
适用于一般细胞,肿瘤细胞,部分干细胞等。◆如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?血清解冻时应将血清从-15~-70℃的低温冰箱中取出放入4℃冰箱解冻1天,待全部解冻后再分装。解冻过程中请不时摇匀(小心勿造成气泡),使血清成分和温度均匀,从而减少沉淀的产生。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻,并避免反复冻融。需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在 37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。◆有时在血清中见到的絮状沉淀可能是些什么物质?主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用400 xg离心5 min去除,也可不用处理。◆如何避免血清中产生沉淀?(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。(5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。◆在使用前是否需要对血清进行过滤?一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。◆自然溶化好的胎牛血清放在室温下一晚还能用吗?室温不可以,建议4℃保存。◆加到培养基中的血清必须灭活吗?不是必须的,看做什么实验。如果用于培养普通细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。◆热灭活对血清的作用是什么?热灭活步骤能够灭活补体系统。补体会参与以下事件中:溶解细胞事件,平滑肌收缩,肥大细胞与血小板释放组胺,吞噬作用增强,趋化作用,淋巴细胞与巨噬细胞的活化等。◆细胞培养 中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:(1)细胞生长过老,破碎的细胞残骸;(2)血清质量不好,反复冻融的结果;(3)配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;(5)培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。◆细胞培养中如何防止黑点生成?(1) 尽可能地减少血清冻融次数。(2) 培养基无需37℃水浴。(3) 培养基保持最佳PH值7.0- 7.2。(4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。(5) 掌握细胞传代的最佳时机,细胞切勿生长过老。
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我做的是细胞因子的刺激和抑制某条通路后观察是否有影响,分组为空白组,空白+抑制剂,刺激组,刺激+抑制剂,最开始用的单因素方差分析,LSD-T和SNK-Q检验,但是同学说我这里面有两个处理因素,所以不能单因素方差分析,应该直接空白和空白+抑制,空白和刺激,刺激和刺激+抑制剂进行独立样本T检验,现在脑子是混乱的,拜托园子里的大神们帮我看看,感激不尽!!
适应症下会标注“本品适用于敏感菌所致......”字样;
药理作用下会标注“本品属......类抗菌素”字样。
关于一般所说的血清,在这大约要先分清楚什么叫血清,什么叫单抗治疗剂(在大陆医院及一般人也叫血清)
血清,如果正常而言是从病患犬只身上抽取血液而提炼制成的一种抗体,例如从一只患有犬瘟的患犬经过长期治疗痊愈后,将他的血液抽取出来,经过粹取提炼,而这种提炼出来的血清(免疫抗体),是有治疗加预防犬瘟的效果,同样包括其它另5种致命性病毒如细小肠炎,犬勾螺旋病毒,犬肝炎,犬黄胆等也同样是这样提炼,但是患犬经过治疗痊愈性低而且提炼血清需要大量的血液才能提炼(例如500ml的血液才经过筛检提炼为2.8ml的血清,而一只患犬需要注射治疗预防是需要2.5mlX5剂,试问这种高消耗经济成本时间的脆取提炼法,谁愿意去做)
因此早期国外会将犬只的各种致命性病毒,注射入牛,马,羊,猪等足蹄类动物身体内,再藉由这些动物的血液来脆取提炼犬病毒血清(这些病毒会在这些足蹄类动物身上起一些作用,但却不会致命!而这些动物的血液也够多够充沛来做提炼),经过多年试验中以羊只的血液提炼血清是比较有效果的!
而目前大陆中也是采用相同的方式提炼血清,但是实验对象包括牛马猪羊等足蹄动物,而再粹取血清的过程除了提炼过程严谨也要有相当的保存过程,这两者只要有一个环节有不当,提炼出的血清就会产生极大的不稳定性甚至于无效!!!
这也就是我们常说血清的由来,因为粹取对像非犬只类,加上或许运送或保存或粹取过程(这都是我们无法见到及预期的可変因素)因此血清的作用几乎就大打折扣了,一般使用血清是用于幼中期犬集体长途运输,或是对于一些大犬只因某些原因不能注射疫苗而又需要加强自身免疫时就需要注射(血清是属于一种短暂时提升免疫体的做法),而真正正本清源,是等小狗或大狗身体健康时,注射2-3剂疫苗来确定自身免疫预防!!
也就是说,很多医生或宠物店会因为不完全了解小狗自身情况如何之前,会给狗狗注射血清,希望提高狗狗的免疫抗体,而等狗狗身体和情绪稳定,再开始接种疫苗,但是,前文中也提过,有太多不可预期性会发生,如小狗太早断奶或母乳不足,血清自身因保存或运输不当!这些太多不确定因素造成血清无效外,更容易害了犬只!!
过来我们谈单抗治疗剂,这种疗剂我们称为单抗疫苗(根据犬只患病不同而施以不同的单病毒对抗疗剂,例如犬瘟单抗,细小单抗),这是属于人工合成的活化菌体,其实也很像疫苗指是因为合成为比疫苗更微弱毒性,它是需要一连施打4-5剂,才有作用的针剂,它的作用我大约解释一下,这种抗体是经过人工更弱化的病毒,而注入患犬体内是激发狗狗自身免疫力对这种病毒进行适应力而加以消灭,因此需要施打五剂,等狗狗自身免疫被激发对这种病毒产生抵抗力(排斥性),
狗自生免疫系统就会针对侵入的单种病毒进行围剿消灭,而等自身免疫力能消灭侵入病毒后,狗的身体内这单种病毒病也就会痊愈(当然这只是针对单一种病毒而言,而患病犬只通常并发并非单一种病症,因此要确实诊断使用支持对症诊疗法举个例,如犬瘟并发呼吸道葡萄球链菌引发流鼻涕咳嗽症状,既使犬瘟病毒被消灭但是葡萄球链菌并不会因犬瘟病毒被消灭而停止作怪,医生还是要针对葡萄链球菌作抗生素注射治疗),而痊愈后的狗,自生免疫力会对单一病毒产生终生排斥作用,例如犬只经过细小治愈后,这只狗终身对细小病毒免疫,既使给狗只注射六联疫苗,疫苗内的弱化细小病毒一样被狗狗自身免疫力排斥消灭,而其它五种疫苗却会再犬只身上起作用(既使得犬瘟医治好的狗能终生预防犬瘟,也同样要打疫苗,因为致命性病毒不是只有犬瘟一种,除非你加狗狗天生利害能六种病都得到而又都医治好!这种可能性太低也千万保佑别这么做狗狗和饲主都太辛苦)!
这也就是为什么患病犬只到医院被确诊为细小或犬瘟时,医生又要打血清的原因(其实是单抗),当然单抗不是万灵丹,它只是加强犬只自身激发免疫的一种催化剂,若是犬只本身体质虚弱或是病毒已经大面积侵犯犬只器官,这些治疗方式都只是一种尽人事听天命的方法了!!!
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