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Signosis/HIF Luciferase Reporter NIH3T3 Stable Cell Line/SL-0005-FP/1 Ea

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Signosis/HIF Luciferase Reporter NIH3T3 Stable Cell Line/SL-0005-FP/1 Ea

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Signosis

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SL-0005-FP

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HIFResponsiveLuciferaseReporterNIH/3T3StableCellLineisderivedfrommousefibroblast,andstablyexpressfireflyluciferasereportergeneunderthecontroloftheHIFresponseelement. ThiscelllineisanidealcellularmodelformonitoringtheactivationofHypoxiaReceptorSignalingPathwaytriggeredbystimulitreatment,enforcedgeneexpressionandgeneknockdown.

Principle:

Hypoxia-InducIBLeFactor(HIF)-1isadimericproteincomplexthatplaysacentralroleintheresponsetolowoxygenconcentrations,orhypoxia,and isacrucialphysiologicalregulatorofhomeostasis,vascularization,andanaerobicmetabolism.HIFisatranscriptionfactorregulatinggeneexpressionbybindingtotheirDNArecognitionsiteonthetargetgenes.FurThermore,HIF-1hasbeenwidelystudiedbecauseofitsperceivedtherapeuticpotential. HIF-1allowssurvivalandproliferationofcancerouscellsduetoitsangiogenicproperties,andtheinhibitionpotentiallycouldpreventthespreadofcancer.WithagrowingunderstandingoftheHIF-1pathway,ithasbecomeanattractivegoaltoanalyzetheinhibitionandstimulationofHIFtranscriptionalactivityviasmallmolecules.

Thecelllinewasestablishedbytransfection usinga pTA-HIF-luciferasereportervector,whichcontains4repeatsofHIFbindingsites,aminimalpromoterupstreamofthefireflyluciferasecodingregion, alongwithhygromycinexpressionvectorfollowedbyhygromycinselection. ThehygromycinresistantclonesweresubsequentlyscreenedforCoCl2-inducedluciferaseactivity.

PrinciplebehindTFluciferasereporter. TFluciferasereporterstablecelllineutilizesartificialpromoterconstructstodriveluciferaseexpression. Thepromoterregioncanconsistsofmultiplerepeatsofacis-elementTFbindingsite,aDNAfragmentfromthepromoterregionofaknownTFdownstreamgene,oraDNAfragmentcontainingputative/knownTFbindingsites. ThereareseveralwaysthataTFcanbeactivated,suchasthroughextracellularstimuliorthroughintracellularsignalingpathways. Onceactivated,theTFtranslocatestothenucleusandofteninteractswithrelevantco-factorstodrivegeneexpression. Onceluciferaseisexpressed,itcangeneratelightinanenzymaticassayandtheamountoflightmeasuredispositivelycorrelatedwiththelevelofTFactivation.

Data:

HIFNIH3T3StableCellLineAnalysis. HIFNIH3T3stablecellswereseededina96-wellcultureplatewiththeindicatedmedium. Thecellsweretreatedwith100uMCoCl2for8hours.

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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...

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海拉细胞系的定义

2021-08-10

海拉细胞系是源自一位美国黑人妇女海瑞塔‧拉克斯（Henrietta Lacks）的宫颈癌细胞的细胞系。一位外科医生从她的肿瘤上取下组织样本，并在实验室中进行培养，至今仍被不间断的培养。这名美国妇女在1951年死于该癌症。不同于其他一般的人类细胞，此细胞株不会衰老致死，并可以无限分裂下去。此... 查看更多>

Human Embryonic Stem (ES) Cell Protocols——General notes on...

2021-09-03

hES media has a two week shelf life.hES cells should be cultured in 4, 6, 24, 48, 96 well plates. Growing cells in flasks is not recommended because it is very 查看更多>

小RNA引物设计软件及数据库开发取得新进展动物科学技术学院、...

2021-08-05

hl-60细胞是一种用于实验室研究某些血细胞如何形成的细胞株。在培养基中补充牛胎儿血清.HEPES，抗生素类化学物质，L-谷氨酰胺，通过悬浮培养，hl-60细胞能持续增殖。... 查看更多>

SDURA培养基酵母SDU培养基购买价格、配方、配制方法、用途...

2021-08-27

Use 4ml polycarbonate snap-cap tubes for all steps. Rocking of tubes should be performed at all times. All steps are carried out at room temperature unless oth 查看更多>

Single Primer ("SemiRandom") PCR_实验方法

2021-07-16

简介：【HEL-2细胞】，细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师们提供放心科研细胞。具体详情请致电咨询。详细说明：　　【HEL-2细胞】产品特点：细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师查看更多>

检验发展的路在何方—外包?独立?保持不变?稳中求变?

2021-08-03

检验科独立只是美丽的误解最近一篇网文火爆全国，就是检验科将被独立出医院的传闻。说是传闻也不完全正确，国家卫计委确实下发了文件，不过解读人不同可能有不同的理解。而且文中提到的实验室不包括医院的检验科，所以检验科独立成为法人短时间内还是不可能的。所以对于文件，大家一定要亲自看全文，而且也要看附件信息，微信传的东西看看就好，包括笔者这篇查看更多>

MG132试剂品牌:上海惠诚生物电话02160496554 美国原装进口...

2021-09-22

提供商：复百澳生物查看更多>

体内巨噬细胞清除剂(阴离子氯氟松)品牌:百奥莱博北京

2021-08-01

转染(transfection)专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的生命过程。从本质上讲，和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化，其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞，以提高细胞膜的通透性，从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上，人们往往也通称转染为广义的... 查看更多>

Multicolour3DFISHinvertebratecells4资讯

2021-07-15

凡是由受精卵发育而来，且体细胞中含有两个染色体组的生物个体，均称为二倍体。可用2n表示。人和几乎全部的高等动物，还有一半以上的高等植物都是二倍体。... 查看更多>

重组蛋白和多肽的分离纯化(1)概述专区

2021-09-21

★服务描述 shRNA稳转株是指能持续稳定表达干扰特定基因shRNA的细胞。RNA干扰是基因功能研究中最常用的手段之一。我公司利用慢病毒将shRNA序列整合入细胞基因组，并通过慢病毒载体携带的抗性基因（通常为新霉素，嘌呤霉素，潮霉素）筛选出稳定转染shRNA的细胞，使其成为shRNA稳定转染细胞系。★服务内容 1：shRNA干扰靶点序列的设计； 2：shRNA 慢病毒质粒的构建； 3：shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定； 4... 查看更多>

山羊抗小鼠 IgG(H+L)/FITC_上海西唐生物科技有限公司

2021-08-24

各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株，都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称，即文献中常称之为已鉴定的细胞（Certified Cells）。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各查看更多>

国际标准中文姓氏_

2021-08-17

普通细胞，特殊细胞、特殊培养方式另计查看更多>

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上海做细胞培养技术服务的公司,可靠的,有没有推荐? 123

red19862021-08-04

如题，需要对一株肝癌细胞构建稳转细胞株成默其中的一个基因，上海有哪家公司做这个效果比较好的呢？有知道的站友麻烦推荐一下谢谢。

构建稳转细胞系123

gleb7532017-10-02

稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系，这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说（由细胞类型决定），形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染（transient transfection）的效率低1到2个数量级。利用可选择的遗传标记物有利于从非转染细胞的中分离出稀少的稳定转染物

整理)慢病毒稳转细胞株步骤.pdf原创力文档123

l小呆2021-07-28

1、请教各位老师，转染质粒DNA的HepG2及HUH7细胞，如何筛选稳转细胞株？
2、有限稀释法有没有protocol？

实验Q&A:如何用慢病毒转染构建稳转细胞系实验方法123

耳语仏2021-08-18

稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选，前者操作简单，但是成功率很低，费时，假阳性高，最后可能导致几个月的工作白干了，慢病毒稳定株筛选方法比较简单，并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性，没有假阳性，慢病毒。

siRNA干扰常见问题123

有恃无恐03502021-07-31

这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。

【求助】瞬转、稳转? 细胞技术讨论版论坛123

zjliuzj2021-08-01

制备成功稳定转染 细胞株后，能否再用瞬时转染的方法转入其它质粒？

Polymer Plastics Technology and Engineering | 标准期刊 ...123

2017-10-02

自己操作的难度比较大。一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉，打不好是没有效果的。最好去专业医疗机构医院或者诊所，那里会比较专业。效果也比较好.

如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术? 实验方法123

xsssaber3112017-10-02

可以，除了单靶点外，该技术也可以进行多靶点基因敲除。

利用慢病毒载体快速建立表达外源基因的哺乳动物细胞系【论文分享...123

zhiyun_10892017-10-02

真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体，在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。腺病毒载体携带外源基因较大，可瞬时高表达。慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法
6.获得稳转株

细胞转染筛选问题生物科学 123

面忻2021-08-13

请问细胞转染质粒后想获得稳定细胞系，是先用流式细胞仪筛选后再用抗性培养基筛选吗？一般是转染后多久开始进行筛选

垃圾分类投标技术方案(技术标)123

2021-07-25

稳转细胞系常用的方法有脂质体转染和慢病毒转染进行稳定株筛选，脂质体法筛单克隆时间耗时长，假阳性高，且效率低，大概只有1%。病毒转染得到稳定细胞株的效率高，只是步骤繁琐。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒，如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。

【交流】两种腺病毒载体可以同时转染一种细胞吗? 核酸基因技术...123

daskjfha1502017-10-02

不能