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eEnzyme/5-Hydroxytryptamine (Serotonin) Receptor 6 (HTR6) ACTOne Stable Cell Line/CL-01-HTR6
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eEnzyme/5-Hydroxytryptamine (Serotonin) Receptor 6 (HTR6) ACTOne Stable Cell Line/CL-01-HTR6
品牌 / 
eEnzyme
货号 / 
CL-01-HTR6
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CL-01-HTR6

Name

5-Hydroxytryptamine (Serotonin) Receptor 6 (HTR6)ACTOneTM Stable Cell Line

Description

This cell line is a HEK-293-CNG cell line that expresses a recombinant human HTR6. HEK-293-CNG cells express a modified CNG (Cyclic Nucleotide Gated) channel that opens in response to elevated intracellular cAMP levels and consequently result in ion flux and cell membrane depolarization. The assay allows both end-point and kinetic measurement of intracellular cAMP changes with a FLIPR or a fluorescence microplate reader.

Application

cAMP dependent human HTR6cell-based assay;

cell-based high-throughput screening of human HTR6 agonists/antagonists.

Size

1x 106 cells

Detection

FlexStation or Microplate reader

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★服务描述 shRNA稳转株是指能持续稳定表达干扰特定基因shRNA的细胞。RNA干扰是基因功能研究中最常用的手段之一。我公司利用慢病毒将shRNA序列整合入细胞基因组,并通过慢病毒载体携带的抗性基因(通常为新霉素,嘌呤霉素,潮霉素)筛选出稳定转染shRNA的细胞,使其成为shRNA稳定转染细胞系。★服务内容 1:shRNA干扰靶点序列的设计; 2:shRNA 慢病毒质粒的构建; 3:shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定; 4... 查看更多>
沃登医学在发布的稳转细胞株构建供应信息,浏览与稳转细胞株构建相关的产品或在搜索更多与稳转细胞株构建相关的内容。 查看更多>
PREPARING CELLSBring up HUVEC and fibroblasts in M199/10% FBS/Pen-Strep (1:100) 1-2 days before beading. Switch medium to EGM-2 (Clonetics) the day before bead 查看更多>
上海锐赛生物技术有限公司在发布的细胞的稳转株构建供应信息,浏览与细胞的稳转株构建相关的产品或在搜索更多与细胞的稳转株构建相关的内容。 查看更多>
上海吉凯基因化学技术有限公司在发布的Identi™ STR Cas9稳转细胞株系列供应信息,浏览与Identi™ STR Cas9稳转细胞株系列相关的产品或在搜索更多与Identi™ STR Cas9稳转细胞株系列相关的内容。 查看更多>
简介: 【HEL-2细胞】,细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员,可提供复苏细胞,冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前,最好的细胞售后,为老师们提供放心科研细胞。具体详情请致电咨询。详细说明:  【HEL-2细胞】产品特点:细胞库拥有专业细胞实验室及技术人员,可提供复苏细胞,冻存细胞。全国统一最低价格。专业的细胞售前,最好的细胞售后,为老师 查看更多>
上海邦耀生物科技有限公司在发布的稳转株构建技术服务供应信息,浏览与稳转株构建技术服务相关的产品或在搜索更多与稳转株构建技术服务相关的内容。 查看更多>
实验原理       稳定转染就是将外源基因DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。        瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的染色体中,一个宿主细胞中可以存在多个拷贝数,产生短时间内的高水平的表达(只能持续几天);外源基因的表达水平不... 查看更多>
普通细胞,特殊细胞、特殊培养方式另计 查看更多>
hES media has a two week shelf life.hES cells should be cultured in 4, 6, 24, 48, 96 well plates. Growing cells in flasks is not recommended because it is very 查看更多>
服务名称:稳转细胞系构建 查看更多>
Preparation of Copy Standards for PCR GenotypingPCR screens must be designed to detect transgene DNA at the single copy level. To demonstrate this level of sen 查看更多>
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准备研究一抑癌基因在肿瘤细胞中的过表达的细胞学实验及动物实验,最近做稳转发现细胞不扩增,零星几个一直贴在皿里。对照的无抑癌基因的载体稳转效果就不错,药物筛选11天,发现有很多克隆出现了。试问:1)抑癌基因的研究一定要稳转的细胞吗?瞬转难道不也能说明一些问题吗?2)对于动物实验,稳转的细胞株是最好的,但是如果老是筛选不出稳转的细胞克隆有没有代替的方法?3)大家有什么好的经验来筛选抑癌基因的稳转细胞株克隆。
最近做这个实验感觉像是在和细胞较劲儿,呵呵。
构建稳转细胞系123
gleb7532017-10-02
稳定转染或持久的转染是用于建立克隆的细胞系,这种细胞系中转染的目的基因整合到染色体DNA中并指导适量目的蛋白的合成。一般来说(由细胞类型决定),形成稳定转染细胞的效率比瞬时转染(transient transfection)的效率低1到2个数量级。利用可选择的遗传标记物有利于从非转染细胞的中分离出稀少的稳定转染物

我用腺病毒感染稳转细胞株,用到50微升的量都感染不起来,荧光不表达,PCR验证不出来?求问如果用polybrene该怎么加,转染之前预处理还是加病毒的时候加进去?

稳定转染VS瞬时转染123
qydsmile2021-08-21
可以做了 又不用表达个几十天的
真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体,在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。 腺病毒载体携带外源基因较大,可瞬时高表达。 慢病毒载体携带外源基因较小些,但可以重组入细胞基因组,稳定高表达。
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法
6.获得稳转株
稳定细胞株筛选是一个长期的过程,稳定细胞株筛选优化,有许多条件需要摸索,而且是从源头开始①在构建载体时,目的基因直接整合到细胞染色体组上,最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法,因为转染效率没有保证②高表达载体的构建,哺乳动物表达量一直是它自身的缺点,最好根据高表达载体定向的驯化细胞,提高蛋白表达量③细胞的选择,筛选稳定细胞株我们常用的细胞是CHO,中国仓鼠细胞,由于CHO具有诸多的优点因此适合用于筛选稳定细胞株,而HEK293细胞则常用于瞬时转染④后期的筛选,双抗预防污染,筛选细胞的时候抗生素浓度一定要做预实验,而且转染的时候不能有抗生素,关于细胞转染稳定细胞系构建的相关理论
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒包装可能相对比质粒构建难度大,如果经费充足可以直接找公司包毒的。
帮同学问:最近要筛选一个人肺癌细胞稳定转染株,用什么方法比较好呢?目的细胞是人肺癌细胞,在其他地方看到有的用质粒,有的用慢病毒进行稳定株筛选,两种方法有什么区别呢,具体操作是什么呢?望有大神告知

最近因工作需要,欲购进一些生产用的细胞株和瞬转、稳转质粒,大家有什么推荐的品系和公司或网站,谢谢!!!

主要需求:

1.生产或生物制药用的,稳定细胞株如CHO-K1、GS和HEK293/HEK293T,以及与之对应的瞬转、稳转(重组整合)质粒(需详细图谱)。

2.原始或改造细胞株,以及对应质粒,改造细胞株请详述细节,原因,优缺点,安全性等。

3.希望大家积极推荐,实验用、生产用均可,原核、真核都行,网站或品系名称也行,只要大家觉得常用、稳定、安全、高产就行。

4.请有意向的同仁回帖或将详细资料发至我163邮箱:wangqiang23mars@163.com,万分感谢。

可以,除了单靶点外,该技术也可以进行多靶点基因敲除。
制备成功稳定转染细胞株后,能否再用瞬时转染的方法转入其它质粒?