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| Product Name | SensoLyte ® pNPP Alkaline Phosphatase Assay Kit *Colorimetric* |
| Size | 1 kit |
| Catalog # | AS-72146 |
| US$ | $191 |
The change of alkaline phosphatase activity is involved in a variety of physiological and pathological events, such as bone development, bone-related diseases, gestation-related diseases and inflammatory bowel diseases. Alkaline phosphatase is also a popular enzyme conjugated with secondary antibody for ELISA. p-Nitrophenyl phosphate (pNPP) is proven to be an effective chromogenic substrate for alkaline phosphate. This SensoLyte® kit can be used to detect alkaline phosphatase activity in biological samples and alkaline phosphatase-based ELISA. The kit contains: pNPP chromogenic liquid substrate (absorption maximum = 405 nm upon dephosphorylation), Assay buffer, Stop solution, Alkaline phosphatase standard, mix and read assay protocol that is compatible with high throughput screening. Kit size: 500 assays | |
| Detailed Information |  Datasheet Material Safety Data Sheets (MSDS) |
| Product Citations | Oh Y, et al. (2020) Anti-Osteoporotic Effects of Antioxidant Peptides PIISVYWK and FSVVPSPK from Mytilus edulis on Ovariectomized Mice. Antioxidants. 9(9):E866. doi: 10.3390/antiox9090866.Knopp, M. et al. (2015). Amelioration of the fitness costs of antibiotic resistance due to reduced outer membrane permeability by upregulation of alternative porins MolBioEvol 32 doi:10.1093/molbev/msv195Dai, J. et al. (2014). Cabozantinib Inhibits Prostate Cancer Growth and Prevents Tumor-Induced Bone Lesions. Clin Cancer Res 20, 617.doi: 10.1158/1078-0432.CCR-13-0839.Mah, YJ. et al. (2014). The effect of epigallocatechin-3-gallate (EGCG) on human alveolar bone cells both in vitro and in vivo. Archives Oral Biol 59, 539.Pauksch, L. et al. (2014). Biocompatibility of silver nanoparticles and silver ions in primary human mesenchymal stem cells and osteoblasts. Acta Biomat 10, 439.Rebollo, A. et al. (2014). 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Response of human embryonic stem cells derived mesenchymal stem cells to osteogenic factors and architectures of materials during in vitro osteogenesis. Tissue Engineer Part A 10.1089/ten.TEA.2010.0097.Kanwar, S. et al. (2010). The Wnt/beta-catenin pathway regulates growth and maintenance of colonospheres. Mol Cancer 6, 212.Kemmis, C. et al. (2010). Bone morphogenetic protein 6 drives both osteogenesis and chondrogenesis in murine adipose-derived mesenchymal cells depending on culture conditions. Biochem Biophys Res Commun. 401, 20.Lu, C. et al. (2010). MT1-MMP controls human mesenchymal stem cell trafficking and differentiation. Blood 115, 221.Misra, S. et al. (2010). Effect of nanoparticulate bioactive glass particles on bioactivity and cytocompatibility of poly(3-hydroxybutyrate) composites. J R Social Interface 7, 453.Oku, S. et al. (2010). JAK2 V617F uses distinct signalling pathways to induce cell proliferation and neutrophil activation. 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Replicative senescence of vascular smooth muscle cells enhances the calcification through initiating the osteoblastic transition. Am J Physiol Heart Circ Physiol 297, H1673-H1684Lee, J. et al. (2009). Modular peptides promote human mesenchymal stem cell differentiation on biomaterial surfaces. Acta Biomater 6, 21.Pennisi, A. et al. (2009). Inhibitor of DASH proteases affects expression of adhesion molecules in osteoclasts and reduces myeloma growth and bone disease. British J of Hematology 145, 775.Stanisic, V. et al. (2009). OTU domain-containing ubiquitin aldehyde-binding protein 1 (OTUB1) deubiquitinates estrogen receptor (ER) α and affects ERα transcriptional activity. J Biol Chem 284, 16135.Zhang, Z. et al. (2009). Superior osteogenic capacity for bone tissue engineering of fetal compared with perinatal and adult mesenchymal stem cells. Stem Cells 27, 126.Haraguchi, N. et al. (2008). CD133+CD44+ population efficiently enriches colon cancer initiating cells. Ann Surg Oncol 15, 2927.Meng, Q. et al. (2008). Regulating the age-related oxidative damage, mitochondrial integrity, and antioxidative enzyme activity in fischer 344 rats by supplementation of the antioxidant epigallocatechin-3-gallate. Rejuv Res 11, 649.Scaffidi, P. et al. (2008). Lamin A-dependent misregulation of adult stem cells associated with accelerated ageing. Nature Cell Biol 10, 452.Bae, J. et al. (2007). Engineering a disulfide bond to stabilize the calcium binding loop of activated protein C eliminates its anticoagulant but not protective signaling properties. J Biol Chem 10.1074/jbc.M610547200.Yang, L. et al. (2007). Identification of a specific exosite on activated protein C for interaction with protease-activated receptor 1. J Biol Chem 282, 25493. |
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2021-07-18
简介： 【Hela 229】，细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为老师们提供放心科研细胞。具体详情请致电咨询：4000-520-616详细说明： 【Hela 229】产品特点：细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员，可提供复苏细胞，冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前，最好的细胞售后，为 查看更多
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2021-08-31
PREPARING CELLSBring up HUVEC and fibroblasts in M199/10% FBS/Pen-Strep (1:100) 1-2 days before beading. Switch medium to EGM-2 (Clonetics) the day before bead 查看更多
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上海锐赛夏季慢病毒/稳转株-----酷爽套餐！ 来源：上海锐赛生物技术有限公司2013-7-23 访问量：3193评论(0)标签： 锐赛生物/ R&S 慢病毒/稳转株/促销/细胞 上海锐赛夏季慢病毒/稳转株-----酷爽套餐！ 活动期间，将同一基因... 查看更多
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2021-07-26
江苏齐氏生物科技有限公司在发布的稳转细胞株构建服务供应信息，浏览与稳转细胞株构建服务相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建服务相关的内容。 查看更多
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2021-08-01
转染(transfection)专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的生命过程。从本质上讲，和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化，其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞，以提高细胞膜的通透性，从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上，人们往往也通称转染为广义的... 查看更多
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2021-09-18
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2021-09-16
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2021-07-29
江苏吉锐生物技术有限公司在发布的稳转细胞株构建（过表达、沉默）--稳定遗传，优于慢病毒供应信息，浏览与稳转细胞株构建（过表达、沉默）--稳定遗传，优于慢病毒相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建（过表达、沉默）--稳定遗传，优于慢病毒相关的内容。 查看更多
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2021-08-06
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2021-09-22
提供商：复百澳生物 查看更多
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2021-08-25
Preparation of Copy Standards for PCR GenotypingPCR screens must be designed to detect transgene DNA at the single copy level. To demonstrate this level of sen 查看更多
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上海做细胞培养技术服务的公司,可靠的,有没有推荐? 123
red19862021-08-04
如题，需要对一株肝癌细胞构建稳转细胞株成默其中的一个基因，上海有哪家公司做这个效果比较好的呢？有知道的站友麻烦推荐一下谢谢。
构建好的稳转过表达细胞株,为什么又不表达目的基因了 123
惊叹号7522021-07-24
转入目的基因但为什么不表达mRNA
先提取RNA,反转录成cDNA,然后根据目的基因设计PCR引物,通过半定量RT-PCR确定目的基因表达.
正因为检测的是mRNA,所以要先反转录成cDNA才能PCR.
先提取RNA,反转录成cDNA,然后根据目的基因设计PCR引物,通过半定量RT-PCR确定目的基因表达.
正因为检测的是mRNA,所以要先反转录成cDNA才能PCR.
利用慢病毒载体快速建立表达外源基因的哺乳动物细胞系【论文分享...123
zhiyun_10892017-10-02
真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体，在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。 腺病毒载体携带外源基因较大，可瞬时高表达。 慢病毒载体携带外源基因较小些，但可以重组入细胞基因组，稳定高表达。
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法
6.获得稳转株
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合，共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选，如果没有，可以用无限稀释法
6.获得稳转株
转染细胞的稳定筛选 实验方法123
流年ノ01072017-10-02
基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
把质粒转入细胞的方法步骤是什么啊请教一下_问答详情_细胞转染_...123
泽田27丶TA傹2017-10-02
要看你是什么细胞，是想过表达还是knock down一个基因，稳转还是瞬转。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。
方法
脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。
病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
常用步骤
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体[1]体积：DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入完全培养基继续培养24－48小时。
详解构建稳定细胞株实验流程123
苦也不太差°琼2021-07-30
稳定细胞系构建后可以开展哪些实验
建立稳定细胞株,一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶...专注整体实验·服务生命科学已开展了数千个实验外包项目
建立稳定细胞株,一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶...专注整体实验·服务生命科学已开展了数千个实验外包项目
【求助】逆转录病毒载体不带GFP,如何进行构建稳转细胞株?谢谢 ...123
drjasionzl2012-12-11
如何在构建敲除细胞株时利用好CRISPR/Cas9技术? 实验方法123
xsssaber3112017-10-02
可以，除了单靶点外，该技术也可以进行多靶点基因敲除。
哺乳动物质粒稳转是随机插入的吗123
坏趾步滤2017-10-02
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
自己操作的难度比较大。一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉，打不好是没有效果的。最好去专业医疗机构医院或者诊所，那里会比较专业。效果也比较好.
[求助]转染带有GFP的目的基因载体后,观察不到荧光 经验共享...123
寞比sln2021-08-20
之前转染了带GFP的质粒，冻存估计有半年了拿来复苏，想做后续实验，结果稳转的细胞荧光少还很弱，请问怎么办？急急急！
如何构建重组质粒转染后稳定表达的细胞系 分子生物 ...123
元超瞄2021-08-02
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
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