TransformedfromsUSPensionhumanJurkatTcellline( originatedfromahumanperipheralbloodofwithTcellleukemia) bylentivirusexpressingenhance GFP fluorescent Marker. GFP wasexpressedunderthenativepromoterofhumanFlt1gene(whichispreferablyexpressedinendothelial,suchastumorvasculature). CelllinecontainsaPuromycin antibioticselectionmarker. ProductManual.
Thefollowexpressioncassettewasintegratedintocellline’sgenome.

EachcellshowedGFPfluorescentsignal.

Soldat: 1vialx(2 x106cells)/vial
Cat#SC049-2
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运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的,我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权; 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程, 确保货物的来源; 正规报关,提供13%增值税发票。
及时交付: 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员,他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节; 同时通过在线的流程监控,蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上, 部分产品甚至能做到7-10天到货,即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购: 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的,并且具有很大的价格优势,不需要繁杂的询价比价; 报价单与合同可以直接在线生成或打印;就像在京东购物一样, 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购,订单详情会告诉您所有进程。
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X-gal staining of embryosProtocol supplied by S. P. Yee (spyee@julian.uwo.ca) and Joe Chan (cchan@hgmp.mrc.ac.uk).ProcedureDissect embryos in PBS Immediately t
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实验周期太长?实验室条件受限,不准用病毒?夏季来临了,想去度假!别担心,都交给我们吧!过表达慢病毒稳转株促销大行动已开始。和元生物倾情回馈新老客户!还等什么,赶紧行动吧! 活动时间: 2015年5月15日—2015年10月30日活动内容: 针对同一基因、同一载体:1个稳转株12800元;2个稳转株15800元;3个稳转株17800元;服务流程: 注:如果您提供的感染细胞的MOI值过高,价格和周期上会有变动哦! 本次活动最终解释权归和元生...
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广州辉骏生物科技有限公司在发布的辉骏生物载体构建 病毒包装 稳转株构建等年末5折低促,还有500元京东购物卡可领供应信息,浏览与辉骏生物载体构建 病毒包装 稳转株构建等年末5折低促,还有500元京东购物卡可领相关的产品或在搜索更多与辉骏生物载体构建 病毒包装 稳转株构建等年末5折低促,还有500元京东购物卡可领相关的内容。
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上海锐赛生物技术有限公司在发布的稳转株构建供应信息,浏览与稳转株构建相关的产品或在搜索更多与稳转株构建相关的内容。
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I. TYPES OF CELLS GROWN IN CULTURETissue culture is often a generic term that refers to both organ culture and cell culture and the terms are often used interc
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Isolate cells and dissociate to single cell suspension (can use Gibco Cell Dissociation Buffer, Accutase or Trypsin)Wash with 10% FBS/DMEM:F12For surface marke
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上海锐赛生物技术有限公司在发布的病毒包装,个性定制,稳转株构建!供应信息,浏览与病毒包装,个性定制,稳转株构建!相关的产品或在搜索更多与病毒包装,个性定制,稳转株构建!相关的内容。
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沃登医学在发布的稳转细胞株构建供应信息,浏览与稳转细胞株构建相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建相关的内容。
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北京英茂盛业生物科技有限公司在发布的线粒体定位EGFP稳转细胞系(Hela)供应信息,浏览与线粒体定位EGFP稳转细胞系(Hela)相关的产品或在搜索更多与线粒体定位EGFP稳转细胞系(Hela)相关的内容。
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稳定转染和瞬时转染,细胞转染的步骤基本相同,只是在转染后的细胞处理会不一样。由于瞬时转染只能维持几天,故在转染12~72后就可以在蛋白或基因水平进行相应的检测了。稳转细胞系通常需要通过一些选择性标记反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。通常构建的载体上有两个抗性基因,如,氨苄青霉素和新霉素。那么建立稳转细胞系时该用哪种抗生素来筛细胞呢?很多真核表达质粒上都有两个抗性基因,但一般其中只有一个抗性可以用来筛细胞。其中氨苄青霉素对细胞是没有筛选...
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常见问题
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转入目的基因但为什么不表达mRNA
先提取RNA,反转录成cDNA,然后根据目的基因设计PCR引物,通过半定量RT-PCR确定目的基因表达.
正因为检测的是mRNA,所以要先反转录成cDNA才能PCR.
自己操作的难度比较大。一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉,打不好是没有效果的。最好去专业医疗机构医院或者诊所,那里会比较专业。效果也比较好.
求助各位大神
RT,找公司做的稳转Hela和HepG2细胞株拿回来以后培养总是出问题。细胞寄到后显微镜下观察,状态良好。长满传代后,一瓶出现大量漂浮不贴壁的情况,一瓶贴壁后生长出现成团,生长缓慢的情况(传代后有显微观察,分散良好没有成团),一瓶传至第三代后,14h后显微观察,大量漂浮贴壁情况差。
培养基为DMEM,10%FBS,5%CO2,是随细胞寄过来的培养基。
求各位大神帮忙分析下原因,是我毕业课题,突然出现这样的问题,不想研三再换课题了。
万分感谢!
6kb并不大,作为质粒转染是没有问题的。
至于到底好不好转就跟你的细胞有关了,和细胞是否是稳转株关系不大。
帮同学问:最近要筛选一个人肺癌细胞稳定
转染株,用什么方法比较好呢?目的细胞是人肺癌细胞,在其他地方看到有的用质粒,有的用慢病毒进行稳定株筛选,两种方法有什么区别呢,具体操作是什么呢?望有大神告知
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,结果是短暂的高水平表达,可在外源基因导入细胞24~96h内检测表达效果,表达水平与位置无关,不会受到周围染色体元件的影响。超螺旋质粒转染更倾向于瞬时表达。
对于瞬时转染的检测:如果有报告基因,就通过报告基因的表达看转染成功与否;没有报告基因的话,就在24~96h内收获细胞通过RT-PCR和WB来鉴定。
稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说(由细胞类型决定),形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染(transient transfection)的效率低1到2个数量级。利用可选择的遗传标记物有利于从非转染细胞的中分离出稀少的稳定转染物
之前
转染了带GFP的质粒,冻存估计有半年了拿来复苏,想做后续实验,结果稳转的细胞荧光少还很弱,请问怎么办?急急急!
有人有用过吉凯的GV248慢病毒吗,关于胃癌方面的,小弟在构建Lnc
RNA干扰的稳转胃癌细胞SGC-7901株,转想请问这种
细胞株嘌呤霉素的筛选浓度是多少,如何进行筛选?
准备研究一抑癌基因在肿瘤细胞中的过表达的细胞学实验及动物实验,最近做稳转发现细胞不扩增,零星几个一直贴在皿里。对照的无抑癌基因的
载体稳转效果就不错,药物筛选11天,发现有很多克隆出现了。试问:1)抑癌基因的研究一定要稳转的细胞吗?瞬转难道不也能说明一些问题吗?2)对于动物实验,稳转的
细胞株是最好的,但是如果老是筛选不出稳转的细胞克隆有没有代替的方法?3)大家有什么好的经验来筛选抑癌基因的
稳转细胞株克隆。
最近做这个实验感觉像是在和细胞较劲儿,呵呵。
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做,操作是否稳定。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染:先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.