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| Artikelnummer | MISOT-010 |
|---|---|
| Artikelgruppe | Streifentests |
| Artikelbezeichnung | Iso-Gold Streifentest zur Maus-Monoklonal-Isotyp-Bestimmung |
| Spezies-Reaktivität | Maus |
| Testprinzip | Rapid Lateral Flow |
| Nachweisgrenze | 10 ng/ml |
| Zeit/Protokoll | 5 min |
| Zweckbestimmung | nur für Forschungszwecke |
| Packungsgröße | 10 Tests |
| Hersteller / Marke | BioAssay Works |
- MISOT-010 – Datenblatt
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该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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江苏斯坦福生物技术有限公司在发布的人诱导多功能干细胞形成试剂盒供应信息，浏览与人诱导多功能干细胞形成试剂盒相关的产品或在搜索更多与人诱导多功能干细胞形成试剂盒相关的内容。 查看更多
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2017-11-24
提供商：嘉美实验 查看更多
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2021-07-16
简介： 【HEL-2细胞】，细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师们提供放心科研细胞。具体详情请致电咨询。详细说明： 【HEL-2细胞】产品特点：细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师 查看更多
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2021-09-12
上海锐赛生物技术有限公司在发布的稳转株构建供应信息，浏览与稳转株构建相关的产品或在搜索更多与稳转株构建相关的内容。 查看更多
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2021-09-21
★服务描述 shRNA稳转株是指能持续稳定表达干扰特定基因shRNA的细胞。RNA干扰是基因功能研究中最常用的手段之一。我公司利用慢病毒将shRNA序列整合入细胞基因组，并通过慢病毒载体携带的抗性基因（通常为新霉素，嘌呤霉素，潮霉素）筛选出稳定转染shRNA的细胞，使其成为shRNA稳定转染细胞系。★服务内容 1：shRNA干扰靶点序列的设计； 2：shRNA 慢病毒质粒的构建； 3：shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定； 4... 查看更多
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2018-12-26
Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neuronsSolutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution - pdf DM/KY - pdf Optimem - pdf 查看更多
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2018-04-03
上海博谷生物科技有限公司在发布的MIN6 细胞株供应信息，浏览与MIN6 细胞株相关的产品或在搜索更多与MIN6 细胞株相关的内容。 查看更多
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2021-07-21
4 月 8 日，内蒙古首例医疗事故罪案在包头市中级人民法院开庭审理，此案再一次引起网友热议。2013 年，一 3 岁男童因重症细菌性肺炎并发感染性休克，加之镇静药物的不当使用致肝脏、大脑等多器官功能损坏和衰竭死亡。村卫生室医生潘耀平被认定为承担主要责任，2014 年 9 月 19 日，检察院以医疗事故罪严重不负责任对潘耀平医生批准逮捕并提起公诉。潘耀平一审被判处有 查看更多
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2018-07-16
关键词：ASHS3 ASHS3细胞 细胞株产品简介：我公司主要经营ELISA试剂盒、细胞、抗体、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、其产品吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高，代做ELISA实验,全国范围内免费快递运输，如出现运输质量问题，我们可以包退换货。请放心购买产品详情：ASHS3 ASHS3细胞 细胞株规格：96T/48T保存条件：2-8℃厂商：上海通善生物科技用 途：用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中人28S抗核糖体 查看更多
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2017-10-16
#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞是由北京裕恒丰科技有限公司代理或销售的ScienCell品牌的试剂，产品来源于美国ScienCell。北京裕恒丰科技有限公司是中国最权威的#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞试剂销售服务商之一，在北京丰台区等地方销售#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的#2630人牙周膜成纤维细 查看更多
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2018-07-16
关键词：2G9B9H6A2 2G9B9H6A2细胞 细胞株产品简介：我公司主要经营ELISA试剂盒、细胞、抗体、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、其产品吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高，代做ELISA实验,全国范围内免费快递运输，如出现运输质量问题，我们可以包退换货。请放心购买产品详情：2G9B9H6A2 2G9B9H6A2细胞 细胞株规格：96T/48T保存条件：2-8℃厂商：上海通善生物科技用 途：用于定量检测血清、血浆 查看更多
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2019-03-06
在无菌条件下培养小鼠原代细胞 查看更多
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【求助】逆转录病毒载体不带GFP,如何进行构建稳转细胞株?谢谢 ...123
drjasionzl2012-12-11
化验单英文缩写 123
meng83182017-10-02
1：白细胞计数（WBC）（参考值：4~10），（单位：10^9/L）
2：红细胞计数（RBC）（参考值：3.5~5.5），（单位：10^12/L）
3：血红蛋白浓度（HB）（参考值：120~160），（单位：g/L）
4：红细胞压积（HCT）（参考值：40~48），（单位：%）
5：平均红细胞体积（MCV）（参考值：80~97），（单位：fL）
6：平均红细胞血红蛋白含量（MCH）（参考值：26.5~33.5），（单位：pg）
7：平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）（参考值：300~360），（单位：g/L）
8：血小板计数（PLT）（参考值：100~300），（单位：10^9/L）
9：淋巴细胞比值（LY%）（参考值：17~48），（单位：%）
10：单核细胞比例（MONO%）（参考值：4-10），（单位：%）
11：中性粒细胞比例（NEUT%）（参考值：43~76），（单位：%）
12：淋巴细胞计数（LY）（参考值：0.8~4.0），（单位： 10^9/L）
13：单核细胞计数（MONO）（参考值：0.3~0.8），（单位：10^9/L）
14：中性粒细胞计数（NEUT）（参考值：1.2~6.8），（单位：10^9/L）
15：红细胞分布宽度（参考值：11~14.5），（单位：%）
16：血小板体积分布宽度（PDW）（参考值：9~18），（单位：%）
17：平均血小板体积（MPV）（参考值：7．4~12．5），（单位：fL）
18：大血小板比例（P-LCR）（参考值：10~50），（单位：%）
2：红细胞计数（RBC）（参考值：3.5~5.5），（单位：10^12/L）
3：血红蛋白浓度（HB）（参考值：120~160），（单位：g/L）
4：红细胞压积（HCT）（参考值：40~48），（单位：%）
5：平均红细胞体积（MCV）（参考值：80~97），（单位：fL）
6：平均红细胞血红蛋白含量（MCH）（参考值：26.5~33.5），（单位：pg）
7：平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）（参考值：300~360），（单位：g/L）
8：血小板计数（PLT）（参考值：100~300），（单位：10^9/L）
9：淋巴细胞比值（LY%）（参考值：17~48），（单位：%）
10：单核细胞比例（MONO%）（参考值：4-10），（单位：%）
11：中性粒细胞比例（NEUT%）（参考值：43~76），（单位：%）
12：淋巴细胞计数（LY）（参考值：0.8~4.0），（单位： 10^9/L）
13：单核细胞计数（MONO）（参考值：0.3~0.8），（单位：10^9/L）
14：中性粒细胞计数（NEUT）（参考值：1.2~6.8），（单位：10^9/L）
15：红细胞分布宽度（参考值：11~14.5），（单位：%）
16：血小板体积分布宽度（PDW）（参考值：9~18），（单位：%）
17：平均血小板体积（MPV）（参考值：7．4~12．5），（单位：fL）
18：大血小板比例（P-LCR）（参考值：10~50），（单位：%）
干细胞的分类有哪些?123
2017-09-30
干细胞的分类：
（一）按功能分类
1、全能干细胞，由卵子和精子的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中八细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。具有形成完整个体的分化潜能，如胚胎干细胞，受精卵就是最高层次的胚胎干细胞。
2、多功能干细胞，一种或多种组织的起源细胞，它能分化出多种类型细胞，是全能干细胞的后裔，但不可能分化出足以构成完整个体的所有细胞。具有分化出多种细胞组织的潜能，如造血干细胞、神经细胞。
3、多潜能干细胞，只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞。
4、专一性干细胞，只能产生一种细胞类型；但是，具有自更新属性，将其与非干细胞区分开。只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化，如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的成肌细胞。
（二）按发育过程出现先后和分布分类
1、胚胎干细胞(Embryonic stem cell)：在胚胎发育早期的囊胚中，可发育为不同的细胞，是所有细胞最初期的形态。
ES细胞是一种高度未分化细胞，它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞；研究和利用ES细胞是生物工程领域的核心问题之一；在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。
2、成体干细胞(Adult stem cell)：亦称成人干细胞，医学上常用的大致包括骨髓干细胞、脐带血干细胞及周边血干细胞。它们存在成体特定的组织中，具有由干原细胞形成先驱细胞，分化成具特定功能细胞的能力。例如：骨髓干细胞、造血干细胞、神经干细胞。
干细胞（英语：Stem cell）是原始且未特化的细胞，它是未充分分化、具有再生各种组织器官的潜在功能。干细胞存在所有多细胞组织里，能经由有丝分裂与分化来分裂成多种的特化细胞，而且可以利用自我更新来提供更多干细胞。对哺乳动物来说，干细胞分为两大类：胚胎干细胞与成体干细胞，胚胎干细胞取自囊胚里的内细胞团；而成体干细胞则来自各式各样的组织。在成体组织里，干细胞与先驱细胞担任身体的修复系统，补充成体组织。在胚胎发展阶段，干细胞能分化为任何特化细胞，但仍会维持新生组织 (像是血液、皮肤或肠组织) 的正常转移。
干细胞的应用：
（一）基础应用
干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。
1、内源性调控
干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。
（1）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控。
（2）转录因子的调控。
2、外源性调控
除内源性调控外，干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响。
（1）分泌因子间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。
（2）膜蛋白介导的细胞间的相互作用。
（3）整合素（Integrin）与细胞外基质。
（二）科研应用
1、器官修补更新；
2、人造器官与组织的来源；
3、新药开发；
4、基因功能研究；
5、基因治疗的工具；
6、毒理、药理研究；
7、癌症研究。
（三）医疗运用
干细胞移植治疗技术，被誉为人类有史以来的飞跃式医疗手段，实现人体各个器官修复和更新。
主要治疗项目：
1、器官修复：干细胞能在短时间内修复各种器官组织，为各类疾病提供非常有效的治疗效果。
2、肿瘤：把成人神经干细胞注射到老鼠大脑中的研究可以神奇地成功治疗肿瘤。由于脑癌的扩散迅速，运用传统的技术几乎不可能治愈。哈佛医学院的研究人员注射了由基因工程得到的成人干细胞，用以把另外注射的无毒性物质转化成抗癌剂。几天之内，成人干细胞迁移到癌变区域，注射物可以减少百分之八十的肿块。
3、骨骼：骨髓间充质干细胞是具有自我更新能力并可以分化成为成骨细胞的一种干细胞。多项基于动物骨髓的研究和一些初步的临床数据显示了它们在重建骨骼方面的贡献。在整形外科方面，一些由创伤引起的，由癌症引起的或感染引起的骨细胞的损失，如进行手术弥补人造关节会引起一些不便，而进行干细胞的自体移植正可以解决这方面的问题。
4、脱发：毛发囊泡也具有干细胞。治疗可能可以简单地向毛囊干细胞发出信号从而向附近那些因年长而萎缩的毛囊细胞发出化学信号，使它们轮流再生制造健康的头发。
5、治疗不孕：研究人员发现从成年女性身上获取的干细胞在实验室中可以自发生成新的卵子。在小鼠身上进行的实验显示这些卵子可以进一步发育。
6、糖尿病：干细胞移植可用于治疗糖尿病的。干细胞治疗糖尿病是在血液内提取相应干细胞体外分离、纯化、扩增后经静脉注射或介入等方式输入到患者体内，在胰腺组织微环境的诱导下分化增殖为胰岛样细胞并分泌胰岛素，促进受损胰岛组织细胞的再生、修复，从而达到功能重建的目的，起到治疗糖尿病的作用。
（一）按功能分类
1、全能干细胞，由卵子和精子的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中八细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。具有形成完整个体的分化潜能，如胚胎干细胞，受精卵就是最高层次的胚胎干细胞。
2、多功能干细胞，一种或多种组织的起源细胞，它能分化出多种类型细胞，是全能干细胞的后裔，但不可能分化出足以构成完整个体的所有细胞。具有分化出多种细胞组织的潜能，如造血干细胞、神经细胞。
3、多潜能干细胞，只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞。
4、专一性干细胞，只能产生一种细胞类型；但是，具有自更新属性，将其与非干细胞区分开。只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化，如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的成肌细胞。
（二）按发育过程出现先后和分布分类
1、胚胎干细胞(Embryonic stem cell)：在胚胎发育早期的囊胚中，可发育为不同的细胞，是所有细胞最初期的形态。
ES细胞是一种高度未分化细胞，它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞；研究和利用ES细胞是生物工程领域的核心问题之一；在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。
2、成体干细胞(Adult stem cell)：亦称成人干细胞，医学上常用的大致包括骨髓干细胞、脐带血干细胞及周边血干细胞。它们存在成体特定的组织中，具有由干原细胞形成先驱细胞，分化成具特定功能细胞的能力。例如：骨髓干细胞、造血干细胞、神经干细胞。
干细胞（英语：Stem cell）是原始且未特化的细胞，它是未充分分化、具有再生各种组织器官的潜在功能。干细胞存在所有多细胞组织里，能经由有丝分裂与分化来分裂成多种的特化细胞，而且可以利用自我更新来提供更多干细胞。对哺乳动物来说，干细胞分为两大类：胚胎干细胞与成体干细胞，胚胎干细胞取自囊胚里的内细胞团；而成体干细胞则来自各式各样的组织。在成体组织里，干细胞与先驱细胞担任身体的修复系统，补充成体组织。在胚胎发展阶段，干细胞能分化为任何特化细胞，但仍会维持新生组织 (像是血液、皮肤或肠组织) 的正常转移。
干细胞的应用：
（一）基础应用
干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。
1、内源性调控
干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。
（1）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控。
（2）转录因子的调控。
2、外源性调控
除内源性调控外，干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响。
（1）分泌因子间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。
（2）膜蛋白介导的细胞间的相互作用。
（3）整合素（Integrin）与细胞外基质。
（二）科研应用
1、器官修补更新；
2、人造器官与组织的来源；
3、新药开发；
4、基因功能研究；
5、基因治疗的工具；
6、毒理、药理研究；
7、癌症研究。
（三）医疗运用
干细胞移植治疗技术，被誉为人类有史以来的飞跃式医疗手段，实现人体各个器官修复和更新。
主要治疗项目：
1、器官修复：干细胞能在短时间内修复各种器官组织，为各类疾病提供非常有效的治疗效果。
2、肿瘤：把成人神经干细胞注射到老鼠大脑中的研究可以神奇地成功治疗肿瘤。由于脑癌的扩散迅速，运用传统的技术几乎不可能治愈。哈佛医学院的研究人员注射了由基因工程得到的成人干细胞，用以把另外注射的无毒性物质转化成抗癌剂。几天之内，成人干细胞迁移到癌变区域，注射物可以减少百分之八十的肿块。
3、骨骼：骨髓间充质干细胞是具有自我更新能力并可以分化成为成骨细胞的一种干细胞。多项基于动物骨髓的研究和一些初步的临床数据显示了它们在重建骨骼方面的贡献。在整形外科方面，一些由创伤引起的，由癌症引起的或感染引起的骨细胞的损失，如进行手术弥补人造关节会引起一些不便，而进行干细胞的自体移植正可以解决这方面的问题。
4、脱发：毛发囊泡也具有干细胞。治疗可能可以简单地向毛囊干细胞发出信号从而向附近那些因年长而萎缩的毛囊细胞发出化学信号，使它们轮流再生制造健康的头发。
5、治疗不孕：研究人员发现从成年女性身上获取的干细胞在实验室中可以自发生成新的卵子。在小鼠身上进行的实验显示这些卵子可以进一步发育。
6、糖尿病：干细胞移植可用于治疗糖尿病的。干细胞治疗糖尿病是在血液内提取相应干细胞体外分离、纯化、扩增后经静脉注射或介入等方式输入到患者体内，在胰腺组织微环境的诱导下分化增殖为胰岛样细胞并分泌胰岛素，促进受损胰岛组织细胞的再生、修复，从而达到功能重建的目的，起到治疗糖尿病的作用。
肿瘤干细胞培养液可以加双抗么? 细胞技术讨论版论坛123
dxy_h2lc4whq2017-07-02
瑞思坦生物_干细胞科研_细胞治疗_干细胞存储123
右半边翅膀y2017-08-20
目前国际国内做的比较好的间充质干细胞和神经干细胞公司有哪些呢？请各位大神赐教…
脐带间充质干细胞可以直接从干细胞公司买来自己移植吗123
BSHT_4562017-08-20
求助啊!关于原代HUVECs,急啊! ips专区干细胞之家 中国干细胞...123
barren12021-08-05
需要培养小鼠枯否细胞，求推荐几家公司，及收费标准，急！！！
血常规报告显示结果,说明什么?_有问必答_123
kiss71210312017-10-06
血常规分三大部分，
你的第一部分，白细胞和中性粒细胞偏低，说明免疫力低，最近要多保养，不受凉，近期容易生病。不过数据也不是太低的，也不用过于担心，多吃多睡，过一段时间复查，可能会好转为正常。另外消炎药，止痛，退热药尽量不吃，这些药会加重白细胞下降的。
第二部分，最主要的红细胞和血红蛋白是正常的，总体看还是正常的。但是下面数据有点低，而且只低一点，问题不大，多吃点米饭，红枣，肉等，会好转的。
第三部分，血小板部分是正常的。
你这种检查单，最主要的是免疫力低下，注意多吃多睡，别受凉，少烦神少劳累，引起白细胞低的药物尽量不吃。
你的第一部分，白细胞和中性粒细胞偏低，说明免疫力低，最近要多保养，不受凉，近期容易生病。不过数据也不是太低的，也不用过于担心，多吃多睡，过一段时间复查，可能会好转为正常。另外消炎药，止痛，退热药尽量不吃，这些药会加重白细胞下降的。
第二部分，最主要的红细胞和血红蛋白是正常的，总体看还是正常的。但是下面数据有点低，而且只低一点，问题不大，多吃点米饭，红枣，肉等，会好转的。
第三部分，血小板部分是正常的。
你这种检查单，最主要的是免疫力低下，注意多吃多睡，别受凉，少烦神少劳累，引起白细胞低的药物尽量不吃。
【讨论】中药的水煎法与醇沉淀法提取中药有效成份是如何操作的? 123
lixiaoyou2010-11-14
请问肺癌细胞HCC827怎样吹打才能完全吹打开？谢谢！
干细胞的特征是什么?_39健康问答_123
奶茶kx2弴2017-09-30
干细胞有以下特点：
1. 干细胞本身不是终末分化细胞(即干细胞不是处于分化途径的终端)；
2. 干细胞能无限增殖分裂；
3. 干细胞可连续分裂几代，也可在较长时间内处于静止状态；
4. 干细胞分裂产生的于细胞只能在两种途径中迭择其一或保持亲代特征，仍作为干细胞；或不可逆地向终末分化。
由
于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配，使得一个子细胞不可逆地走向分化的终端成为功能专一的分化细胞；另一个保持亲代的特征，仍作为干细胞保留下来。分
化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数的控制，可以说，干细胞是具多向潜能和自我更新特点的增殖速度较缓慢的细胞
1. 干细胞本身不是终末分化细胞(即干细胞不是处于分化途径的终端)；
2. 干细胞能无限增殖分裂；
3. 干细胞可连续分裂几代，也可在较长时间内处于静止状态；
4. 干细胞分裂产生的于细胞只能在两种途径中迭择其一或保持亲代特征，仍作为干细胞；或不可逆地向终末分化。
由
于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配，使得一个子细胞不可逆地走向分化的终端成为功能专一的分化细胞；另一个保持亲代的特征，仍作为干细胞保留下来。分
化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数的控制，可以说，干细胞是具多向潜能和自我更新特点的增殖速度较缓慢的细胞
仲元中学吧仲元哥哥的学生们的天地123
tb_qatest012017-10-02
所谓生物工程，一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础，结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术，充分运用分子生物学的最新成就，自觉地操纵遗传物质，定向地改造生物或其功能，短期内创造出具有超 远缘性状的新物种，再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养，以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术生物工程包括五大工程，即遗传工程(基因工程)、细胞工程、微生物工程(发酵工程)、酶工程(生化工程)和生物反应器工程。在这五大领域中，前两者作用是将常规菌(或动植物细胞株)作为特定遗传物质受体，使它们获得外来基因，成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”。后三者的作用则是这一有巨大潜在价值的新物种创造良好的生长与繁殖条件，进行大规模的培养，以充分发挥其内在潜力，为人们提供巨大的经济效益 和社会效益。
生物工程的应用领域非常广泛，包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响，为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
生物工程的应用领域非常广泛，包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响，为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
【求助】肿瘤组织原代培养消化后研磨出现一大堆粘液而细胞极少是怎么...123
那孩子11NJ2017-10-06
原代培养心肌细胞作为一种主要的研究模型，被广泛应用于心血管研究之中.我们实验室经过长期尝试，摸索出了一些行之有效的方法，并积累了一些经验，现总结如下：
1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力.因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长.大量观测表明，选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.
2消化酶的选择及使用
新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法，前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种：胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小，且在新生大鼠心肌组织，以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足，细胞聚集成团，无法分清细胞边界，难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散，使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时，应停止消化.
4接种的细胞密度
心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触，进而影响细胞对肥大刺激的反应，而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言，应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如，如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测，则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力.因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长.大量观测表明，选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.
2消化酶的选择及使用
新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法，前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种：胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小，且在新生大鼠心肌组织，以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足，细胞聚集成团，无法分清细胞边界，难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散，使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时，应停止消化.
4接种的细胞密度
心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触，进而影响细胞对肥大刺激的反应，而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言，应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如，如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测，则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
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