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Gibco/FreeStyle MAX Reagent/10 x 15 mL/16447750
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Description
FreeStyle™MAXReagentisaproprietary,animalorigin–freeformulationfortransfectingplasmidDNAintoeukaryoticcellsthatcaneasilybescaleduptoproducelargeamountsofrecombinantproteins.FreeStyle™MAXReagentallowsthehighestexpressionlevelsandtransfectionrateswithlowestcytotoxicityinbio-productionapplications,andisspecificallyformulatedforusewith:•FreeStyle™293-FCells(sUSPensionhumanembryonalkidneycells,Cat.No.R790-07)inserum-freeFreeStyle™293ExpressionMedium(Cat.No.12338-018)
•FreeStyle™CHO-SCells(suspensionChineseHamsterOvarycells,Cat.No.R800-07)inserum-freeFreeStyle™CHOExpressionMedium(Cat.No.12651-014)
•DG44Cells(DHFR–suspensionCHOcells)inCDDG44Mediumwith8mML-glutamineand18mL/L10%Pluronic®F-68(Cat.No.A11000-01)
Productuse
FreeStyle™MAXReagentisintendedforusewiththeFreeStyle™MAX293ExpressionSystem(Cat.No.K9000-10)andtheFreeStyle™MAXCHOExpressionSystem(Cat.No.K9000-20).
ForResearchUseOnly.Notforuseindiagnosticprocedures.
Figures
Proteinproductioncomparison—suspensionCHOcellsandstablecelllinesystems.
ProteinproductionaftertransienttransfectionofFreeStyleâ„¢CHOCells.
Specifications
| CellType: | EstablishedCellLines |
|---|---|
| SampleType(Specific): | PlasmidDNA |
| Classification: | AnimalOrigin-Free |
| TransfectionTechnique: | Lipid-BasedTransfection |
| SerumCompatIBLe: | Yes |
| HighThroughputCompatibility: | NotHighThroughput-Compatible(Manual) |
| ProductLine: | Freestyle™ |
| ProductSize: | 1mL |
| ShippingCondition: | WetIce |
Contents&storage
Eachunitcontainsonevialofreagent.Storeat+4°C.FreeStyle&tradeMAXisguaranteedstablefor6monthswhenstoredproperly.
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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2021-07-17
SignaGen转染试剂的比较和特点 转染细胞广谱：转染几十种哺乳动物细胞和/或难转染细胞以及悬浮细胞 转染形式多样：转染DNA、mRNA、siRNA、miRNA、shRNA以及共转染DNA/RNA 转染技术优化提升：生物可降解聚合物的合成、增强型脂质体构建和PDCC优化技术等 转染试剂 转染的分子 特性 PolyJet™ 长DNA片段(<89kb... 查看更多
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2021-08-07
SignaGen 是一家专注于开发和生产基因转导工具的企业，服务于生物医学研究领域。借助我们独有的技术平台（美国专利商标局号码为 072308 和 61135606），SignaGen 已经成功开发出三大类 DNA/siRNA 转染试剂，经验证我们的产品比市场上主导产品效率更高，细胞毒性更低。更重要的是我们提供一个合理的价位。 查看更多更新引用文献 more info Recent Product & Service Cit... 查看更多
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2019-03-05
Polyplus-transfection转染试剂特约代理商 查看更多
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2021-07-26
转染试剂选择与介绍在选择转染方法时，需考虑您希望输送的运载物（DNA、RNA或蛋白质）以及您希望转染的细胞类型。您可通过下表选择Life Technologies™的各类阳离子脂质体转染试剂和Neon®转染系统.我们提供了各种DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA输送选择，让您可以对自己的结果更加自信. 卓越的输送效果—可转染多种类型的细胞 无毒性作用—您之所以能看到结果，是因为核酸存在，而不是因为试剂 需要的优化工作更少—针对大多数... 查看更多
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2021-08-05
上海权阳生物科技有限公司在发布的siRNA 转染试剂供应信息，浏览与siRNA 转染试剂相关的产品或在搜索更多与siRNA 转染试剂相关的内容。 查看更多
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2021-08-06
SignaGen 是一家专注于开发和生产基因转导工具的企业，服务于生物医学研究领域。借助我们独有的技术平台（美国专利商标局号码为 072308 和 61135606），SignaGen 已经成功开发出三大类 DNA/siRNA 转染试剂，经验证我们的产品比市场上主导产品效率更高，细胞毒性更低。更重要的是我们提供一个合理的价位。 查看更多更新引用文献 more info Recent Product & Service Cit... 查看更多
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2018-08-10
X-tremeGENEsiRNA转染试剂是由sigma-aldrich西格玛奥德里奇（上海）贸易有限公司代理或销售的ROCHE品牌的试剂，产品来源于瑞士。sigma-aldrich西格玛奥德里奇（上海）贸易有限公司是中国最权威的X-tremeGENEsiRNA转染试剂试剂销售服务商之一，在上海等地方销售X-tremeGENEsiRNA转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业X-tremeGENEsiRNA转染试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的X-tremeGENEsiRNA转染 查看更多
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2021-08-01
Promega FuGENE® 转染试剂优惠不断，促销时间：截止2017.12.31FuGENE® 6 和 FuGENE® HD 转染试剂：均为非脂质体制剂，用于将DNA转染到多种细胞系中，高效低毒。该方案无需去除血清或培养基，导入试剂/ DNA复合物后，也无需洗涤或更换培养基。FuGENE® HD转染试剂不含任何动物来源成分。FuGENE® 转染试剂的特点1. 更具生物相关性：毒性更低，对生理过程影响更小。2. 操作简单：无需更... 查看更多
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2021-09-10
济南思科生物科技有限公司在发布的LipoJet™转染试剂盒供应信息，浏览与LipoJet™转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与LipoJet™转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2019-07-04
磷酸钙法细胞转染试剂是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Yeasen品牌的试剂，产品来源于Yeasen。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的磷酸钙法细胞转染试剂试剂销售服务商之一，在浦东新区等地方销售磷酸钙法细胞转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业磷酸钙法细胞转染试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的磷酸钙法细胞转染试剂产品 查看更多
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2019-06-02
汉恒生物科技（上海）有限公司在发布的Lipo系列高效低毒细胞转染试剂供应信息，浏览与Lipo系列高效低毒细胞转染试剂相关的产品或在搜索更多与Lipo系列高效低毒细胞转染试剂相关的内容。 查看更多
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体外siRNA转染试剂是由上海新睿生物科技有限公司代理或销售的SignaGen品牌的试剂，产品来源于美国。上海新睿生物科技有限公司是中国最权威的体外siRNA转染试剂试剂销售服务商之一，在上海等地方销售体外siRNA转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业体外siRNA转染试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的体外siRNA转染试剂产品 查看更多
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细胞转染几天后就死亡,是什么原因? 细胞技术讨论版论坛123
duocaihui2021-07-24
我转的是7901、7901/DDP两种细胞，前者7901细胞很容易就转上，并且转后，状态良好，可是7901/DDP一转就死，我用的是吉玛慢病毒，转24小时后换液，刚开始一两天，没有异常，但后来细胞慢慢就死了，并且不是漂浮的，很多是贴着壁死，像是瓦解了一样
这是未转时细胞的样子
这是细胞转后，死亡的样子
并且即使是有些细胞未死，细胞后来也变得很脏，感觉有很破碎的细胞碎片
本人实验小白，**园子里大神指点，急，实在不知道怎么回事
【求助】瞬时转染测周期,如何将细胞同步化? 核酸基因技术讨论版...123
神马4pF2017-10-02
我目前遇到的瞬时转染，没有专门做细胞同步化的。
但是有在转染前，将细胞进行重新传代的情况，这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1）接种在孔板中，于37℃， 5%CO2 的条件下进行培养，18-24小时（ sf9细胞为3-4小时）后转染。”
但是有在转染前，将细胞进行重新传代的情况，这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1）接种在孔板中，于37℃， 5%CO2 的条件下进行培养，18-24小时（ sf9细胞为3-4小时）后转染。”
细胞转染,有许多孔的细胞死了,什么原因? 分子生物 综合其他 小...123
福州吧壹母T漎2017-10-02
转染试剂有的毒性很大，要准时换液。可以换个低毒性的试试。或者你转染的东西有致死性。
转染前细胞长到多少比较合适做实验 123
蘑菇头丌Nj6R2021-08-18
细胞 （英文名：cell）并没有统一的定义，比较普遍的提法是：细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说，细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成，即单细胞生物，高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类，但也有人提出应分为三类，即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。细胞体形极微，在显微镜下始能窥见，形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成，表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁，细胞质中常有质体，体内有叶绿体和液泡，还有线粒体。
转染后,细胞发生死亡怎么回事 123
KyoyaRB352017-10-02
可能有多种原因：
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
【求助】真核表达,基因克隆时是否要考虑3·端非翻译序列。123
sen4042021-08-09
细胞转染可以：（1）真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志；（2）应用于转基因动植物；（3）应用于生物制药、基因治疗、RNA干扰。
脂质体介导法
实验原理
上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。
利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
脂质体介导法
实验原理
上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。
利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
细胞转染,为什么有许多孔的细胞死了?_123
qingwudarao2021-07-27
【求助】求助啊!!!转染hek293细胞用什么转染试剂呢? 实验方法 ...123
jiang39672021-08-07
求助:细胞转染相关问题 细胞技术讨论版论坛123
cannelchen2017-02-13
【求助】贴壁细胞转染后可传代吗? 细胞技术讨论版论坛123
静°14642021-08-14
可以传代。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
【求助】稳定转染后怎么挑单克隆? 细胞技术讨论版论坛123
Tbji丶鼬ゅ2021-08-13
无限稀释法，就是铺到96板的一个孔，然后倍数稀释下去，到最后就会有一个细胞的孔，还有就是细胞计数，然后再铺96孔，也会出现一个细胞，但是对于挑单克隆来说，我觉得没必要单个细胞，单个细胞也不容易长起来，虽然挑克隆可能是混转的，但是不会影响实验需求。
大家都是用什么方法挑选细胞单克隆的
单克隆：单克隆是指‘子代来源于一个母体.
细胞培养：细胞的大规模克隆.细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞.
单克隆一般常指动植物细胞的克隆,细胞培养一般是指动物、微生物等细胞的细胞克隆.
二者没有什么明显区别.单克隆在单克隆抗体制备中比较常见.其实是对骨髓瘤细胞的细胞培养.
大家都是用什么方法挑选细胞单克隆的
单克隆：单克隆是指‘子代来源于一个母体.
细胞培养：细胞的大规模克隆.细胞培养,既包括微生物细胞的培养,细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞.
单克隆一般常指动植物细胞的克隆,细胞培养一般是指动物、微生物等细胞的细胞克隆.
二者没有什么明显区别.单克隆在单克隆抗体制备中比较常见.其实是对骨髓瘤细胞的细胞培养.
细胞转染 实验方法 123
一直攀爬的蜗牛2021-07-31
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