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Gentarget/Luciferase (firefly) and CRE stable cell line (GFP-Blasticidin)/SC021-GB/1 Ea
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Gentarget/Luciferase (firefly) and CRE stable cell line (GFP-Blasticidin)/SC021-GB/1 Ea
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Gentarget
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TransformedfromHEK293cellsbylentiviralsystemwith sequenceverifiedfireflyluciferase geneII andCRE recombinase.  Luciferaseand CREwasco-expressedunderCMVpromoterasseperatedprotein(notasfusion). TheGFP-BlasticidinfusindualMarkerwasexpressedunderRsvpromoter.Thecellconstitutivelyco-expressesbothfireflyLuciferaseandCRE.

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Cat#SC021-GB

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2021-07-17
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稳定表达细胞株(稳转细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。 在基因功能的 查看更多>
2021-07-22
实验周期太长?实验室条件受限,不准用病毒?夏季来临了,想去度假!别担心,都交给我们吧!过表达慢病毒稳转株促销大行动已开始。和元生物倾情回馈新老客户!还等什么,赶紧行动吧! 活动时间: 2015年5月15日—2015年10月30日活动内容: 针对同一基因、同一载体:1个稳转株12800元;2个稳转株15800元;3个稳转株17800元;服务流程: 注:如果您提供的感染细胞的MOI值过高,价格和周期上会有变动哦! 本次活动最终解释权归和元生... 查看更多>
上海诺百生物科技有限公司在发布的稳转细胞系构建供应信息,浏览与稳转细胞系构建相关的产品或在搜索更多与稳转细胞系构建相关的内容。 查看更多>
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转染(transfection)专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的生命过程。从本质上讲,和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化,其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上,人们往往也通称转染为广义的... 查看更多>
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PREPARING CELLSBring up HUVEC and fibroblasts in M199/10% FBS/Pen-Strep (1:100) 1-2 days before beading. Switch medium to EGM-2 (Clonetics) the day before bead 查看更多>
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自己操作的难度比较大。一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉,打不好是没有效果的。最好去专业医疗机构医院或者诊所,那里会比较专业。效果也比较好.
如题,需要对一株肝癌细胞构建稳转细胞株成默其中的一个基因,上海有哪家公司做这个效果比较好的呢?有知道的站友麻烦推荐一下谢谢。
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
稳定转染VS瞬时转染123
qydsmile2021-08-21
可以做了 又不用表达个几十天的
构建稳转细胞系123
gleb7532017-10-02
稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说(由细胞类型决定),形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染(transient transfection)的效率低1到2个数量级。利用可选择的遗传标记物有利于从非转染细胞的中分离出稀少的稳定转染物

我用腺病毒感染稳转细胞株,用到50微升的量都感染不起来,荧光不表达,PCR验证不出来?求问如果用polybrene该怎么加,转染之前预处理还是加病毒的时候加进去?

稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒。
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做,操作是否稳定。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
假阳性高稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,费时,但是成功率很低,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒
稳转细胞系常用的方法有脂质体转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,脂质体法筛单克隆时间耗时长,假阳性高,且效率低,大概只有1%。病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐。
如果经费充足的话可以找公司包装病毒,如武汉的普健可以提供各种载体的构建及细胞株构建的技术服务。
请问细胞转染质粒后想获得稳定细胞系,是先用流式细胞仪筛选后再用抗性培养基筛选吗?一般是转染后多久开始进行筛选
应该是通过病毒载体质粒上的标记基因比如说荧光的eGFP或者带嘌呤霉素抗性基因的用嘌呤霉素筛选吧!