psiCHECK2质粒转染细胞后，用什么药物筛选稳定克隆

首页
品牌展示
产品查询
新闻资讯
帮助中心
联系我们
现货平台

商品列表技术文章相关问答

2017-10-02

问题描述：

*请输入10-500个字符

提交

已帮助
0人

本回答由提问者推荐

用户

基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.脂质体转染：在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.病毒转染：先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.

▍ 相关分类

细胞株

常规细胞株原代细胞干细胞稳转细胞株

细胞培养

培养基血清添加物冻存试剂刺激/抑制试剂抗生素缓冲液其他胶原酶

细胞研究

细胞分离细胞转染细胞凋亡细胞代谢细胞增殖细胞标记信号通路

▍ 相关文章

more+