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DiscoverX/PathHunter® PD-1 (SHP1) Signaling Bioassay Kit/200dp(2x96-well)/93-1104Y19-00117
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DiscoverX/PathHunter® PD-1 (SHP1) Signaling Bioassay Kit/200dp(2x96-well)/93-1104Y19-00117
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DiscoverX
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The PathHunter PD1 Signaling Bioassay consists of human cells engineered to stably express an ED-tagged immune checkpoint receptor, PD-1, while EA is fused to either the full length or the phosphotyrosine-binding SH2 domain of an intracellular signaling protein, SHP1. Engagement of the receptor by its ligand, or agonist antibodies results in phosphorylation of the receptor’s cytosolic tail. The SH2-domain fused to EA binds the phosphorylated receptor, forcing complementation of ED and EA, resulting in formation of an active β-gal enzyme, which hydrolyzes the substrate to generate a chemiluminescent signal.The bioassay kit contains all reagents needed for the assay including pre-qualified cryopreserved cells, detection reagents, cell plating reagent, positive control agonist, and assay plates.
Target/Description
Programmed cell death protein 1
Group
T cell receptor (inhibitory)
SH2 Domain
SHP1
Cell Background
Jurkat
Species
Human
Accession Number
NM_005018.2
Agonist/Ligand
Anti-PD1 Antibody [NAT105]
Antagonist/Inhibitor
Anti-PD1 antibody [NAT105]
Assay Measures
SH2 Recruitment
Bioassay Target Name
PD-1
Assay Qualified With
Keytruda®
Drug Trademark Owner
Keytruda®is a registered trademark of Merck & Co., Inc.
How it works
The graph is an example of a typical dose-response curve for the PD-1 Signaling Bioassay, generated usingthe protocol outlined in this user manual. The data shows a potent, dose-dependent inhibition of PD-1 activation in Jurkat cells with an anti-PD-1 antibody.

美国EurofinsDiscoverX公司简介EurofinsDiscoverX是一家集开发,生产及定制试剂,细胞和试剂盒的创新型公司,同时公司还为药物研发和生命科学领域提供分析测试服务。我们的生化和细胞水平的assay使得客户大大提升了研发的能力和效率,特别是化合物的筛选,先导化合物的优化,从而加快了新药研发的速度。另外,基于人的原代细胞系统的BioMap平台,可以提供表象性筛选,这一工具可以通过表象相关的信息来解决从研发早期到临床前不同阶段的问题。 2017年DiscoverX公司被EurofinsPharmaDiscoveryServices公司收购。该公司也是业内数一数二的新药筛选测试服务公司。DiscoverX公司的起家是基于β-半乳糖苷酶酶片段互补(EFC)技术。EFC技术是一种已经被证明且广泛应用于各大知名药企的筛选平台技术。基于此技术,我们开发了HitHunter® cAMPassay,β-Arrestin可用于GPCR靶点相关化合物的筛选测试。而依托EFC技术开发的PathHunter®和InCELLHunter™平台,提供了强大的通路分析和化合物筛选的cellbasedassay。出来EFC平台之外,DiscoverX公司还有另一个体外激酶bindingassay核心平台KINOMEscanSM。总得来说,DiscoverX的核心平台为大多数药物靶点的开发提供了解决方案,这些靶点包括GPCR,激酶,嗅域,甲基转移酶,蛋白酶,核受体细胞因子,转录因子以及分泌蛋白等。


DiscoverX®是一家创新型公司,为药物发现、筛选和生命科学市场开发、制造和商业化试剂、完整的细胞分析试剂盒、分析和筛选服务以及其他交钥匙解决方案。我们的生化和细胞分析使客户能够提高其筛选、领导优化和合成孔径雷达活动的研究生产力和有效性,从而加快新药的发现和开发。此外,随着增加了用于表型分析的人原代细胞系统BioMAP®平台,DiscoverX提供了一个强大的工具,为从目标发现到临床前及以后的所有发现阶段提供生理相关的见解和综合解决方案。业务概况DiscoverX成立于2000年,是一家私人控股、风险投资支持的公司,总部位于加利福尼亚州弗里蒙特,在圣地亚哥、南旧金山和英国伯明翰设有办事处。DiscoverX致力于探索研究创新解决方案的开发和商业化。成熟的技术该公司率先使用β-半乳糖苷酶片段互补(EFC)进行发现研究。EFC技术在大多数大型制药公司中都是一个久经考验的成熟筛选平台,我们基于EFC的Hithhunter®cAMP分析是GPCR筛选应用的市场领导者。PathHunter®和InCELLHunter™技术平台是EFC技术的一个改编,是一个创新的、综合的分析系统,它可以实现基于活细胞的分析,用于路径分析和化合物筛选。除了EFC平台,DiscoverX还拥有其第二个核心技术(一种叫做KINOMEscanSM的体外结合分析平台)的广泛知识产权。通过我们的核心技术,DiscoverX能够为每一类主要药物靶点提供分析解决方案,包括GPCRs、激酶、溴化酶、甲基转移酶、蛋白酶、核激素受体、细胞因子、转录因子和分泌蛋白。公司伙伴关系DiscoverX仍然致力于充分开发其EFC以及KINOMEscan技术的商业潜力,无论是单独还是与公司合作伙伴。DiscoverX重视这种伙伴关系,并正在积极寻求更多的合作联盟,以使药物发现和开发市场的新技术平台商业化并提供早期使用机会。


DiscoverX检测试剂DiscoverX提供具有化学发光和荧光读数的检测试剂,可满足您的药物发现计划的各种需求。DiscoverX的化学发光检测基于专有的酶片段互补(EFC)技术,而荧光检测则基于活化的荧光染料。这些检测试剂针对各种应用进行了优化,例如检测基于细胞的蛋白质-蛋白质相互作用,化合物-蛋白质结合,易位和第二信使分析。DiscoverX的检测试剂专为DiscoverX细胞系设计,包括cAMPHunter™,InCELLHunter™或PathHunter®细胞系,InCELL分析以及ProLabel®/PrOlink™(PL/PK)表达或克隆载体。DiscoverX产品亮点灵敏的检测和可重复的结果提供了您可以信赖的可靠测定简单的一步添加方案,非常适合多种基础研究和药物发现应用可从96孔扩展到3456孔格式,与高通量筛选或小型化兼容

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国产ELISA试剂盒阴性对照也显色的困惑:1.可能封闭效果不好2可能封闭液脱脂奶粉可以和一抗交叉反应3.一抗没有洗涤干净4.加样时操作出现错误。先确定封闭有没有问题,洗的话二抗确实多洗几遍没错,没有洗板机,每次洗可以摇晃板子,每遍1-2分钟,也可以多设置几个阴性孔,观察结果,看是不是没洗干净的问题。加样尽量加到底部,避免沾壁!小鼠细胞凋亡相关基因(mouse BCL-2)ELISA试剂盒的线性范围问题:国 查看更多>
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TNFR1 (a.k.a. p55, CD120a) is the receptor for TNF(alpha) and also will bind TNF(beta). Upon binding TNF(alpha) a TNFR1+ cell is triggered to undergo apoptosis 查看更多>
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免 查看更多>
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为了纯化细胞蛋白质,采用有效的方法进行细胞破碎和固液分离是必要的。它是全过程的第一步,通常是将处于细胞不同位置的待纯化蛋白释放出来,溶入已知成分的溶液内。该步骤是目的蛋白初级分离纯化阶段的重要环节,它直接影响产物的回收率,也可能影响产物的纯度。 查看更多>
脂肪代谢是体内重要且复杂的生化反应,指生物体内脂肪,在各种相关酶的帮助下,消化吸收、合成与分解的过程,加工成机体所需要的物质,保证正常生理机能的运作,对于生命活动具有重要意义。脂类是身体储能和供能的重要物质,也是生物膜的重要结构成分。脂肪代谢异常引发的疾病为现代社会... 查看更多>
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细胞核控制着细胞的代谢和遗传.
细胞质中有各种细胞器,细胞内的化学反应大多都是在细胞质中进行,因此是代谢中心.
细胞核中有DNA,是遗传信息库,是细胞代谢和遗传的控制中心.
各种细胞中的主要代谢途径是一致的
APSC多能细胞抗衰术可谓是一类具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,它也是维持生命不息的最基本动力,多功能活化细胞抗衰老就是通过利用由自体采集的组织细胞,经实验室分离、培养后,将增殖的干细胞注入回人体内,通过多功能活化细胞自我靶向性功能准确到达相应的受损器官和组织,以达到修复衰老、病变的细胞,重建功能正常细胞和组织的目的。
红细胞代谢特点 123
speed外卖2021-07-27
第一次发帖子啥都不懂。。请问大家,红细胞分解到底生成什么呀?血红蛋白和触珠蛋白和红细胞什么关系?还...
下列关于衰老细胞特征的叙述,不正确的是()
A.衰老的细胞新陈代谢速率加快
B.在衰老的细胞内有些酶的活性降低
C.衰老的细胞呼吸速率减慢
D.细胞膜通透性改变,使物质运输功能降低

2015年7月6日讯/生物谷BIOON/--最近,来自艾默里大学的科学家发现在许多黑色素瘤中存在一个重要基因突变能够使癌细胞的代谢重新连线,使癌细胞的生长依赖于一种参与酮体生成的催化酶,这一发现为解决黑色素瘤细胞对靶向药物的抵抗,开发新的替代药物提供了深入见解,同时也部分解释了为什么这一突变在黑色素瘤细胞中频发。近日,相关研究结果发表在国际学术期刊molecularcell。
B-raf基因发生V600E突变在黑色素瘤细胞中非常常见,这一突变能够促进癌细胞生长,除了在黑色素瘤中存在,在一些结肠癌和甲状腺癌病例中也发现存在B-rafV600E突变。目前已经开发出一些针对B-rafV600E基因突变的靶向药物,但在临床实验中发现,在癌症得到明显改善之后,携带V600E基因突变的癌细胞都不可避免地产生药物抗性。
在这项研究中,研究人员发现B-rafV600E基因突变能够刺激癌细胞产生更多的HMG-CoA裂解酶,携带V600E突变的黑色素瘤细胞生长非常依赖于该酶,而其他的黑色素瘤细胞则不会。HMG-CoA裂解酶是酮体生成途径中一个重要酶,能够帮助机体在血糖水平较低时降解脂肪酸以获得能量。酮体生成途径能够受到低糖,高脂饮食刺激激活,通常发生于肝脏,但B-rafV600E基因突变启动了癌细胞中的酮体生成,以维持癌细胞生长存活。除此之外,研究人员还发现酮体生成途径的重要产物乙酰乙酸能够刺激携带B-rafV600E基因突变的癌细胞继续增殖。
总得来说,这项研究证明B-rafV600E基因突变能够使黑色素瘤细胞中的代谢途径重新连线,增强癌细胞对酮体生成途径的依赖性,这一发现对于解决黑色素瘤细胞对靶向药物的抵抗,开发新的替代药物具有重要意义。(生物谷Bioon.com)
1.《ContinuousCHOcellcultureswithimprovedrecombinantprotein
productivitybyusingmannoseascarbonsource:Metabolicanalysisand
scale-upsimulation》

2.《Adetailedmetabolic?uxanalysisofanunderdeterminednetworkofCHOcells》


1-s2.0-S0009250911001771-main.pdf(328.24k)
1-s2.0-S016816561001878X-main.pdf(521.01k)
新陈代谢:是活细胞中全部化学反应的总称,是生物与非生物最根本的区别,是生物体进行一切生命活动的基础。细胞代谢:细胞中每时每刻都进行着的许多化学反应。与代谢最为密切的两种物质是ATP和酶。
细胞新陈代谢是什么 123
点艹梦魔洉22017-10-03
细胞新陈代谢是指生物体的细胞与外界环境之间的物质和能量交换以及生物体的细胞内物质和能量的转变过程叫做新陈代谢。
Cell文章:细胞代谢的“帮手”123
医者仁心19932013-09-22
显性视神经萎缩(dominantopticatrophy)是一种以生命早期明显的进行性、对称性视觉丧失为特征的遗传性视觉疾病,一个叫做OPA1的基因发生突变是导致这一疾病的原因。在一项全面深入的OPA1研究中,研究人员发现这一基因在细胞代谢中充当了“帮手”。未来研究人员有可能利用这一特性来治疗线粒体疾病。
显性视神经萎缩(dominantopticatrophy)是一种以生命早期明显的进行性、对称性视觉丧失为特征的遗传性视觉疾病,一个叫做OPA1的基因发生突变是导致这一疾病的原因。
在一项全面深入的OPA1研究中,由DulbeccoTelethon研究所研究人员、帕多瓦大学生物化学教授LucaScorrano,以及西班牙国立心血管病研究中心(CNIC)组织稳态和修复项目协作者JoséAntonioEnríquez博士领导的研究小组,发现这一基因在细胞代谢中充当了“帮手”。未来研究人员有可能利用这一特性来治疗线粒体疾病。目前许多的线粒体疾病并没有现成的治疗方法
Enriquez博士解释说:“线粒体存在于我们所有的细胞中调控许多重要的过程,例如由食物源性的分子生成可利用的能量,适当的时候为细胞分裂、分化或甚至细胞死亡做准备。”
“多年来,我们的研究小组针对线粒体的功能以及与其功能失常相关的疾病独立开展了研究工作,想找到一些对策来开发出针对线粒体疾病的特异治疗,了解线粒体功能改变导致更常见疾病的机制。”
5年前两个研究小组加入合作,设法来了解线粒体疾病:显性视神经萎缩。罹患这一视觉疾病的患者具有OPA1基因突变。在过去的数十年里意大利的研究小组确定了OPA1基因编码蛋白的特征。OPA1蛋白调控了线粒体的形状,在显性视神经萎缩患者中这一蛋白缺失会引起一种神经元:视网膜神经节细胞进行性死亡,由于视网膜神经节细胞负责将来自眼睛的图像传送至大脑视觉中心,因此这导致了缓慢而进行性的视力丧失。这一疾病通常在学龄前期就显现症状,一个家庭中的成员疾病严重程度有所差异。西班牙研究小组为线粒体功能研究所开发的一些模型,为研究OPA1功能提供了合适的新型工具。
Enriquez和Scorrano说:“我们证实了,OPA1的任务是调控呼吸作用的效率,影响了呼吸链元件(将营养物质中的能量转换为可利用来进行细胞活动的能量形式的蛋白质复合物)在线粒体内膜中的连接方式。”
线粒体内膜就像一个流体,可响应刺激不断地改变形状;这些称之为嵴(cristae)的折叠形状并非是随意的,而是由OPA1活性所决定。
该研究证实,通过提高这一蛋白的活性有可能提升呼吸链生成能量的效率,促进细胞生长。作者们提出“在未来,我们或许要思考利用这一特性对线粒体病患者进行治疗干预,在不考虑导致线粒体功能异常的遗传缺陷条件下改善代谢的前景。”
Scorrano博士说:“对于诸如此类的罕见和异质性疾病,我们必须寻找能够适应于各种疾病的广泛治疗方法。我们正在致力从事这方面的工作,但现在谈及可能的治疗还为时过早。”
Enríquez说:“我们的研究工作标志着,我们对于细胞结构功能及形状之间关系的理解取得了重大的进展。线粒体嵴结构非常的独特,在不同组织、活动、食物摄取、病理等等之间它的形状显示巨大的差异。然而,长期以来并不清楚线粒体嵴可变形状与生物能量活动之间的关系。这项研究证实,改变嵴结构通过调节呼吸复合体的超组装诱导了线粒体生物能量学能力的直接改变。”
原文:http://www.ebiotrade.com/newsf/read.asp?page=2013922144343994
刚换的培养基过了一天就变成粉红色,细胞也不伸展,一直是圆形,是细胞代谢有问题吗?
FLUOstarOmegaACU细胞生理状态分析平台:
不破坏细胞结构,同步动态侦测细胞有氧呼吸,糖酵解OCR/ECA(总或乳酸ECA);

i.过氧敏感荧光素(或pH敏感荧光素),Ex340-380/535/Em630-680nm,实时测量线粒体/胞内/胞外重要代谢指标,荧光素为非结构性结合可逆转改变;
ii.可同时单个测量OCR/ECA其他参数,不会做成浪费,可采用时间分辨荧光技术可加强系统信噪比
iii.通过两个加药口,可对检测细胞加入适当抑制剂/刺激实时监测细胞对不同毒素作用