产品英文名称：AlexaFluor®488annexinV/DeadCellApoptosisKitwithAlexa®Fluor488annexin
VandPIforflowcytometry
产品中文名称：AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞凋亡检测试剂盒
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AnnexinVandPI双染色流式法细胞凋亡检测试剂盒产品介绍：
细胞凋亡是一个精细调节的程序性细胞死亡过程。疾病状态，例如患老年痴呆症或恶性肿瘤时会出现细胞的非正常性凋亡调节。细胞凋亡不同于坏死或突发性细胞死亡，它表现出特定的形态变化，生物化学性变化，包括细胞紧缩、核染色质破碎、细胞质皱缩和细胞膜不对称性丧失等。
检测原理：正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）分布在双层磷脂质的内层。但在凋亡细胞中，PS会转移到磷脂质外层，因此PS就暴露在细胞外环境中。白细胞凋亡时，PS分布到磷脂质外层是细胞识别的特有标记，并且启动吞噬细胞吞噬。人抗凝血剂AnnexinV是一个分子量35-36kDa的Ca2+依赖型磷脂结合蛋白质，对PS有高亲和性。标记有荧光基团或生物素基团的AnnexinV可以鉴定出结合到PS的凋亡细胞。
碘化丙啶（propidiumiodide，PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在细胞凋亡中晚期的细胞和死细胞，碘化丙啶（propidiumiodide，PI）能够透过细胞膜而使细胞核红染。该试剂盒利用了明亮绿色荧光AlexaFluor488annexin和红色荧光碘化丙啶（PI）核酸染料的即用型溶液。用AlexaFluor®488annexinVandPI进行细胞群染色后，凋亡细胞显示绿色荧光，死细胞显示红色和绿色荧光，活细胞显示微弱荧光或不显色。这些不同细胞群可以用流式细胞仪在氩离子激光488纳米线鉴定分别。
AnnexinVandPI双染色流式法细胞凋亡检测试剂盒产品特点：
●快速方便----检测试剂盒中提供已经标记好的AnnexinV-FITC和即开即用型的碘化丙啶（propidiumiodide，PI）。
●荧光更亮----标记好的AnnexinV-FITC中的FITC（fluorescein）是Molecularprobes公司专门研发的AlexaFluorR488dye染料，该染料比普通的FITC染料更好、更亮，可以获得更好的荧光信号和更可靠的实验结果。
●清晰辨识----采用AnnexinV-FITC/PI双染色的流式细胞检测试剂盒进行AnnexinV细胞凋亡检测，可以获得清晰的、易辨别的实验结果：绿色荧光细胞群代表凋亡细胞；红色和绿色细胞群代表死细胞；无荧光或微弱荧光细胞群代表活细胞。
AnnexinVandPI双染色流式法细胞凋亡检测试剂盒产品组份：
PartA:AlexaFluor®488annexinV（250µl）
PartB:Propidiumiodide（PI）（100µl）
PartC:5Xannexin-bindingbuffer（15ml）
Invitrogen创立于1987年，公司总部设于加利福尼亚州卡尔斯巴德市。我们为制药和生物技术公司以及学术研究和政府科研机构提供生命科学相关产品与服务。2006年Invitrogen公司（纳斯达克股票代码IVGN），年营业额达12亿美元。作为一家全球性的跨国公司，Invitrogen现有员工4,800余名，在全球超过70个国家和地区设有分支机构。我们为全球的科研工作者提供25,000余种产品和服务，支持疾病研究、新药研发和商业性生物生产。Invitrogen中国总公司，凭借丰富经验，集中人力建立了提供合成，测序及其它多种项目服务的实验生产基地，是唯一一个在同行业中引进6西格码（SixSigma）和精益(Lean)管理方法的公司，公司由有着丰富管理经验的黑带大师（MasterBlackBelt）指导，根据数据来不断优化生产流程，降低成本，提高质量，以及提高发货速度.我们有一个强大的集研发和生产于一体的梯队，队员构成中有归国博士，硕士和本科生。另外我们Invitrogen的美国,欧洲,日本的梯队与我们紧密联系,资源共享,共同传递高质量的产品,提供更新更全更快的技术和服务.全面细致的标准操作程序，严格的入职前培训和在职培训。使我们的产品成为成为您的首选品牌.因此我们相信以Invitrogen在全球的合成与测序业务技术力量为后盾，在我们杰出的技术团队的带领下，将会为您提供高质量、全方位和多角度的服务。
Invitrogen旗下包括Invitrogen、Gibco、MolecularProbes、Dynal、Biosource、Caltag、Zymed、Panvera、InforMax、BioReliance等众多行业顶尖品牌。为分子生物、疾病研究，药物研发和生物制品生产等提供全面的技术和服务。
Invitrogen的壮大历程：
2005
Dynal细胞分离与纯化用磁珠、细胞刺激、蛋白质研究、核酸研究和微生物学
Zymed病理学、癌症和细胞生物产品，一般免疫化学试剂
BioAsia引物合成及测序，合并后的公司称为上海英骏生物技术有限公司
2004
DRIDNA纯化产品和其它核酸
Protometrix蛋白质微阵列技术
BioReliance合同服务机构（CSO）假设测试，为全球生物技术和制药公司提供生物药品开发和生产服务
2003
SequiturRNA干扰技术（RNAi）
MolecularProbes为生物研究和药品开发提供分子分类方面的荧光技术
GeniconSciences超敏感信号产生与探测工具和方法
2002
PanVera生物化学、细胞检验和蛋白质收集
InforMax生物信息软件
2000
LifeTechnologies分子生物和GIBCO细胞培养试剂
Ethrog电泳完全附着系统
ResearchGenetics为基因药品开发研究提供cDNA克隆
1999
NOVEX预制电泳胶
ebiomall.com
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其他的特征是：1.由基因控制,2,不引起炎症.3.质膜不破裂,4,染色质DNA的有控裂
凋亡虽是自主的但一般有外界因素刺激,致使信号传导,近而控制基因表达
生物性状是外界环境与基因共同决定的
比如，正常的杨树在北方到秋天会落叶,这是细胞凋亡,程序化的。但是，在南方，它不会在秋天凋亡.因此，细胞凋亡受环境影响。
细胞凋亡首先出现的是细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离，然后是细胞质密度增加，线粒体膜电位消失，通透性改变，释放细胞色素C到胞浆，核质浓缩，核膜核仁破碎，DNA降解成为约180bp-200bp片段；胞膜有小泡状形成，膜内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面，胞膜结构仍然完整，最终可将凋亡细胞遗骸分割包裹为几个凋亡小体，无内容物外溢，因此不引起周围的炎症反应，凋亡小体可迅速被周围专职或非专职吞噬细胞吞噬。
诱因不同：凋亡是受外因，细胞程序性死亡是受内因。
意义不同：凋亡是为了机体健康，意义积极。程序性死亡是顺应基因突变，意义消极。
细胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）是一种基因指导的细胞自我消亡方式。PCD和细胞凋亡的区别在以下方面：PCD是功能性概念，凋亡是形态学概念；PCD的最终结果是细胞凋亡，但细胞凋亡并非都是程序化的；PCD存在于胚胎发育过程中。
接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→进入连续反应过程 细胞凋亡的启动是细胞在感受到相应的信号刺激后胞内一系列控制开关的开启或关闭，不同的外界因素启动凋亡的方式不同，所引起的信号转导也不相同，客观上说对细胞凋亡过程中信号传递系统的认识还是不全面的，比较清楚的通路主要有：
1）细胞凋亡的膜受体通路：各种外界因素是细胞凋亡的启动剂，它们可以通过不同的信号传递系统传递凋亡信号，引起细胞凋亡，我们以Fas -FasL为例：
Fas是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，它与FasL结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。它的活化包括一系列步骤：首先配体诱导受体三聚体化，然后在细胞膜上形成凋亡诱导复合物，这个复合物中包括带有死亡结构域的Fas相关蛋白FADD。Fas又称CD95，是由325个氨基酸组成的受体分子，Fas一旦和配体FasL结合，可通过Fas分子启动致死性信号转导，最终引起细胞一系列特征性变化，使细胞死亡。Fas作为一种普遍表达的受体分子，可出现于多种细胞表面，但FasL的表达却有其特点，通常只出现于活化的T细胞和NK细胞，因而已被活化的杀伤性免疫细胞，往往能够最有效地以凋亡途径置靶细胞于死地。Fas分子胞内段带有特殊的死亡结构域（DD,death domain）。三聚化的Fas和FasL结合后，使三个Fas分子的死亡结构域相聚成簇，吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。FADD是死亡信号转录中的一个连接蛋白，它由两部分组成：C端（DD结构域）和N端（DED）部分。DD结构域负责和Fas分子胞内段上的DD结构域结合，该蛋白再以DED连接另一个带有DED的后续成分，由此引起N段DED随即与无活性的半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）酶原发生同嗜性交联，聚合多个caspase8的分子，caspase8分子遂由单链酶原转成有活性的双链蛋白，进而引起随后的级联反应，即Caspases，后者作为酶原而被激活，引起下面的级联反应。细胞发生凋亡。因而TNF诱导的细胞凋亡途径与此类似
2）细胞色素C释放和Caspases激活的生物化学途径
线粒体是细胞生命活动控制中心，它不仅是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心，而且是细胞凋亡调控中心。实验表明了细胞色素C从线粒体释放是细胞凋亡的关键步骤。释放到细胞浆的细胞色素C在dATP存在的条件下能与凋亡相关因子1（Apaf-1）结合，使其形成多聚体，并促使caspase-9与其结合形成凋亡小体，caspase-9被激活，被激活的caspase-9能激活其它的caspase如caspase-3等，从而诱导细胞凋亡。此外，线粒体还释放凋亡诱导因子，如AIF，参与激活caspase。可见，细胞凋亡小体的相关组份存在于正常细胞的不同部位。促凋亡因子能诱导细胞色素C释放和凋亡小体的形成。很显然，细胞色素C从线粒体释放的调节是细胞凋亡分子机理研究的关键问题。多数凋亡刺激因子通过线粒体激活细胞凋亡途经。有人认为受体介导的凋亡途经也有细胞色素C从线粒体的释放。如对Fas应答的细胞中，一类细胞（type1）中含有足够的胱解酶8 （caspase8）可被死亡受体活化从而导致细胞凋亡。在这类细胞中高表达Bcl-2并不能抑制Fas诱导的细胞凋亡。在另一类细胞（type2）如肝细胞中，Fas受体介导的胱解酶8活化不能达到很高的水平。因此这类细胞中的凋亡信号需要借助凋亡的线粒体途经来放大，而Bid -- 一种仅含有BH3结构域的Bcl-2家族蛋白是将凋亡信号从胱解酶8向线粒体传递的信使。 尽管凋亡过程的详细机制尚不完全清楚，但是已经确定Caspase即半胱天冬蛋白酶在凋亡过程中是起着必不可少的作用，细胞凋亡的过程实际上是Caspase不可逆有限水解底物的级联放大反应过程，到目前为止，至少已有14种Caspase被发现，Caspase分子间的同源性很高，结构相似，都是半胱氨酸家族蛋白酶，根据功能可把Caspase基本分为二类：一类参与细胞的加工，如Pro-IL-1β和Pro-IL-1δ，形成有活性的IL-1β和IL-1δ；第二类参与细胞凋亡，包括caspase2,3,6,7,8,9.10。Caspase家族一般具有以下特征：
1)C端同源区存在半胱氨酸激活位点，此激活位点结构域为QACR/QG。
2)通常以酶原的形式存在，相对分子质量29000-49000(29-49KD），在受到激活后其内部保守的天冬氨酸残基经水解形成大（P20）小（P10）两个亚单位，并进而形成两两组成的有活性的四聚体，其中，每个P20/P10异二聚体可来源于同一前体分子也可来源于两个不同的前体分子。
3)末端具有一个小的或大的原结构域。
参与诱导凋亡的Caspase分成两大类：启动酶（inititaor）和效应酶（effector）它们分别在死亡信号转导的上游和下游发挥作用。向左转|向右转
