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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-07-26
江苏齐氏生物科技有限公司在发布的稳转细胞株构建服务供应信息，浏览与稳转细胞株构建服务相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建服务相关的内容。 查看更多
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2021-09-15
广州辉骏生物科技有限公司在发布的辉骏生物载体构建 病毒包装 稳转株构建等年末5折低促,还有500元京东购物卡可领供应信息，浏览与辉骏生物载体构建 病毒包装 稳转株构建等年末5折低促,还有500元京东购物卡可领相关的产品或在搜索更多与辉骏生物载体构建 病毒包装 稳转株构建等年末5折低促,还有500元京东购物卡可领相关的内容。 查看更多
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2021-07-21
4 月 8 日，内蒙古首例医疗事故罪案在包头市中级人民法院开庭审理，此案再一次引起网友热议。2013 年，一 3 岁男童因重症细菌性肺炎并发感染性休克，加之镇静药物的不当使用致肝脏、大脑等多器官功能损坏和衰竭死亡。村卫生室医生潘耀平被认定为承担主要责任，2014 年 9 月 19 日，检察院以医疗事故罪严重不负责任对潘耀平医生批准逮捕并提起公诉。潘耀平一审被判处有 查看更多
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2021-08-27
Use 4ml polycarbonate snap-cap tubes for all steps. Rocking of tubes should be performed at all times. All steps are carried out at room temperature unless oth 查看更多
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2021-09-14
稳定转染和瞬时转染，细胞转染的步骤基本相同，只是在转染后的细胞处理会不一样。由于瞬时转染只能维持几天，故在转染12～72后就可以在蛋白或基因水平进行相应的检测了。稳转细胞系通常需要通过一些选择性标记反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。通常构建的载体上有两个抗性基因，如，氨苄青霉素和新霉素。那么建立稳转细胞系时该用哪种抗生素来筛细胞呢？很多真核表达质粒上都有两个抗性基因，但一般其中只有一个抗性可以用来筛细胞。其中氨苄青霉素对细胞是没有筛选... 查看更多
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2021-08-07
上海锐赛生物技术有限公司在发布的病毒包装，个性定制，稳转株构建！供应信息，浏览与病毒包装，个性定制，稳转株构建！相关的产品或在搜索更多与病毒包装，个性定制，稳转株构建！相关的内容。 查看更多
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2021-08-09
慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。... 查看更多
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2019-08-08
上海麒盟生物科技有限公司在发布的基因过表达慢病毒稳转细胞株 (LentiOE-Stable)供应信息，浏览与基因过表达慢病毒稳转细胞株 (LentiOE-Stable)相关的产品或在搜索更多与基因过表达慢病毒稳转细胞株 (LentiOE-Stable)相关的内容。 查看更多
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2021-07-15
凡是由受精卵发育而来，且体细胞中含有两个染色体组的生物个体，均称为二倍体。可用2n表示。人和几乎全部的高等动物，还有一半以上的高等植物都是二倍体。... 查看更多
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2021-09-12
上海锐赛生物技术有限公司在发布的稳转株构建供应信息，浏览与稳转株构建相关的产品或在搜索更多与稳转株构建相关的内容。 查看更多
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2019-09-10
产品：稳转细胞株筛选 查看更多
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2021-08-29
8 eggs per day, day 7- day 13 cut CAM, wash in precooled PBS, in 10 ml WASH 1 (PBS, 5 mM EDTA, COMPLETE) on ice cut in pieces in petri dish on ice centrifuge 4 查看更多
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垃圾分类投标技术方案(技术标)123
2021-07-25
稳转细胞系常用的方法有脂质体转染和慢病毒转染进行稳定株筛选，脂质体法筛单克隆时间耗时长，假阳性高，且效率低，大概只有1%。病毒转染得到稳定细胞株的效率高，只是步骤繁琐。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒，如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
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把质粒转入细胞的方法步骤是什么啊请教一下_问答详情_细胞转染_...123
泽田27丶TA傹2017-10-02
要看你是什么细胞，是想过表达还是knock down一个基因，稳转还是瞬转。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
磷酸钙细胞转染技术 123
肥沙褐匀0012021-08-15
转染的话一般是以克数来规范转染的质粒数量,所以会有很多质粒.一般转染的质粒除了带有需要过表达的基因以外,还需要带有标记基因.标记基因可以被特定的抗体检测,从而判断是否有效表达.如果你要过表达的是某种蛋白,也可以直接通过该蛋白的抗体检测,对照是没有转染的同种细胞,这样表达效果就可以通过WESTERN BLOT看见了.过表达倒没什么标准,每种蛋白表达量也不一致,选择适合自己的浓度就好. 顺转的话,我们实验室采用lipo2000,具体步骤百度文库有,英文的protocol在lipo2000的说明书上也能看到. 稳转的话一般需要在质粒上构建某个抗性基因,如嘌呤霉素抗性.这样用抗性培养基多次筛选就可以筛选出稳转的细胞株,但是比较难.
稳定细胞株筛选123
流苏紫光2021-07-22
转染人MGC803细胞，用嘌呤霉素筛选，已经筛选几个月了，每次都失败告终，时间有限，是在是着急。各位大神，有人做稳转的求指导。**！
【专题讨论】慢病毒转染后筛选稳定株 细胞技术讨论版123
最爱hi112021-08-12
帮同学问：最近要筛选一个人肺癌细胞稳定转染株，用什么方法比较好呢？目的细胞是人肺癌细胞，在其他地方看到有的用质粒，有的用慢病毒进行稳定株筛选，两种方法有什么区别呢，具体操作是什么呢？望有大神告知
逆转录聚合酶链反应(RTPCR,rtpcr)资讯123
qishi51142021-08-08
[求助]转染带有GFP的目的基因载体后,观察不到荧光 经验共享...123
寞比sln2021-08-20
之前转染了带GFP的质粒，冻存估计有半年了拿来复苏，想做后续实验，结果稳转的细胞荧光少还很弱，请问怎么办？急急急！
【求助】逆转录病毒载体不带GFP,如何进行构建稳转细胞株?谢谢 ...123
drjasionzl2012-12-11
细胞转染筛选问题 生物科学 123
面忻2021-08-13
四种转染试剂对H9C2细胞转染效率的比较 道客巴巴123
银妈E07GG2021-07-21
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做，操作是否稳定。
然后你得确定，这个细胞株对于你得研究来说不可或缺，具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话，祝你顺利。
然后你得确定，这个细胞株对于你得研究来说不可或缺，具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话，祝你顺利。
【求助】瞬转、稳转? 细胞技术讨论版论坛123
zjliuzj2021-08-01
G418筛选稳定表达细胞系PROTOCOL 实验方法123
二洋旣獎b38JV2021-08-06
稳定细胞株筛选是一个长期的过程，稳定细胞株筛选优化，有许多条件需要摸索，而且是从源头开始
① 在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证
② 高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白表达量
③ 细胞的选择，筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO，中国仓鼠卵巢细胞，由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株，而HEK293细胞则常用于瞬时转染
④ 后期的筛选，双抗预防污染，筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验，而且转染的时候不能有抗生素，关于细胞转染 稳定细胞系构建的相关理论
① 在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证
② 高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白表达量
③ 细胞的选择，筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO，中国仓鼠卵巢细胞，由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株，而HEK293细胞则常用于瞬时转染
④ 后期的筛选，双抗预防污染，筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验，而且转染的时候不能有抗生素，关于细胞转染 稳定细胞系构建的相关理论
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