【求助】乳腺癌细胞株SKBR3细胞的冻存方法
2021-08-01
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hudingrong
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今天听同学说冻存液不能现配现用,因为DMSO和FBS加在一起要产热。不知是不是这样子?我复苏后培养液中有很多颗粒,因为都漂浮着,我也没分清楚这种颗粒似的东西自己会不会动,反正只有极少极少细胞贴壁,大多数没多久自己就碎了。这种颗粒通过换液就可以减少到几乎没有,所以我觉得不像是污染。怎么都没人回帖呢?是我说得不够清楚,还是真的很少人养过这株细胞?急切盼望您的指导,谢谢!
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forest22939
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血清9:DMSO1,最简单的冻存方法,但是要温度逐渐降低。
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hudingrong
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我们实验室达不到这种要求。只能4度—-20度—-80度。
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cindyr0625
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hudingrong我们实验室达不到这种要求。只能4度—-20度—-80度。这样冻应该也没问题,原来我们也这么冻过,没问题的,不过我们-80度后放入液氮中。如果复苏没有活细胞,再排除了复苏方法错误后,要看看当时冻存时细胞状态怎么样,有些细胞在冻存时状态已经不好了,这样复苏的存活率必然很低
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hudingrong
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细胞冻存时状态很好。不过我后来用冻细胞剩的一点DMSO做MTT,结果不行,加进去后没变色。但是DMSO那种难闻的味道还是没变。不知道有没有可能是DMSO的影响。我是避光常温保存的。
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