PCRMasterMix说明书
索莱宝公司生产的PCRMasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taqplus),每种酶对应着两种PCRMasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCRMasterMix。
Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。
Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。
TaqPlus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。 含染料PCRMasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCRMasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。
货号: | 名称: | 规格: |
PC1120 | 2×TaqPCRMasterMix(含染料) | 1ml/1ml×5 |
PC1150 | 2×TaqPCRMasterMix(不含染料) | 1ml/1ml×5 |
PC1320 | 2×PfuPCRMasterMix(含染料) | 1ml/1ml×5 |
PC1350 | 2×PfuPCRMasterMix(不含染料) | 1ml/1ml×5 |
PC1220 | 2×TaqPlusMasterMix(含染料) | 1ml/1ml×5 |
PC1250 | 2×TaqPlusMasterMix(不含染料) | 1ml/1ml×5 |
保存:-20℃保存,有效期12个月,4℃短期保存一周,避免反复冻融。产品简介:索莱宝公司生产的PCRMasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taqplus),每种酶对应着两种PCRMasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCRMasterMix。Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。TaqPlus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。含染料PCRMasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCRMasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。产品组成(2×):20mMTris-HCl(pH8.3)100mMKCl3mMMgCl2500uMdNTPeach0.1UPolymerase/ulddH2O其它稳定剂和增强剂应用举例:1、按下面配制50ulPCR反应体系
Template | <1ug |
Primer1(10uM) | 2ul |
Primer2(10uM) | 2ul |
2×MasterMix | 25ul |
ddH2O | upto50ul |
2、PCR反应循环设置
94℃ | 3min |
94℃ | 30sec(30cycles) |
55℃ | 30sec(30cycles) |
72℃ | 500-2000bp/1min(30cycles) |
72℃ | 5min |
3、结果检测:反应结束后,取5ul反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。