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ACROBiosystems/Human IL-12B / NKSF2 / p40 Protein, Fc Tag/20ug/NK2
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ACROBiosystems/Human IL-12B / NKSF2 / p40 Protein, Fc Tag/20ug/NK2
品牌 / 
ACROBiosystems
货号 / 
NK2
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  • Synonym
    IL12B,CLMF,CLMF2,NKSF,NKSF2,p40
  • Source
    Human IL-12B, Fc Tag (NK2-H5258) is expressed from human 293 cells (HEK293). It contains AA Ile 23 - Ser 328 (Accession # AAH67499).
    Predicted N-terminus: Ile 23
    Request for sequence
  • Molecular Characterization
    Online(Ile 23 - Ser 328) AAH67499

    This protein carries a human IgG1 Fc tag at the C-terminus.

    The protein has a calculated MW of 61.3 kDa. The protein migrates as 66-76 kDa under reducing (R) condition (SDS-PAGE) due to glycosylation.

  • Endotoxin
    Less than 1.0 EU per μg by the LAL method.
  • Purity

    >95% as determined by SDS-PAGE.

  • Formulation

    Lyophilized from 0.22 μm filtered solution in Tris with Glycine, Arginine and NaCl, pH7.5. Normally trehalose is added as protectant before lyophilization.

    Contact us for customized product form or formulation.

  • Reconstitution

    Please see Certificate of Analysis for specific instructions.

    For best performance, we strongly recommend you to follow the reconstitution protocol provided in the CoA.

  • Storage

    For long term storage, the product should be stored at lyophilized state at -20°C or lower.

    Please avoid repeated freeze-thaw cycles.

    This product is stable after storage at:

    1. -20°C to -70°C for 12 months in lyophilized state;
    2. -70°C for 3 months under sterile conditions after reconstitution.
SDS-PAGE
Human IL-12B, Fc Tag (Cat. No. NK2-H5258) SDS-PAGE gel

Human IL-12B, Fc Tag on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.

Bioactivity-ELISA
Human IL-12B, Fc TagHuman IL-12B, Fc Tag (Cat. No. NK2-H5258) ELISA bioactivity

Immobilized Human IL-12B, Fc Tag (Cat. No. NK2-H5258) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Biotinylated Human IL-12 R beta 1, Fc,Avitag (Cat. No. ILB-H82F7) with a linear range of 5-40 ng/mL (QC tested).

Protocol
  • Background
    Interleukin-12 (IL12) is also known as natural killer cell stimulatory factor (NKSF), cytotoxic lymphocyte maturation factor (CLMF) , is a heterodimeric cytokine encoded by two separate genes, IL-12A (p35) and IL-12B (p40). IL12 is naturally produced by dendritic cells, macrophages and human B-lymphoblastoid cells (NC-37) in response to antigenic stimulation. IL-12 is involved in the differentiation of naive T cells into Th0 cells and plays an important role in the activities of natural killer cells and T lymphocytes.IL-12 also has anti-angiogenic activity, which means it can block the formation of new blood vessels.Interleukin-12 subunit beta (IL12B) also known as NKSF2, CLMF2 and P40. Interleukin-12 subunit beta has been shown to interact with IL23. A large excess of monomeric IL12B is also secreted by the cells producing IL12, and exhibits no demonstrable biological activity. Overexpression of IL12B gene has been shown to be associated with the pathogenesis of multiple sclerosis. In addition, studies have revealed that the promoter polymorphism of this gene is implicated in the severity of atopic and non-atopic asthma in children.
  • References
    • (1)Kaliński P, et al., 1997, J. Immunol. 159 (1): 28–35.
    • (2)Chehimi J, et al., 1993, Eur J Immunol., 23(8):1826-30.
    • (3)Thierfelder WE, et al., Nature., 382(6587):171-4.
    • (4)Oppmann B., et al., 2000, Immunity (UNITED STATES) 13 (5): 715–25.
  • Please contact us via TechSupport@acrobiosystems.com if you have any question on this product.

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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hES media has a two week shelf life.hES cells should be cultured in 4, 6, 24, 48, 96 well plates. Growing cells in flasks is not recommended because it is very 查看更多>
实验原理       稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。        瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天);外源基因的表达水平不... 查看更多>
★服务描述 shRNA稳转株是指能持续稳定表达干扰特定基因shRNA的细胞。RNA干扰是基因功能研究中最常用的手段之一。我公司利用慢病毒将shRNA序列整合入细胞基因组,并通过慢病毒载体携带的抗性基因(通常为新霉素,嘌呤霉素,潮霉素)筛选出稳定转染shRNA的细胞,使其成为shRNA稳定转染细胞系。★服务内容 1:shRNA干扰靶点序列的设计; 2:shRNA 慢病毒质粒的构建; 3:shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定; 4... 查看更多>
实验原理       稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。        瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天);外源基因的表达水平不... 查看更多>
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慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。... 查看更多>
上海锐赛夏季慢病毒/稳转株-----酷爽套餐! 来源:上海锐赛生物技术有限公司2013-7-23 访问量:3193评论(0)标签: 锐赛生物/ R&S 慢病毒/稳转株/促销/细胞 上海锐赛夏季慢病毒/稳转株-----酷爽套餐! 活动期间,将同一基因... 查看更多>
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4 月 8 日,内蒙古首例医疗事故罪案在包头市中级人民法院开庭审理,此案再一次引起网友热议。2013 年,一 3 岁男童因重症细菌性肺炎并发感染性休克,加之镇静药物的不当使用致肝脏、大脑等多器官功能损坏和衰竭死亡。村卫生室医生潘耀平被认定为承担主要责任,2014 年 9 月 19 日,检察院以医疗事故罪严重不负责任对潘耀平医生批准逮捕并提起公诉。潘耀平一审被判处有 查看更多>
based on splitting onto on plateWarm collagenase media to 37°C in a water bath.Aspirate media off of cell culture plate.Add the following amount of collagenase 查看更多>
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商品咨询
1、请教各位老师,转染质粒DNA的HepG2及HUH7细胞,如何筛选稳转细胞株
2、有限稀释法有没有protocol?
构建稳转细胞系123
gleb7532017-10-02
稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说(由细胞类型决定),形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染(transient transfection)的效率低1到2个数量级。利用可选择的遗传标记物有利于从非转染细胞的中分离出稀少的稳定转染物
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
siRNA干扰常见问题123
有恃无恐03502021-07-31
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
有人有用过吉凯的GV248慢病毒吗,关于胃癌方面的,小弟在构建LncRNA干扰的稳转胃癌细胞SGC-7901株,转想请问这种细胞株嘌呤霉素的筛选浓度是多少,如何进行筛选?
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒。

求助各位大神

RT,找公司做的稳转Hela和HepG2细胞株拿回来以后培养总是出问题。细胞寄到后显微镜下观察,状态良好。长满传代后,一瓶出现大量漂浮不贴壁的情况,一瓶贴壁后生长出现成团,生长缓慢的情况(传代后有显微观察,分散良好没有成团),一瓶传至第三代后,14h后显微观察,大量漂浮贴壁情况差。

培养基为DMEM,10%FBS,5%CO2,是随细胞寄过来的培养基。

求各位大神帮忙分析下原因,是我毕业课题,突然出现这样的问题,不想研三再换课题了。

万分感谢!

制备成功稳定转染细胞株后,能否再用瞬时转染的方法转入其它质粒?
准备研究一抑癌基因在肿瘤细胞中的过表达的细胞学实验及动物实验,最近做稳转发现细胞不扩增,零星几个一直贴在皿里。对照的无抑癌基因的载体稳转效果就不错,药物筛选11天,发现有很多克隆出现了。试问:1)抑癌基因的研究一定要稳转的细胞吗?瞬转难道不也能说明一些问题吗?2)对于动物实验,稳转的细胞株是最好的,但是如果老是筛选不出稳转的细胞克隆有没有代替的方法?3)大家有什么好的经验来筛选抑癌基因的稳转细胞株克隆。
最近做这个实验感觉像是在和细胞较劲儿,呵呵。
行阶梯形矩阵_123
zf30272021-08-07
如题,我用PIRES2-EGFP(带/不带目的基因)转染HCT-116,G418筛选,筛选浓度为800µg/ml,两周后发现克隆要么不带荧光,要么荧光很淡,几乎看不出细胞的轮廓,估计挑出来也没用,请问这是什么原因,我下一步该怎么办?
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,结果是短暂的高水平表达,可在外源基因导入细胞24~96h内检测表达效果,表达水平与位置无关,不会受到周围染色体元件的影响。超螺旋质粒转染更倾向于瞬时表达。
对于瞬时转染的检测:如果有报告基因,就通过报告基因的表达看转染成功与否;没有报告基因的话,就在24~96h内收获细胞通过RT-PCR和WB来鉴定。
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒包装可能相对比质粒构建难度大,如果经费充足可以直接找公司包毒的。