PCR仪使用手册下载_Word模板
| 提供商： | 沃登医学 |
| 服务名称： | 稳转细胞株构建 |
一、服务介绍
本公司构建稳转细胞株的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选，最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418来代替新霉素进行选择性筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的稳转细胞株。
我们有着多年构建稳转细胞株的经验，已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad、GIST-T1、HEK293、293T等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。
二、服务内容
1.载体构建：将外源基因构建到合适的载体上，如需病毒转染，则包装病毒；
2.筛选浓度测定：以10-14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度；
3.细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖；
4.细胞转染：用构建好的载体（或包装好的病毒）转染目的细胞；
5.抗生素筛选；
6.鉴定筛选结果。
本公司构建稳转细胞株的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选，最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418来代替新霉素进行选择性筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的稳转细胞株。
我们有着多年构建稳转细胞株的经验，已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad、GIST-T1、HEK293、293T等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。
二、服务内容
1.载体构建：将外源基因构建到合适的载体上，如需病毒转染，则包装病毒；
2.筛选浓度测定：以10-14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度；
3.细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到60%-80%覆盖；
4.细胞转染：用构建好的载体（或包装好的病毒）转染目的细胞；
5.抗生素筛选；
6.鉴定筛选结果。
HMSC-ad稳转细胞株
三、服务说明
1.客户提供：待处理细胞株（如需公司提供请说明）；
2．构建质粒（可选，需另付费），合成siRNA等（可选，需另付费）；
3. 实验周期：1-2个月；
4.若另有疑问欢迎向本公司咨询，我们将竭诚为您服务。
四、质量承诺
1.稳定转染的细胞系；
2．权威的实验报告；
3.详细的实验步骤；
4.真实的原始实验数据。
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发布于 ： 2021-07-28
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