Wnt-C59 was first disclosed in patent WO2010101849 as a potent Wnt signaling modulator. It has IC50 less than 0.11 nM in Wnt-Luc reporter assay for Wnt pathway inhibition. In the study, Wnt-C59 prevents palmitylation of Wnt proteins by Porcupine (Porcn, a membrane-bound O-acyltransferase), thereby blocking Wnt secretion and activity, similar to Wnt inhibitors IWP-2, IWP-3 and IWP-4. But Wnt-C59 is more potent and selective, and has better chemical/physical properties, suitable for in vitro/in vivo studies.
Product Citation
Technical information:
| Chemical Formula: | C25H21N3O | |
| CAS #: | 1243243-89-1 | |
| Molecular Weight: | 379.45 | |
| Purity: | >98% | |
| Appearance: | Pale Yellow solid | |
| Chemical Name: | 2-(4-(2-methylpyridin-4-yl)phenyl)-N-(4-(pyridin-3-yl)phenyl)acetamide | |
| Solubility: | Up to 50 mM in DMSO |
Shipping Condition: The product is shipped in a glass vial at ambient temperature.Storage: For longer shelf life, store solid powder at 4oC desiccated, or store DMSO solution at -20oC.
Reference:
| 1. | Dai Chen et al. (N-(HETERO)ARYL,2-(HETERO)ARYL-SUBSTITUTED ACETAMIDES FOR USE AS WNT SIGNALING MODULATORS. PCT WO/2010/101849. |
| 2. | Chen B, Dodge ME, Tang W, Lu J, Ma Z, Fan CW, Wei S, Hao W, Kilgore J, Williams NS, Roth MG, Amatruda JF, Chen C, Lum L. Small molecule-mediated disruption of Wnt-dependent signaling in tissue regeneration and cancer. Nat Chem Biol. 2009;5(2):100-7. |
Other Information:
Product Specification (pdf)MSDS (pdf)
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天然产物,大多都有颜色,
存在干扰,多数情况下需要做样品的阴性对照,
尽量能用荧光的方法,
之前我们做过,将两个试剂盒的方法合并后,做的,
效果还可以
1. 姜黄素是一个典型的HAT抑制剂。
2. 针对P300: 在大约10年前,Cole和他的同事设计出了一种p300/CBP抑制剂,发表在nature杂志上。
希望能帮到你,望采纳!
2.微孔板:选择实验所需的板条数。剩余不用的部分随同干燥剂密封放回原袋。 1.包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板(Anti-InhibinB-CoatedMicrotitrationStrips):96孔,2-8ºC下密封保存。
2.标准品A/样本稀释液(InhibinBStandardA/SampleDiluent):2ml×1瓶,胎牛血清,含0pg/mL二聚体抑制素B。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
3.标准品B-G(InhibinBStandardsB-G):1ml×6瓶,胎牛血清,含二聚体抑制素B的浓度为10,30,100,250,500,1000pg/mL。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
4.质控(InhibinBControls):1ml×2瓶,浓度I、II,胎牛血清,含低浓度和高浓度的抑制素A二聚体。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
5.样本稀释液A(InhibinBSampleBufferA):10ml×1瓶,2-8ºC下保存。
6.样本稀释液B(InhibinBSampleBufferB):10ml×1瓶,2-8ºC下保存。
7.抗体-生物素结合物(InhibinBAntibody-BiotinConjugate)(即用型):10ml×1瓶,含生物素标记的抗抑制素a亚单位抗体。2-8ºC下保存。
8.酶结合物(浓缩)(Streptavidin-EnzymeConjugate)(即用型):10ml×1瓶,含链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。2-8ºC下保存。
9.TMB底物溶液(TMBChromogenSolution):15ml×1瓶,2-8ºC下保存。
10.终止液(StoppingSolution):15ml×1瓶,为0.2M的硫酸。2-8ºC下保存。
11.浓缩洗液(WashConcentrate):100ml×1瓶,2-8ºC下保存。 操作前所有试剂都应平衡至室温(~25ºC)并充分混匀。标准品、质控及待测样本需同时做双份。
1.取出实验所需板条,并记录各孔位置。
2.在对应的孔中加入标准品、质控及待测样本各50ul。
3.每孔加入25ul样本稀释液A。
4.每孔加入25ul样本稀释液B。
5.封板,以300-400rpm速度震荡,室温下过夜(14-18小时)。
6.洗板3次,在吸水纸上拍干。
7.每孔加入50ul抗体-生物素结合物。
8.封板,以500-700rpm速度震荡,室温下孵育1.5小时。
9.洗板6次,在吸水纸上拍干。
10.每孔加入50ul链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。
11.封板,以500-700rpm速度震荡,室温下孵育20分钟。
12.洗板6次,洗完最后一次以后,将洗液在孔内停留15分钟再除去。在吸水纸上拍干。
13.在每孔中加入100ulTMB底物溶液。
14.以500-700rpm速度震荡,室温下避光孵育15-30分钟。
15.每孔加入100ul终止液。
16.30分钟内在450nm处读数。
注:必须以零标准作空白。如果能做到双波长测定,可在600或620nm处读数,将600(620)nm吸收值从450nm处减去,这样可以减少光学误差。 使用血清样本,静脉穿刺术采集血液。样本于2-8ºC可保存24小时,-20ºC或以下可保存30天。避免反复冻融样本。不应采用溶血或脂血的样本。冰冻的样本在实验前应解冻,并充分混匀。向左转|向右转
RMgX + RX = R-R + MgX2.
这个反应需要的能量比生成格氏试剂的高,
因此降低反应温度是第一个选择。
其次, 增加镁得摩尔比, 让 RX与镁有更多机会反应, 而不是与RMgX。
第三, 降低RX的浓度, 即用更多的溶剂, 因为溶剂和格氏试剂有很显著的溶剂络合。
第四, 缓慢滴加RX., 即降低RX.在反应体系的浓度。
第五, 增加搅拌速率, 即, 让RX.与镁有更好的接触。
我做的是细胞因子的刺激和抑制某条通路后观察是否有影响,分组为空白组,空白+抑制剂,刺激组,刺激+抑制剂,最开始用的单因素方差分析,LSD-T和SNK-Q检验,但是同学说我这里面有两个处理因素,所以不能单因素方差分析,应该直接空白和空白+抑制,空白和刺激,刺激和刺激+抑制剂进行独立样本T检验,现在脑子是混乱的,拜托园子里的大神们帮我看看,感激不尽!!
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FibrOut™ 是一种包含几种生化复合物和试剂的完整系统,它在原代细胞培养中能抑制成纤维细胞增殖,从而促进靶细胞生长。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞,经验证可与对应原代细胞培养试剂盒-PrimaCellTM高效协同工作,可为您带来每一类原代细胞培养的最好结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。成分包括 (1)胰蛋白酶;(2)胶原酶;(3)D-缬氨酸;(4)顺式羟基脯氨酸;(5)硫柳汞;(6)苯巴比妥;(7)系列血清替代品;(8)抗中胚层带抗体。
参考文献:
1. Cancer Res. 2010 May 1;70(9):3537-46,Epub 2010 Apr 20. Requirement of the NF-kappaB subunit p65/RelA for K-Ras-induced lung tumorigenesis. Bassères DS, Ebbs A, Levantini E, Baldwin AS.
2. Nat Commun. 2013;4:1795. Recruitment of mesenchymal stem cells into prostate tumours promotes metastasis. Jung Y, Kim JK, Shiozawa Y, Wang J, Mishra A, Joseph J, Berry JE, McGee S, Lee E, Sun H, Wang J, Jin T, Zhang H, Dai J, Krebsbach PH, Keller ET, Pienta KJ, Taichman RS.
3. Mol Biol Cell. 2012 Jul;23(14):2755-69. Calcium-calmodulin kinase I cooperatively regulates nucleocytoplasmic shuttling of CCTα by accessing a nuclear export signal. Agassandian M, Chen BB, Pulijala R, Kaercher L, Glasser JR, Mallampalli RK.展开

