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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员,他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节; 同时通过在线的流程监控,蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上, 部分产品甚至能做到7-10天到货,即蚂蚁淘的“时必达”服务。

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2021-09-23
北京英茂盛业生物科技有限公司在发布的MDCK-EGFP稳定细胞株(犬肾细胞EGFP稳转细胞系)供应信息,浏览与MDCK-EGFP稳定细胞株(犬肾细胞EGFP稳转细胞系)相关的产品或在搜索更多与MDCK-EGFP稳定细胞株(犬肾细胞EGFP稳转细胞系)相关的内容。 查看更多
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2021-09-22
提供商:复百澳生物 查看更多
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2021-07-15
凡是由受精卵发育而来,且体细胞中含有两个染色体组的生物个体,均称为二倍体。可用2n表示。人和几乎全部的高等动物,还有一半以上的高等植物都是二倍体。... 查看更多
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2021-09-14
稳定转染和瞬时转染,细胞转染的步骤基本相同,只是在转染后的细胞处理会不一样。由于瞬时转染只能维持几天,故在转染12~72后就可以在蛋白或基因水平进行相应的检测了。稳转细胞系通常需要通过一些选择性标记反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。通常构建的载体上有两个抗性基因,如,氨苄青霉素和新霉素。那么建立稳转细胞系时该用哪种抗生素来筛细胞呢?很多真核表达质粒上都有两个抗性基因,但一般其中只有一个抗性可以用来筛细胞。其中氨苄青霉素对细胞是没有筛选... 查看更多
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2021-08-10
海拉细胞系是源自一位美国黑人妇女海瑞塔‧拉克斯(Henrietta Lacks)的宫颈癌细胞的细胞系。一位外科医生从她的肿瘤上取下组织样本,并在实验室中进行培养,至今仍被不间断的培养。这名美国妇女在1951年死于该癌症。 不同于其他一般的人类细胞,此细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去。此... 查看更多
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2021-07-25
服务名称:吉满生物慢病毒包装/AAV腺相关病毒包装/腺病毒包装包装/shRNA/RNAi/基因过表达/microRNA/ 查看更多
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2021-08-12
服务名称:shRNA稳转细胞系构建 查看更多
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2021-09-11
吉满生物科技(上海)有限公司是慢病毒包装/AAV腺相关病毒包装/腺病毒包装包装/shRNA/RNAi/基因过表达/microRNA/lncRNA载体构建/稳定细胞株筛选/稳转株构建/课题设计技术服务商之一,从事慢病毒包装/AAV腺相关病毒包装/腺病毒包装包装/shRNA/RNAi/基因过表达/microRNA/lncRNA载体构建/稳定细胞株筛选/稳转株构建/课题设计已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业慢病毒包装/AAV腺相关病毒包装/腺病毒包装包装/shRNA/RNAi/基因过表达/microRNA 查看更多
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2021-08-08
稳定表达细胞株(稳转细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。 在基因功能的 查看更多
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2021-08-09
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。... 查看更多
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2021-09-18
上海诺百生物科技有限公司在发布的稳转细胞系构建供应信息,浏览与稳转细胞系构建相关的产品或在搜索更多与稳转细胞系构建相关的内容。 查看更多
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2020-06-26
南京霆瑞生物科技有限公司在发布的稳转细胞株构建供应信息,浏览与稳转细胞株构建相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建相关的内容。 查看更多
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pcDNA3.1能做G418筛选,获得稳定转染株吗– 960问答123
閁錒0952么2017-10-02
不能,它有Neomycin基因,可以用新霉素进行稳定株筛选,获得稳定株。
把质粒转入细胞的方法步骤是什么啊请教一下_问答详情_细胞转染_...123
泽田27丶TA傹2017-10-02
要看你是什么细胞,是想过表达还是knock down一个基因,稳转还是瞬转。
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室最方便的转染方法之一,其转染率较高,优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性,所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型:cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内,这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下,高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂,可以大大的降低细胞的死亡率,同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染,此法可以快速100%感染,检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体[1]体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时。
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室最方便的转染方法之一,其转染率较高,优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性,所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型:cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内,这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下,高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂,可以大大的降低细胞的死亡率,同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染,此法可以快速100%感染,检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体[1]体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时。
知识分享:【维真生物】稳转株构建流程_细胞系123
2021-08-05
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒包装可能相对比质粒构建难度大,如果经费充足可以直接找公司包毒的。
详解构建稳定细胞株实验流程123
苦也不太差°琼2021-07-30
稳定细胞系构建后可以开展哪些实验
建立稳定细胞株,一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶...专注整体实验·服务生命科学已开展了数千个实验外包项目
建立稳定细胞株,一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶...专注整体实验·服务生命科学已开展了数千个实验外包项目
如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术? 实验方法123
xsssaber3112017-10-02
可以,除了单靶点外,该技术也可以进行多靶点基因敲除。
自己操作的难度比较大。一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉,打不好是没有效果的。最好去专业医疗机构医院或者诊所,那里会比较专业。效果也比较好.
稳转细胞培养过程中需要加G418吗 123
爪机粉群009A42017-10-02
假阳性高稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,费时,但是成功率很低,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒
siRNA干扰常见问题123
有恃无恐03502021-07-31
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
整理)慢病毒稳转细胞株步骤.pdf原创力文档123
l小呆2021-07-28
垃圾分类投标技术方案(技术标)123
2021-07-25
稳转细胞系常用的方法有脂质体转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,脂质体法筛单克隆时间耗时长,假阳性高,且效率低,大概只有1%。病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒,如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒,如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
【专题讨论】慢病毒转染后筛选稳定株 细胞技术讨论版论坛123
黑白的无奈鷤禩2017-10-02
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法
6.获得稳转株
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法
6.获得稳转株
【求助】稳转细胞株进行细胞增殖和周期时是否还需要加G418_问答...123
lifengna2021-08-19


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