细胞小鼠
EC250Beta-TC-6小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞小鼠DMEM贴壁
EC251RM-1小鼠前列腺癌细胞小鼠1640贴壁
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