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Gentarget/Luciferase (firefly), Hela stable cells, (Blasticidin)/SC032-Bsd/1 Ea
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Gentarget/Luciferase (firefly), Hela stable cells, (Blasticidin)/SC032-Bsd/1 Ea
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Gentarget
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TransformedfromHelacellsbylentiviralsystemwith sequenceverifiedfireflyluciferase gene. LuciferasewasexpressedunderCMVpromoter,ABlasticidinantibioticMarkerwasexpressedunderRsvpromoter.ThecellconstitutivelyexpressLuciferaseenzyme.Pleaseseedetails in Productmanual.

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Cat#SC032-Bsd

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慢病毒/稳转株酷爽套餐!----锐赛生物夏日活动 来源:上海锐赛生物技术有限公司2013-7-1 访问量:2688评论(0)标签: R&S/锐赛生物 慢病毒 稳转株 构建 细胞 上海锐赛夏季慢病毒-稳转株酷爽套餐!活动期间,将同一基因的干扰慢病毒包装与稳转株构建同时委托给锐赛生物,即可享受6.7折的稳转株酷爽套餐,预期完成时间可缩短至9周。 ... 查看更多>
Let human ES cells grow until the colonies are large and the cells are pretty piled up - about the time when you would normally split or even a day past that.T 查看更多>
based on splitting onto on plateWarm collagenase media to 37°C in a water bath.Aspirate media off of cell culture plate.Add the following amount of collagenase 查看更多>
检验科独立只是美丽的误解最近一篇网文火爆全国,就是检验科将被独立出医院的传闻。说是传闻也不完全正确,国家卫计委确实下发了文件,不过解读人不同可能有不同的理解。而且文中提到的实验室不包括医院的检验科,所以检验科独立成为法人短时间内还是不可能的。所以对于文件,大家一定要亲自看全文,而且也要看附件信息,微信传的东西看看就好,包括笔者这篇 查看更多>
简介: 【HEL-2细胞】,细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员,可提供复苏细胞,冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前,最好的细胞售后,为老师们提供放心科研细胞。具体详情请致电咨询。详细说明:  【HEL-2细胞】产品特点:细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员,可提供复苏细胞,冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前,最好的细胞售后,为老师 查看更多>
上海创翼生物科技有限公司在发布的构建稳转细胞株服务供应信息,浏览与构建稳转细胞株服务相关的产品或在搜索更多与构建稳转细胞株服务相关的内容。 查看更多>
上海吉凯基因化学技术有限公司在发布的Identi™ STR Cas9稳转细胞株系列供应信息,浏览与Identi™ STR Cas9稳转细胞株系列相关的产品或在搜索更多与Identi™ STR Cas9稳转细胞株系列相关的内容。 查看更多>
8 eggs per day, day 7- day 13 cut CAM, wash in precooled PBS, in 10 ml WASH 1 (PBS, 5 mM EDTA, COMPLETE) on ice cut in pieces in petri dish on ice centrifuge 4 查看更多>
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实验原理       稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。        瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天);外源基因的表达水平不... 查看更多>
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X-gal staining of embryosProtocol supplied by S. P. Yee (spyee@julian.uwo.ca) and Joe Chan (cchan@hgmp.mrc.ac.uk).ProcedureDissect embryos in PBS Immediately t 查看更多>
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行阶梯形矩阵_123
zf30272021-08-07
如题,我用PIRES2-EGFP(带/不带目的基因)转染HCT-116,G418筛选,筛选浓度为800µg/ml,两周后发现克隆要么不带荧光,要么荧光很淡,几乎看不出细胞的轮廓,估计挑出来也没用,请问这是什么原因,我下一步该怎么办?
1、请教各位老师,转染质粒DNA的HepG2及HUH7细胞,如何筛选稳转细胞株
2、有限稀释法有没有protocol?
稳定细胞株筛选123
流苏紫光2021-07-22
转染人MGC803细胞,用嘌呤霉素筛选,已经筛选几个月了,每次都失败告终,时间有限,是在是着急。各位大神,有人做稳转的求指导。**!
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
G418是常用的一种,还有很多药物可以用来筛选稳定株,比如puro等,就看你的细胞或质粒带什么抗性了。
siRNA干扰常见问题123
有恃无恐03502021-07-31
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。
推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
构建稳转细胞系123
gleb7532017-10-02
稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说(由细胞类型决定),形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染(transient transfection)的效率低1到2个数量级。利用可选择的遗传标记物有利于从非转染细胞的中分离出稀少的稳定转染物
6kb并不大,作为质粒转染是没有问题的。
至于到底好不好转就跟你的细胞有关了,和细胞是否是稳转株关系不大。
基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株
一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.
脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.
脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染:先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.
病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
制备成功稳定转染细胞株后,能否再用瞬时转染的方法转入其它质粒?
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒包装可能相对比质粒构建难度大,如果经费充足可以直接找公司包毒的。
不能,它有Neomycin基因,可以用新霉素进行稳定株筛选,获得稳定株。