原代软骨细胞分离培养 实验方法
以兔软骨细胞为例：
①一般根据实验要求，选取不同年龄组的兔子，实际上兔子的年龄越小越好，毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力，耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨，剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜，放入盛有PBS液的培养皿中。
②将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块，移入25cm2培养瓶，用含双抗的PBS液冲洗软骨3次。
③加入软骨体积10-15倍的0.25%胰蛋白酶，37℃消化１－２小时后终止消化。
④加入0.02%II型胶原酶，37℃消化17-20小时（也就是过夜），这是我们实验室长期摸索出来的方法，虽然比较浪费时间，但是获得的细胞活力确实不错。
⑤在倒置显微镜下观察，当游离出单个细胞后，加入DMEM培养液将II型胶原酶稀释终止消化。
⑥将细胞团吹打成单个细胞后用200目滤网过滤，收集滤液，1500r/min离心5min。
⑦弃上清，加入DS培养液重悬，0.2%台盼蓝染色，活细胞率大于90%，CO2培养箱孵育。
您知悉并同意，丁香通平台展示产品并非为平台自身产品，您发起询价或试用申请后，平台将会把您已提供或按要求提供的相关信息同步提供至所咨询的具体产品商家，由商家为您提供具体产品的价格咨询或产品试用注意事项及相关试用产品或完成相应购买，因此您知悉并授权平台将您的信息进行同步共享。您有权拒绝，但您知悉将无法参加询价或试用活动。
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2018-12-26
阅读（150）
▍
相关分类
▍
相关文章
【求助】SDSPAGE电泳 经验共享
细胞支原体污染的一般情况及预防措施 实验方法
间充质干细胞冻存液,制备方法及其冻存方法
Histag蛋白纯化树脂（镍柱）_价格厂家供应商_上海康朗生物科技有...
CellnTec公司,CellnTec代理商,CellnTec经销商,CellnTec厂家直 ...
请教一下,一抗是小鼠来源的IgA抗体,二抗可以用羊抗小鼠的Ig G抗体...
santa cruz中国 santa cruz中国代理品牌:santa cruz美国网
standard是什么意思_standard的翻译_音标_读音_用法_例句 ...
体内肝损伤模型(酒精)资讯
我科学家成功研制新一代微型显微镜中国社会
骨骼肌卫星细胞纯化及培养的实验研究
【脱氧核糖核酸酶 (DNase I)//ULTRA PURE GRADE】价格_厂家 中国供应...
