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原代细胞培养

2021-08-02

问题描述：

我目前培养大鼠原代食管上皮细胞，虽然已经分离出来（细胞量很少），但是后期细胞不增殖，3-4天细胞就死掉了。
我用的培养是基础培养基添加一些细胞因子。
请问是培养基的问题，还是操作的问题？
如果是培养基的问题，应该添加哪些细胞因子，或者购买哪个牌子的培养基？
在线等，急！！！

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longshao2014

用户

自己顶！d=====(￣▽￣*)b

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飞凡细胞

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这是我自己分离的原代小鼠食管，没有养过大鼠的，培养基用的PECBM培养基

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longshao2014

用户

展开引用飞凡细胞这是我自己分离的原代小鼠食管，没有养过大鼠的，培养基用的PECBM培养基......是哪个公司的培养基，可以把这个公司告诉我吗？

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verajiao517

用户

我也是养原代的，最近看了一篇文献，专门讲原代持续传代的，要发你看看不？

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longshao2014

用户

verajiao517我也是养原代的，最近看了一篇文献，专门讲原代持续传代的，要发你看看不？效果怎么样

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sjfujian

用户

这不是挺好的，典型铺路石状上皮细胞，你是传代之后死么？试试降低消化液浓度，0.05%。另这样就可以传了不用等长满。

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longshao2014

用户

sjfujian这不是挺好的，典型铺路石状上皮细胞，你是传代之后死么？试试降低消化液浓度，0.05%。另这样就可以传了不用等长满。还没传代就挂掉了，很郁闷

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verajiao517

用户

如果是原代持续传代，那么这篇文章应该是殿堂级的！！待我找出来发你

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李峰lifeng

用户

用5cm*5cm培养瓶培养，换液前把培养基加热一下，试试

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公主的天堂

用户

同样新手一枚，觉得可以找下论文，和自己同样的细胞培养，看看它的培养基或者具体情况

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木子华

用户

不如发出链接来大家都分享一下呗

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bishuilinger000

用户

添加血清会不会促进细胞生长？

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longshao2014

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公主的天堂同样新手一枚，觉得可以找下论文，和自己同样的细胞培养，看看它的培养基或者具体情况你做什么原代？

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longshao2014

用户

bishuilinger000添加血清会不会促进细胞生长？有少量血清的

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飞凡细胞

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我们用的是深圳市永生原代细胞生物科技有限公司的培养基

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风行强强

用户

sjfujian这不是挺好的，典型铺路石状上皮细胞，你是传代之后死么？试试降低消化液浓度，0.05%。另这样就可以传了不用等长满。同意楼上建议。最近用了一款浓度更低的胰酶，浓度是0.025%，效果佳，推荐给楼主。

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风行强强

用户

verajiao517我也是养原代的，最近看了一篇文献，专门讲原代持续传代的，要发你看看不？楼上好！这么好的文章，请问题目是什么呢？谢谢！

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sjfujian

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风行强强？

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风行强强

用户

sjfujian？哈哈，推荐给楼主滴

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verajiao517

用户

忘发了……论文：UseofReprogrammedCellstoIdentifyTherapyforRespiratoryPapillomatosis这个是前两年发在新英格兰的影响因子50+不是盖的，还有这个是今年发的natureprotocol：Conditionalreprogrammingandlong-termexpansionofnormalandtumorcellsfromhumanbiospecimens。我一直做原代就看这个团队发的文章

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longshao2014

用户

展开引用verajiao517忘发了……论文：UseofReprogrammedCellstoIdentifyTherapyforRespiratoryPapillomatosis这个是前两年发在新英格兰的影响因子50+不是盖的，还有这个是今年发的natureprotocol：Conditionalreprogrammingandlong-termexpansionofnormalandtumorcellsfromhumanbiospecimens。我一直做原代就看这个团队发的文章......已经下载到，但是她们所用的实验试剂，只有在美国有卖吗？中国有卖的吗？

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longshao2014

用户

飞凡细胞我们用的是深圳市永生原代细胞生物科技有限公司的培养基效果这么好！可以买到现货吗？可以传几代？

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verajiao517

用户

longshao2014已经下载到，但是她们所用的实验试剂，只有在美国有卖吗？中国有卖的吗？有的，一百度就出来了

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longshao2014

用户

verajiao517有的，一百度就出来了OK，你说的是深圳市永生原代细胞生物科技有限公司吗？

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verajiao517

用户

longshao2014OK，你说的是深圳市永生原代细胞生物科技有限公司吗？中文不记得了英文就是immortech

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七宝0120

用户

展开引用longshao2014我目前培养大鼠原代食管上皮细胞，虽然已经分离出来（细胞量很少），但是后期细胞不增殖，3-4天细胞就死掉了。我用的培养是基础培养基添加一些细胞因子。请问是培养基的问题，还是操作的问题？如果是培养基的问题，应该添加哪些细胞因子，或者购买哪个牌子的培养基？在线等，急！！！......培养基里面的成分对细胞培养影响很大，一般的培养基都会添加一定量的生长因子、双抗，胎牛血清，而胎牛的质量也是关键

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