BioGenes—新一代宿主细胞残留蛋白（HCP）ELISA检测试剂盒

准确定量检测残留的宿主细胞残留蛋白（HCP）是病毒性疫苗或基因工程产品生产的关键质控标准。BioGenes公司优化的360 - HCP检测试剂盒检测宿主细胞蛋白(HCP)比传统检测具有显著的优势。通过提供四个试剂盒包（每个包使用不同的anti-HCP抗体），通过比较选取zui适检测试剂盒检测HCP，增加了HCP检出的特异性和灵敏度。因此可zui大限度的减少了anti-HCP抗体不能完全检测终产品中HCP的可能性。而传统的HCP检测只是使用一个抗体进行检测，因此增加了部分HCP不能检出的可能性。

BioGenes产品说明书：

1、CHO|360-HCP ELISA

CHO|360-HCP ELISA是为中国仓鼠卵巢细胞（CHO）作为宿主细胞的生物制品进行HCP检测的试剂盒，拥有高度特异性和灵敏度，覆盖率更多的CHO蛋白谱。

通过用模拟转染CHO-K1和 CHO-S细胞的HCP免疫家兔或山羊，然后结合BioGenes公司独特的抗原和抗体制备技术（优化的蛋白纯化技术）得到HCP多克隆抗体。使用事先准备好的不同抗原（总HCP或分级HCP）每个分级HCP分别用于免疫动物，因而得到四个不同HCP ELISA检测试剂盒(A到D)，这四个试剂盒共同组成360 - HCPHCP ELISA检测体系。

HCP超级检出率：

CHO|360-HCP ELISA试剂盒经大量的模拟CHO-HCP样本检测测试。在大多数情况下可以从四个检测试剂盒中找出zui优的HCP检出率的试剂盒。如上图样本4可以看出，D型试剂盒可以检出大于90%的HCP，比ABC三种类型更为适用于该样本，而普通商业化的检测试剂盒只能检出约20%的HCP。

更高的检测特异性：

LOD：0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ ：2 – 3 ng/mL

检出范围：2 – 100 ng/mL

2、E.coli|360-HCP ELISA

E.coli |360-HCP ELISA是为大肠杆菌（E.coli）作为宿主细胞的生物制品进行HCP检测的试剂盒，拥有高度特异性和灵敏度，覆盖率更多的E.coli蛋白谱。

E.coli|360-HCP Assay试剂盒是利用在不同培养基和培养条件下发酵的W3110和BL21(DE3) 细胞株产生四种具有不同HCP蛋白谱的抗原。然后用这四种抗原免疫山羊得到四种不同的HCP ELISAs试剂盒(A到D)，四者共同构成E.coli|360-HCP Assay 检测体系。可通过考马斯染色E.coli的 HCP和不同抗体的2D western blotting 检测确定zui高特异性的试剂盒。

HCP超级检出率：

E.coli |360-HCP ELISA试剂盒经大量的模拟大肠杆菌-HCP样本检测测试。如上图可以看出，可以看出，B型试剂盒可以检出样本1中大于 80%的HCP，A型试剂盒是样本2和3的zui优检测试剂盒，而样本5的zui优检测试剂盒是D型试剂盒。

更高的检测特异性：

LOD：0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ ：2 – 3 ng/mL

检出范围：2 – 100 ng/mL

3、zui佳试剂盒选择的方法：

如实验中选取中国仓鼠卵巢细胞（CHO）作为宿主细胞，则选择CHO|360-HCP ELISA试剂盒进行HCP检测；如实验中选取大肠杆菌（E.coli）作为宿主细胞，则选择E.coli |360-HCP ELISA试剂盒进行HCP检测。然后根据以下方法对具体的试剂盒型号进行选择。

（1）预实验选取法：

该方法是采用The 360-HCP ELISAs Starter Set包（内含A-D型四种不同的检测试剂盒），通过预实验选取zui适试剂盒类型进行后续实验。实验流程如下图：

（2）BioGenes公司鉴定服务推荐法

除上述客户自行确定zui优试剂盒法外，BioGenes还提供试剂盒性能试验并推荐zui优试剂盒的服务。

方法1：

360-HCP ELISA kits (typeA to D)检测含HCP样本，流程为:

（1）客户提供4-8个不同纯化阶段的样本；

（2）两次重复实验进行确定；

（3）每个样品多达4个稀释倍数；

（4）BioGenes推荐一个zui优的ELISA检测试剂盒类型，同时附一个简短的推荐报告。

方法2：

2-D蛋白印记分析模拟的HCP：2-D蛋白印记分析可以获得抗HCP抗体对存在于宿主细胞株中全部HCP的范围评估信息，以获取确信的zui适抗体类型和水平，流程为:

（1）2-D 分离和考马斯蓝银染色和银染；

（2）使用不同抗体稀释度进行免疫印迹；

（3）完成包括蛋白范围的报告；

（4）推荐zui适ELISA检测试剂盒类型，同时附一个简短的推荐报告。