2. 结合功能检测 在内皮细胞上表达的L-选择素/唾液糖蛋白，VLA-4/VCAM,CR3/纤维素等大量粘附分子，能与活化的中性粒细胞上的相应配体强合。有报道将单细胞层的内皮细胞作为生理性底物，在类似Borden小室的装置中，经一定的反应时间后，计数滤膜上皮内皮细胞结合的中性粒细胞数，作为其结合能力的测定指标。内皮细胞用白细胞介素-1（IL-1），脂多糖（LPS），肿瘤坏死因子（TNF）α预处理后，或是在滤 膜下放置吸引剂，都可以使移动和结合作用增强。 3. 吞噬功能的检验 将中性粒细胞与已标记台盼蓝染料的细菌共温，经洗涤除去未摄入的细菌，再计数吞噬细菌的中性粒细胞数。运用这项技术既能解释抗体、补体成分、血浆蛋白在吞噬作用中的重要性，又能获知病人血清的调理功能。 4. 杀伤功能的检测 中性粒细胞可通过溶酶体酶对吞入胞内的病原体或颗粒进行消化降解。胞内杀菌机制复杂，目前认为真正的杀菌过程，是通过胞浆内的氧依赖性及氧非依赖性胞......阅读全文 一年25个里程碑！免疫疗法\"战胜”癌症，靠的是实力近几年，免疫疗法的成功使癌症治疗进入了新的时代。无论是科研界，还是商业界，都丝毫没有掩饰对这一领域的热情。2016年，Cell杂志公布的年度十大最佳论文中，免疫疗法占两席。事实上，这两项成果只是去年癌症免疫疗法重要突破进展中的\"冰山一角”。 刚刚过去的2016年，科学家们在Cell、Natur 流式细胞仪十大发展趋势 从二十世纪八十年代至今，世界上生产流式细胞仪的厂家几经变迁，BC BD仍在，新玩家不断进入，并购重组各取所需，它们生产各种不同性能和功能的流式细胞仪。总体而言，呈现出以下的发展趋势：1. 应用对象从细胞到颗粒一般而言，流式细胞仪检测的对象是细胞，而且是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞，即单 FDA批准的用于实体瘤治疗的单抗类药物盘点全球范围内癌症已成为导致人类死亡的最主要病因，并且随着人口的增长及老龄化的出现，发病率日益升高。在所有的治疗措施中，标准治疗方案主要为手术、化疗及放疗。尽管化疗方案效果显著，但该措施缺乏对于肿瘤细胞的选择性，因而容易导致对机体的系统性毒性，以及抗药性的产生。随着人类对于肿瘤细胞分子机理的深入了解 流式细胞仪在血液学检验中的应用 摘要：流式细胞仪(flow cytometer，FCM)是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。在医学研究领域中，流式细胞仪能够快速分析单个细胞的多种特性，它既可以定性也可以定量，适于大量标本的检测。 靶向DC细胞的治疗型肿瘤疫苗：亮点与挑战并存2006年6月，第一个肿瘤疫苗Gardasil获得美国FDA批准，用于宫颈癌的预防。成功不是偶然的，因为宫颈癌是HPV泡疹病毒引起，用泡疹病毒的特异蛋白作抗原，刺激机体产生抗病毒抗体，疫苗才有预防作用。一个疫苗的成功与否，与是否有一个适当抗原休戚相关。可惜的是，肿瘤的发生除宫颈癌可以归罪于単一的 细胞培养反应器的操作模式 动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式，一般分为分批式操作（batch）、流加式操作（Fed-batch）、半连续式操作（semi-continuous）、连续式操作（continuous）和灌流式操作（perfusion）五种操作模式。1.批式操作（batchc 细胞培养反应器的操作模式 实验概要动物细胞大规模培养的生物反应器操作模式，一般分为分批式操作（batch）、流加式操作（Fed-batch）、半连续式操作（semi-continuous）、连续式操作（continuous）和灌流式操作（perfusion）五种操作模式。实验步骤1. 批式操作（batch culture）& 年终盘点：肿瘤免疫治疗进展免疫治疗已成为癌症精准医疗中的一大热点，并已逐步发展成为继手术、化疗和放疗后的第四种肿瘤治疗模式。2019年，肿瘤免疫治疗有突破有进展。值此新年之际，转化医学网整理了今年热门的免疫治疗研究文章，共有12篇。 01 Treg细胞重编程改善免疫治疗 Mauro Di Pilato,et al. 常用细胞凋亡检测方法（图） 一、细胞凋亡的形态学检测1、光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋 通过细胞计数对疾病模型小鼠进行免疫监测 通过细胞计数对疾病模型小鼠进行免疫监测摘要生物样本往往是非单一细胞的混合物，如原代分离的细胞样本和许多培养的细胞样本都是由不同种类或不同功能的细胞组成。而对于样本中不同细胞亚群的区分和定量恰恰是很多研究中的关键一环。这些混合在一起的不同细胞通常是使用流式细胞仪和荧光标记的细胞 血细胞分析仪50年发展历程和未来展望 1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜，1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大，后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞的人，开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一 通过技术创新 驱动CAR-T制造优化随着CAR-T疗法获批上市，优化CAR-T细胞生产工艺成为迫切需求，市场急需更高效、成本更低的细胞生产工艺。2017年全封闭自动化CAR-TXpress™系统正式进入CAR-T市场，为全球带来新一代CAR-T生产工艺，可实现CAR-T细胞高效率、低成本生产，备受瞩目。近日，《CELL 羊膜细胞的培养——封闭式试管培养 实验方法原理在标准培养箱（37°C ) 中用 Leighton 塑料管培养细胞，然后用胰蛋白酶悬浮法收集细胞。实验材料羊水标本D-PBSA秋水仙酰胺胸腺嘧啶核苷溴脱氧尿核苷胰蛋白酶EDTAHistopaque-l077试剂、试剂盒完全培养液胰蛋白酶和EDTA混合液消毒剂如Virkon氯化钾低渗溶液固 细胞培养的基本方法-细胞分离技术（二） 1.悬浮细胞 ●计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。 ●以1×107到5×107细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×107到1×107在无血清培养基中，再次悬浮细胞。 ● 单细胞精度解析人类T淋巴细胞起源及胸腺器官发生T淋巴细胞是宿主适应性免疫系统中最重要的免疫细胞之一，在抵抗病原入侵、维持机体稳态以及抗肿瘤等方面起到不可或缺的作用【1,2】。胸腺是T淋巴细胞发育的必需场所【3】。胎肝或骨髓来源的胸腺定植祖细胞（thymus seeding progenitor, TSP）迁移定植到胸腺后，即为早期胸腺祖细胞 我国科学家揭示CAR-T细胞触发细胞因子释放综合征机制尽管用经过基因改造后表达嵌合抗原受体（CAR）的T细胞（CAR-T细胞）治疗B细胞恶性肿瘤的临床应用取得了成功，但是细胞因子释放综合征（CRS）却阻碍了这种疗法在患者中的有效性。众所周知，CRS是由急性炎症反应触发的，其特征是发烧、低血压和与血清细胞因子升高有关的呼吸功能不全。尽管人们已报道在经 诱导性多能干细胞最新研究进展诱导性多能干细胞（iPS细胞）最初是日本科学家山中伸弥（Shinya Yamanaka）团队在2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc）的组合转入到小鼠胚胎或皮肤纤维母细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。这些ips细胞在形态、基因和 抗原呈递细胞的选择和制备 实验步骤基本方案 过 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 备 腹 腔 巨 噬 细 胞材 料单核细胞增多性利斯特氏菌无 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠（见 表 A .2A .1)，包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培养基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V 2019年10月Cell期刊不得不看的亮点研究2019年10月份Cell期刊又有哪些亮点研究值得学习呢？小编对此进行了整理，与各位分享。 1.Cell：开发出光学混合筛选技术，可在几天内筛选人细胞中的数千个基因 doi:10.1016/j.cell.2019.09.016 如今，在一项新的研究中，来自美国麻省理工学院和布罗德研究所的研 癌症耐药性是如何产生的？近年来，研究者们在肿瘤的预防与治疗领域取得了突破性的进展，临床上手术、放化疗以及免疫疗法的结合使用也大幅提高了患者的寿命以及生活质。然而，在很多情况下，肿瘤组织还是会出现较强的抗药性，使得治疗结果往往不佳。因此，进一步探究癌细胞的耐药性的产生以及寻找针对性的治疗方法是目前的研究热点。本期为大家带 2017年5月Science期刊不得不看的亮点研究5月份即将结束了，5月份Science期刊又有哪些亮点研究值得学习呢？小编对此进行了整理，与各位分享。 1.Science：重磅！开发出延缓癌细胞生长的新方法 doi:10.1126/science.aai9372 癌症是一种非常复杂的疾病，但是它的定义是相当简单的：细胞发生异常和不受控制 动物细胞大规模培养技术-1 一、前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年，动物细胞培养规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市 细胞衰老如何应对 近年来，细胞体外培养造成细胞衰老的报导中指出，所有动物细胞皆有其本身的『海佛烈克极限』，影响其生物寿命长短。从细胞代数学说（也称细胞分裂次数学说）认为，人体细胞在培养条件下平均可培养60代。也就是说，无论是原代细胞或是细胞株，在细胞培养过程中细胞衰老现象是存在且常见，但却容易被操作人员忽略，往往在细 流式细胞仪和流式细胞术指南篇-1 Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用实验材料和方法 从1968年 zui早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来, 进军实体瘤、缓解CRS 展望细胞免疫疗法近期新动向当人体内大多数细胞开始不受控的分裂时，癌症就发生了。癌症这类因细胞分裂分化出现异常的疾病从古有之，而伴随着科学技术的进步，人们踏入了微观世界，开始从细胞分子角度去寻找治愈这类疾病的方法。 而目前最受青睐的技术莫过于细胞免疫疗法，人们尝试从细胞角度去消灭癌症，从赋予不同种类免疫细胞具有特异性的\" 汤富酬 乔杰再发文：绘制人类心脏高精度发育细胞图谱人类胚胎发育是一个极其复杂的过程，从一个单细胞的受精卵开始，首先经过着床前胚胎发育产生胚内和胚外组织，再到着床后原肠胚阶段三个胚层的特化，进而到器官发生、分化、成熟，及至新生命的诞生。整个两百八十天的胚胎发育过程从一个单细胞受精卵增殖发育形成含有上万亿个细胞的婴儿，期间基因表达受到严密、精准的调 流式细胞技术精彩回顾 分子生物学主要致力于对细胞中不同系统之间相互作用的理解，包括DNA，RNA和蛋白质生物合成之间的关系以及了解它们之间的相互作用是如何被调控的。而流式细胞仪是测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术。与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点。技术简介流式细胞术（Flow Cytom NBT特别关注丨6位大咖指引心肌干细胞领域\"再生”2018年，Anversa实验室超过30篇文章由于造假而撤稿，这一事件对于心肌细胞治疗领域带来了非常负面的影响。在过去的18年间，许多医生和科学家以此不实结论花费数年进行的科学研究变得毫无意义，不仅使病人蒙受了极大的损失，在该领域里投入的数百万计资金也付之东流。然而，骨髓细胞或者是成体驻留的心肌